Influência da antibioticoterapia sistêmica no perfil inflamatório da periodontite apical induzida em ratos Wistar: estudo histológico, microbiológico e imunoistoquímica para CD4, CD8, CD20, CD45 e CD57

Abstract

Este estudo investigou a influência da antibioticoterapia sistêmica sobre a PA instalada. Para isso, 56 ratos foram divididos em 7 grupos (n=8): PA21 – PA de 21 dias ; PA36 (PA de 36 dias); AMO (PA tratado com Amoxicilina); MET (PA tratada com Metronidazol); AMP (PA tratada com Ampicilina); AM+C (PA tratada com Amoxicilina + Clavulanato de Potássio) e CLI (PA tratada com Clindamicina). A PA foi induzida pela exposição pulpar do 1o molar inferior do lado direito. Após 21 dias, os tratamentos foram iniciados e mantidas por 15 dias, até o sacrifício. No 21o e 36o dias foi realizada coleta microbiológica do canal distal e da saliva. Após a morte, as mandíbulas foram removidas e processadas para as análises: histológica e histométrica em coloração de H&E maturação colágena em picrosirius red; microbiológica em Brown e Brenn; e imunohistoquímica para CD4, CD8, CD20, CD45 e CD57. Testes estatísticos foram aplicados (p<0,05). O grupo PA36 apresentou inflamação mais intensa, maior perda óssea e menor maturação colágena comparado a PA21 (p<0,05). Os grupos tratados não foram diferentes de PA21 e PA36 quanto à inflamação e maturação colágena (p>0,05). Os grupos AMO, MET, AMP e AM+C apresentaram menor perda óssea em relação à PA36 (p<0,05), enquanto os grupos AMO e AM+C foram semelhantes a PA21 (p>0,05). Para CD4, o grupo PA36 apresentou maior imunomarcação em relação à PA21, AMO, MET, AMP e AM+C (p<0,05). Para CD45, o grupo PA36 apresentou maior imunomarcação em relação à PA21, AMO e AM+C (p<0,05). Não houve diferença para os outros imunomarcadores (p>0,05). Todos os grupos apresentaram bactérias no terço apical da raiz, incluindo o forame (p>0,05). O grupo AMO e AM+C apresentaram menor carga microbiana salivar em relação aos demais grupos (p<0,05). Não houve diferença para carga microbiana do canal radicular, assim como para Streptococcus spp. e fungos na saliva e no canal radicular (p>0,05). A antibioticoterapia não impediu a progressão dos microrganismos, não alterou a carga microbiana do canal radicular; alterou a microbiota salivar, no entanto, reduziu a perda óssea periapical, modulou a resposta inflamatória, evidenciada pela diminuição das células CD4⁺ e CD45⁺, e favoreceu a maturação das fibras colágenas.

This study investigated the influence of systemic antibiotic therapy on established AP. Fifty-six rats were divided into seven groups (n=8): AP21 (21-day AP); AP36 (36-day AP); AMO (AP treated with amoxicillin); MET (AP treated with metronidazole); AMP (AP treated with ampicillin); AM+C (AP treated with amoxicillin + potassium clavulanate); and CLI (AP treated with clindamycin). AP was induced by pulp exposure of the mandibular first molar on the right side. After 21 days, treatments were initiated and maintained for 15 days until sacrifice. On days 21 and 36, microbiological collection of the distal root canal and saliva was performed. After death, the mandibles were removed and processed for the following analyses: histological and histometric analysis in H&E staining; collagen maturation in picrosirius red; Microbiological analysis was performed using Brown and Brenn; and immunohistochemistry for CD4, CD8, CD20, CD45, and CD57. Statistical tests were applied (p<0.05). The PA36 group showed more intense inflammation, greater bone loss, and lower collagen maturation compared to PA21 (p<0.05). The treated groups were not different from PA21 and PA36 regarding inflammation and collagen maturation (p>0.05). The AMO, MET, AMP, and AM+C groups showed less bone loss compared to PA36 (p<0.05), while the AMO and AM+C groups were similar to PA21 (p>0.05). For CD4, the PA36 group showed greater immunostaining compared to PA21, AMO, MET, AMP, and AM+C (p<0.05). For CD45, the PA36 group showed greater immunostaining compared to PA21, AMO, and AM+C (p<0.05). There was no difference for the other immunomarkers (p>0.05). All groups presented bacteria in the apical third of the root, including the foramen (p<0.05). The AMO and AM+C groups presented a lower salivary microbial load compared to the other groups (p<0.05). There was no difference for the microbial load of the root canal, as well as for Streptococcus spp. and fungi in saliva and in the root canal (p>0.05). Antibiotic therapy did not prevent the progression of microorganisms, nor did it alter the microbial load of the root canal; however, it altered the salivary microbiota, reduced periapical bone loss, modulated the inflammatory response, evidenced by a decrease in CD4⁺ and CD45⁺ cells, and favored the maturation of collagen fibers.