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Publicação:
Ação antifúngica do pterostilbeno sobre cepas de Candida albicans, Candida dubliniensis e biofilmes microcosmos de estomatite protética

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Orientador

Junqueira, Juliana Campos

Coorientador

Carmo, Paulo Henrique Fonseca do

Pós-graduação

Ciências Aplicadas à Saúde Bucal - ICT

Curso de graduação

Título da Revista

ISSN da Revista

Título de Volume

Editor

Universidade Estadual Paulista (Unesp)

Tipo

Dissertação de mestrado

Direito de acesso

Acesso restrito

Resumo

Resumo (português)

As infecções por Candida spp. na cavidade bucal são frequentes, principalmente em indivíduos portadores de próteses dentárias. A terapia convencional com antifúngicos polienos e azóis apresenta limitações, incluindo efeitos adversos, toxicidade e surgimento de cepas resistentes. Nesse sentido, é fundamental a busca por compostos com potencial ação antifúngica. Esse estudo teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica do pterostilbeno (PTE) sobre Candida albicans, Candida dubliniensis e biofilmes microcosmos de estomatite protética, bem como avaliar sua atividade in vivo na infecção experimental em Galleria mellonella. Inicialmente, cepas de C. albicans e C. dublinensis, isoladas da cavidade bucal de pacientes com estomatite protética, foram avaliadas quanto à susceptibilidade ao PTE por meio dos ensaios de concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM) e curva de morte em culturas planctônicas. A seguir, o efeito do PTE foi avaliado sobre biofilmes microcosmos provenientes de amostras clínicas de estomatite protética, por meio da contagem de células viáveis em meios de cultura seletivos para leveduras e bactérias. Além disso, a citotoxicidade do PTE, bem como seus efeitos antifúngicos e imunomodulatórios, foram analisados no modelo in vivo G. mellonella. Os resultados revelaram a atividade fungicida do PTE sobre Candida spp., exibindo valores de CIM e CFM de 32 µg/mL para todas as cepas testadas. Na curva de morte, o PTE reduziu totalmente o crescimento de Candida nos períodos de 8, 24 e 48 horas. Em biofilmes microcosmos, o PTE reduziu a viabilidade de estreptococos, estafilococos e leveduras a 20x CIM. No estudo in vivo, não foi verificada toxicidade para G. mellonella quando o PTE foi inoculado até 20x CIM. O tratamento profilático com PTE resultou em aumento da sobrevida das larvas infectadas por C. albicans ou C. dubliniensis. Na infecção com C. albicans, verificou-se também redução da carga fúngica na hemolinfa com o tratamento por PTE. Na infecção por ambas as espécies de Candida, o tratamento com PTE não alterou o número de hemócitos. Dessa forma, conclui-se que o PTE exibiu ação antifúngica contra células planctônicas de Candida spp., biofilmes microcosmos de estomatite protética e infecção experimental, sugerindo seu uso potencial para o tratamento de infecções por Candida spp. associadas ao uso de próteses dentárias.

Resumo (inglês)

Candida spp. infections in the oral cavity are frequent, especially in individuals with dental prostheses. Conventional therapy with polyene and azole antifungals has limitations, including adverse effects, toxicity and the emergence of resistant strains. In this sense, the search for compounds with potential antifungal action is essential. This study aimed to evaluate the antifungal activity of pterostilbene (PTE) on Candida albicans, Candida dubliniensis and microcosm biofilms of prosthetic stomatitis, as well as its in vivo activity in experimental infection in Galleria mellonella. Initially, strains of C. albicans and C. dublinensis, isolated from the oral cavity of patients with prosthetic stomatitis, were evaluated for their susceptibility to PTE using the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum fungicidal concentration (MFC) and death curve assays in planktonic cultures. Next, the effect of PTE was evaluated on microcosm biofilms from clinical samples of prosthetic stomatitis, by counting viable cells in culture media selective for yeasts and bacteria. In addition, the cytotoxicity of PTE, as well as its antifungal and immunomodulatory effects, were analyzed in the in vivo G. mellonella model. The results revealed the fungicidal activity of PTE on Candida spp., exhibiting MIC and MFC values of 32 µg/mL for all the strains tested. In the kill curve, PTE completely reduced Candida growth at 8, 24 and 48 hours. In microcosm biofilms, PTE reduced the viability of streptococci, staphylococci and yeasts at 20x CIM. In the in vivo study, no toxicity was found for G. mellonella when PTE was inoculated up to 20x CIM. Prophylactic treatment with PTE resulted in increased survival of larvae infected with C. albicans or C. dubliniensis. When infected with C. albicans, there was also a reduction in the fungal load in the hemolymph with PTE treatment. In infection with both Candida species, treatment with ETP did not alter the number of hemocytes. Thus, it is concluded that PTE exhibited antifungal action against planktonic Candida spp. cells, prosthetic stomatitis microcosm biofilms and experimental infection, suggesting its potential use for the treatment of Candida spp. infections associated with the use of dental prostheses

Descrição

Palavras-chave

Biofilmes, Candida albicans, Biofilms, Polifenóis, Candida albicans, Polyphenols

Idioma

Português

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