Teses - Biotecnologia Animal - FMVZ

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  • ItemTese de doutorado
    Técnica de masquelet em defeito ósseo segmentar do rádio em coelhos com emprego do biovidro bioativo F18
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-07-14) Silva Júnior, José Ivaldo de Siqueira; Rahal, Sheila Canevese [UNESP]; Souza, Marina Trevelin de; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do estudo foi avaliar a capacidade do Biovidro F18, como um substituto do cimento ósseo no desenvolvimento da membrana induzida pela técnica de Masquelet em defeito ósseo segmentar do rádio, tendo o coelho como modelo experimental. Foram empregados 10 coelhos adultos, fêmeas, da raça Norfolk, com massa corporal média de 4 kg. Os animais foram divididos por ensaio randomizado em dois grupos de cinco indivíduos, conforme os momentos de observação no período pós-operatório (Grupo 1 = 21 dias, Grupo 2 = 42 dias). Promoveu-se falha óssea segmentar (1,0 cm de comprimento) no rádio, direito e esquerdo, a qual foi preenchida com “putty” de biovidro F18. Pelo exame radiográfico, o biomaterial mostrou-se no pós-operatório imediato como uma estrutura radiopaca bem delimitada, com densidade próxima ao tecido ósseo. Aos 21 e 42 dias de pós-operatório notou-se redução da radiopacidade e do volume visibilizado do biomaterial, com dispersão de partículas na região de falha segmentar. Pela análise histológica, a membrana induzida foi verificada em todos os animais, sendo composta predominantemente de tecido fibrocolagenoso; matrizes condroides e osteoide em processo de regeneração; densamente vascularizada; e com presença de reação tipo corpo estranho, composta por macrófagos e células gigantes multinucleadas. Conclui-se que o biovidro F18 mostrou resposta inflamatória do tipo corpo estranho, com desenvolvimento de membrana induzida sem capacidade de expansão para realização do segundo estágio da técnica de Masquelet.
  • ItemTese de doutorado
    Gradiente de densidade coloidal equipure™ utilizado pré e pós criopreservação de sêmen equino
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-26) Pereira, Raiza Rocha; Dell'Aqua Junior, José Antonio; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do trabalho foi verificar a qualidade espermática após utilização de um protocolo modificado de EquiPureTM antes e depois da criopreservação do sêmen equino. Experimento 1, foram utilizadas coletas de 15 garanhões (n=26). Quatro grupos experimentais foram formados: Controle (centrifugação convencional); EG (centrifugação com EquiPureTM antes do congelamento); CT+EG (centrifugação com EquiPureTM após o sêmen ser descongelado); EG+EG (centrifugação com EquiPureTM antes e depois do sêmen ser congelado). No experimento 2 foram realizados testes de fertilidade com os grupos experimentais: controle (centrifugação convencional); EG (centrifugação com EquiPureTM antes do congelamento); CT+EG (centrifugação com EquiPureTM após o sêmen ser descongelado); EG+EG (centrifugação com EquiPureTM antes e depois do sêmen ser congelado) utilizando quatro ciclos de 8 éguas (n=32) e um garanhão considerado “Bad freezing”. As inseminações foram feitas após a ovulação, mediante deposição profunda do sêmen no corno uterino ipsilateral ao lado da ovulação. Para as inseminações oito palhetas foram descongeladas em banho maria a 37°C por 30 segundos com uma concentração de 100 milhões de espermatozoides por palhetas. Os grupos CT e EG tiveram uma dose fixa de 800 milhões de espermatozoides. A dose inseminante dos grupos CT+EG e EG+EG foram dependentes da recuperação espermática pós-centrifugação (v:v) pós descongelamento com EquiPureTM. Os parâmetros espermáticos analisados foram a cinética espermática (motilidade total, progressiva e espermatozoides rápidos) pela análise computadorizada do movimento espermático e estabilidade da membrana plasmática, geração de O2- mitocondrial, potencial mitocondrial e peroxidação lipídica por citometria de fluxo. As análises espermáticas dos grupos Controle e EG foram analisadas imediatamente após descongelação 37ºC por 30 segundos (M0). Os grupos CT+EG e EG+EG foram analisados logo após o procedimento de centrifugação (M0). Todos os grupos foram analisados pós-incubação a 37ºC por 60 minutos (M60). No M0 (P<0,05) o grupo EG+EG aumentou a motilidade total, motilidade progressiva, rápidos, potencial de membrana mitocondrial e estabilidade da membrana plasmática comparada com os outros grupos avaliados; O grupo CT+EG aumentou os parâmetros de rápidos, estabilidade da membrana plasmática, potencial de membrana mitocondrial e diminuiu a produção de ânion superóxido, em relação aos grupos controle e EG. Pós-incubação a 37ºC por 60 minutos(M60) o grupo EG+EG aumentou os parâmetros de motilidade total e motilidade progressiva, rápidos, alto potencial de membrana mitocondrial, e diminui a produção de O 2- comparado com outros grupos. O grupo EG teve diferença do grupo controle na motilidade progressiva e espermatozoides rápidos. O grupo CT+EG diferiu do controle na motilidade total e progressiva, rápidos e peroxidação lipídica. O grupo CT+EG diferiu do EG na motilidade progressiva e espermatozoides rápidos. Controle, EG e CT+EG não diferiram com relação ao alto potencial de membrana mitocondrial e produção de O2- . Os grupos não diferiram na estabilidade da membrana plasmática. As taxas de recuperação dos espermatozoides foram menores nos grupos CT+EG e EG+EG (34,9±2,2; 30,1±1,5, respectivamente). A taxa de fertilidade por ciclo foi maior no grupo EG+EG (62,5%, 5/8) quando comparada aos demais grupos CT, EG, CT+EG (25% 2/8; 25% 2/8; 25% 2/8, respectivamente) os outros grupos testados não tiveram diferença. Concluiu-se, que a utilização de EquiPureTM aumenta a cinética espermática pós-descongelamento do sêmen equino, e que selecionar os espermatozoides antes da criopreservação e pós descongelamento pode aumentar a taxa de prenhez de garanhão considerado “bad freezing”.
  • ItemTese de doutorado
    Venografia seriada dos membros torácicos de equinos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-30) Melo Neto, Gabriel Barbosa de; Watanabe, Marcos Jun [UNESP]; Alonso, Juliana de Moura [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A venografia é bastante utilizada para o diagnóstico de enfermidades do sistema locomotor de equinos e ruminantes, além de ser utilizada para estudar a técnica de perfusão regional intravenosa. Este estudo avaliou venografias seriadas com diferentes volumes de contraste, diferentes vasos para aplicação e estudo anatômico do membro torácico. Foram utilizados seis equinos, com 10,5 ± 0,6 anos e peso corporal de 346±24,3 kg, divididos nos grupos grupo proximal (GP) com acesso na veia cefálica e grupo distal (GD) com acesso na veia digital palmar medial, submetidos a venografia em ambos os membros torácicos. Um torniquete foi colocado na porção distal do rádio e o segundo distal à articulação metacarpofalangeana. Cada grupo recebeu 40 mL de contraste ioexol dividido em quatro seringas de 10 mL e aplicados com scalp no cateter acoplado ao dispositivo PRN. Imagens dorsopalmar (DPa) e lateromedial (LM) obtidas após cada injeção de 10 mL de contraste, seguidas de imagens dos torniquetes proximal e distal para descartar refluxo de contraste ao final do volume de 40 mL. Foi buscado fechamento valvular, qualidade do preenchimento e extravasamento de contraste. Dois avaliadores fizeram a determinação da contagem de vasos, para tal, foram delimitadas linhas na articulação intercárpica, região média de metacarpo e na borda dos ossos sesamóides. Todos os vasos observados na área delimitada foram contados pelos avaliadores. Não foram observadas alterações da perviedade. O fechamento valvar foi mais observado em vasos de GP (Md= 2,0; 1,0- 4,0) em comparação ao GD (Md = 1,0; 1,0-3,0) (P < 0,001), assim como o número de imagens com extravasamento de contraste na região do cateter em GP (17/24) comparado com GD (7/24) (P = 0,0039). Um maior número de vasos foi observado no GD na borda dos sesamóides, e metacarpo em comparação com GP (P <0,01). Volumes de 10 e 20 mL preencheram menos vasos do que 40 mL na região de articulação intercárpica (P< 0,05). Nos sesamóides, os volumes de 10 e 20 mL preencheram menos vasos nas projeções DPa e LM de GP e 10 mL em GD (P< 0,05). As veias radiais e ramo palmar da veia mediana apresentaram uma disposição anatômica diferente da descrita na literatura. O acesso venoso distal com o uso de volumes de solução maiores que 10 mL foram mais eficazes no preenchimento de vasos descritos na nomina anatômica vaterinaria da região distal do membro de equinos. Esses achados são importantes para a técnica de perfusão regional intravenosa e para o estudo anatômico dos membros torácicos de equinos.
  • ItemTese de doutorado
    Caracterização e perfil dos egressos, entre os anos de 2015 e 2019, dos Programas de Pós-Graduação da área de Medicina Veterinária da FMVZ – UNESP – Botucatu
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-26) Lalla Júnior, José Roberto de; Hussni, Carlos Alberto [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A sociedade vem passando por inúmeras mudanças, nas mais diversas áreas do conhecimento. Assim, a universidade possui um papel fundamental neste processo de transformação. A continuidade de estudos de pós-graduação tem contribuído de forma significativa para este cenário de mudanças e, portanto, faz-se necessário o acompanhamento destes profissionais mesmo após o término do curso. Deste modo, o presente estudo teve por objetivo caracterizar e conhecer o perfil dos egressos, entre os anos de 2015 e 2019, dos Programas de Pós-Graduação, da área de Medicina Veterinária, da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ) da Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho” – Unesp, no Câmpus de Botucatu, compreendendo os Programas de Pós-Graduação em Animais Selvagens, em Biotecnologia Animal e em Medicina Veterinária. De forma específica, objetivou-se, também, identificar as variáveis sóciodemográficas, a formação destes egressos, assim como verificar, a partir da percepção dos alunos, os pontos fortes e fracos dos Programas, as principais competências adquiridas ao longo do curso, analisar o envolvimento destes estudantes referente à produção científica e à participação em eventos técnicos e científicos e, por fim, conhecer, de maneira geral, o grau de satisfação do aluno após a conclusão do curso. A partir da aplicação de um questionário semi-aberto, em formato on-line, foram obtidas as respostas de 376 egressos, dos 401 elegíveis, fato que correspondeu a 93,8% do público alvo. Os resultados demostraram um elevado grau de satisfação com o curso após o término (90,4% consideram ótimo e/ou bom). Ainda, houve um grande envolvimento dos alunos, com sólida formação técnica. Contudo, os relatos demonstraram a necessidade de desenvolvimento de habilidades voltadas à prática docente, com oferecimento de disciplinas voltadas à formação do professor, envolvendo pedagogia, estatística/bioestatística, redação científica, empreendedorismo e gestão acadêmica. A realização de parcerias público-privadas também deve ser incentivada, visando ao desenvolvimento de pesquisas e absorção destes profissionais pelo mercado de trabalho. Deste modo, é fundamental que as Instituições de Ensino Superior invistam no acompanhamento de seus egressos, tendo-o como uma ferramenta de auxílio às tomadas de decisões, fornecendo subsídios para estudos visando à atualização do currículo e do conhecimento que vem sendo transmitido, sempre com o foco naquilo que a sociedade espera e necessita. Por fim, o gerenciamento e acompanhamento dos egressos da pós-graduação se mostra de suma importância, pois essa modalidade de ensino é responsável, de modo geral, pela realização e desenvolvimento de pesquisa e investigação científica, contribuindo com o desenvolvimento científico e tecnológico do país.
  • ItemTese de doutorado
    Potenciais biomarcadores de fertilidade e produção espermática de garanhões tratados com análogo de gnrh (lecirelina)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-05-31) Cavalero, Thaís Mendes Sanches; Papa, Frederico Ozanam [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O uso de biotecnologias aplicadas ao sêmen é pouco eficaz em processos que reduzem drasticamente a produção espermática, como a senilidade e disfunções endócrinas. Nesses processos, o uso de GnRH tem ocasionado melhora da quantidade e qualidade espermática em algumas espécies. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia e os efeitos adversos da aplicação de GnRH em garanhões na melhora da qualidade seminal. No experimento 01 foram utilizados garanhões com qualidade espermática normal, divididos em grupo controle (n=3), e tratado (n=4). O grupo tratado recebeu doses diárias de lecirelina (50 µg;im) durante 60 dias, ambos os grupos foram avaliados durante o tratamento e por mais 60 dias após o término do tratamento. Amostras de sêmen e soro sanguíneo foram semanalmente coletadas. No Exp. 02 foram utilizados garanhões subférteis (n=4), com histórico de ≤ 20% de taxa de concepção, baixa qualidade ou produção espermática. Os subférteis foram submetidos ao mesmo tratamento do Exp.01, porém com avaliações quinzenais dos parâmetros espermáticos e hormonais. Em ambos os experimentos a resposta testicular endócrina foi mensurada por dosagem sérica de inibina-B, AMH e sulfato de estrona, determinadas por ELISA; e testosterona por radioimunoensaio. No Exp. 02 também avaliou-se os níveis séricos de FSH e LH por radioimunoensaio. Os parâmetros espermáticos avaliados foram número de espermatozoides totais (NET); cinética espermática pelo sistema CASA (IVOS Version 12 Hamilton Thorne Research, MA, USA): motilidade total e progressiva, número de espermatozoides rápidos; e análise morfofuncional por citometria de fluxo: potencial de membrana mitocondrial, integridade de membrana plasmática e acrossomal, estabilidade de membrana plasmática, peroxidação lipídica e produção de espécies reativas de oxigênio. Os resultados hormonais e espermáticos foram comparados semanalmente com os valores pré-tratamento durante todo o período experimental. Os parâmetros avaliados foram analisados dentro de cada momento pelo teste t (Student) e dentro de cada grupo pela análise de medidas repetidas no tempo (One-way repeated measures). O perfil sérico de AMH, inibina-B e sulfato de estrona não alteraram com o tratamento em nenhum experimento. No Exp.02 não ocorreu redução do FSH, porém o LH diminuiu da semana 1 (P>0.001) até o final do experimento. A testosterona sérica apresentou diferença entre as semanas 6 e 16 (302 vs 977 pg/ml, respectivamente P<0,033) e um garanhão subfértil aumentou o NET em 100% na semana 4. No Exp.01 o NET do grupo tratado aumentou em 50% após 4 semanas de tratamento e se mantiveram elevados até o final da avaliação. A estabilidade de membrana e o potencial de membrana mitocondrial aumentaram uma semana após o início do tratamento (P<0,001) no grupo tratado, retornando aos valores pré-tratamento 60d após o fim da aplicação. Em conclusão, embora o tratamento tenha ocasionado queda da testosterona sérica em alguns animais, outros hormônios indicadores da funcionalidade testicular não foram afetados. Já o aumento da produção espermática, da estabilidade e potencial de membrana mitocondrial demonstram que a terapia com lecirelina pode ser benéfica em determinados casos de subfertilidade.
  • ItemTese de doutorado
    Adição da gelatina ao meio diluente de refrigeração de sêmen equino
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-09) Canuto, Lucas Emanuel Ferreira; Papa, Frederico Ozanam [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A refrigeração de sêmen é uma biotecnologia que dá suporte para a reprodução equina. Nessa técnica o sêmen acrescido de meio diluente, no estado líquido, é submetido a diminuição da temperatura para 5 e 15°C, proporcionando redução do metabolismo espermático e aumento da sua vida útil. No entanto, há um decréscimo da viabilidade espermática após 24 horas de refrigeração, sendo um dos motivos a seimentação dos espermatozoides para o fundo do recipiente com consequente oscilação do pH e ,embora o metabolismo continue em menores proporções, há produção de substâncias prejudiciais ao sêmen. Uma alternativa a esse problema seria a utilização de meio diluente mais viscoso ou até sólido dificultando a sedimentação espermática. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a cinética e integridade da membrana plasmática, em sêmen equino refrigerado em meio diluente com adição de gelatina. A pesquisa foi dividida em duas etapas, no experimento I utilizou-se 6 garanhões, cada ejaculado colhido foi dividido em nove grupos: BS[]0%, BS[]1%, BS[]2%, BSS[]0%, BSS[]1%, BSS[]2%, BSG[]0%, BSG[]1%, BSG[]2%, onde as letras representam os meios BotuSÊMEN®-BS, BotuSÊMEN® SPECIAL-BSS, BotuSÊMEN® GOLD-BSG, e ‘’[]’’ referem-se a porcentagem da concentração de gelatina (0, 1 e 2%), e refrigerados a 5 e 15°C. No experimento II utilizou-se 20 garanhões, e cada ejaculado foi dividido em dois grupos BSG[]0% ou BSG[]2%, e refrigerado a 5°C. Os grupos foram refrigerados e avaliados nos momentos 24, 48 e 72 horas. A adição de gelatina, foi eficaz em mudar o estado físico, de líquido para sólido, sendo totalmente revertido, após aquecimento a 37°C até 10 minutos. É possível concluir que a adição de gelatina, nas concentrações de 1 e 2%, ao meio diluente de refrigeração equino não prejudicou a MT, MP e RAP, mas diminuiu as velocidades VAP, VSL e VCL. A gelatina na concentração de 2% não prejudicou a integridade de membrana acrossomal nem aumentou a peroxidação lipídica. Sendo necessário mais estudos na área com avaliação de novos parâmetros espermáticos e fertilidade.
  • ItemTese de doutorado
    Aplicação da análise de eletromiografia de superfície integrada com sensores inerciais (acelerômetros) no estudo do ciclo da locomoção em cães
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-04-03) Negrão, Roberta Rocha; Rahal, Sheila Canevese [UNESP]; Hormaza, Joel Mesa [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo deste estudo foi investigar a aplicabilidade da análise combinada de EMGs e acelerômetro na análise do ciclo da locomoção em cães. Estes sinais foram obtidos a partir do músculo bíceps femoral, de cães saudáveis das raças Labrador retriever e Golden retriever, durante o caminhar em velocidade controlada. Após o processamento do sinal, foi utilizado um filtro Butterworth passa-baixa de segunda ordem com frequência de corte de 6 Hz para o sinal de eletromiografia e um filtro passa-banda de com frequência de corte de 1Hz a 6Hz para o sinal do acelerômetro. O algoritmo foi aplicado também para determinar um valor limite para as fases do ciclo da locomoção. Em seguida, foram determinadas as correlações entre os sinais de ambos os transdutores. Dados relativos à atividade muscular percentual, tempo de apoio e balanço durante o ciclo da locomoção em cães saudáveis foram gerados após o processamento do sinal e diagramas de fase para comprovação dos pontos de corte. Foi possível concluir que a integração da análise de EMGs com sensores inerciais é uma ferramenta eficaz para a identificação com precisão de perfis estruturais de atividade muscular e a dinâmica de movimento durante o ciclo da locomoção em cães. O processamento dos sinais de EMGs e acelerômetro com filtros adequados e a utilização de um algoritmo para identificar as fases do ciclo da locomoção permitiram obter uma visão mais detalhada e precisa da atividade muscular do músculo bíceps femoral durante a locomoção. A análise combinada dos sensores foi eficaz em identificar as correlações entre as atividades musculares e as fases do ciclo de passada, e identificar validade dos ciclos para estudo, o que pode ser valioso na identificação de doenças musculoesqueléticas.
  • ItemTese de doutorado
    Avaliação da associação do gel de colágeno e biovidro f18® na cicatrização de feridas cutâneas não contaminadas em ratos Wistar
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-12-20) Silva, Bruna Martins da; Santos, Ivan Felismino Charas dos [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O biovidro F18® é um biomaterial cerâmico, o qual possui propriedades anti-biofime, angiogênica, vasodilatadora e osteocondutora. Objetiva-se com o presente estudo realizar avaliações clínica, termográfica, tensiométrica, morfométrica, histológica e imunoistoquímica de feridas cutâneas de ratos Wistar convencional tratadas com biovidro F18®. Foram utilizados 112 ratos Wistar convencional, machos adultos e hígidos. Após a anestesia geral, em cada animal foi efetuada uma ferida de 3 cm de diâmetro ne região dorsal. Os ratos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos de 28 animais, de acordo com o tratamento: G1 - solução salina (0,9%); G2 - pomada cicatrizante; G3 - gel de colágeno; G4 – mistura do pó de biovidro F18® e gel de colágeno. A avaliação clínica incluiu a mensuração da massa corpórea, temperatura corpórea e a avaliação macroscópica da ferida. A avaliação da temperatura superficial das feridas cutâneas foi realizada pela tomografia infravermelha, e a tensiometria foi avaliada pela força de tensão e deformidade máxima. Para realização da avaliação histológica e imunoistoquímica, eutanásias foram realizadas após indução anestésica, e biópsias excisionais foram realizadas em torno da lesão. O tecido de granulação apresentou variações significativas ao longo dos momentos e entre os grupos. A temperatura superficial das feridas tratadas com a solução salina (0,9%) apresentou aumento significativo ao longo dos momentos e entre os grupos. Os valores das áreas e contração das feridas dos demonstraram redução e aumento significativo, respectivamente, ao longo dos momentos. Foi identificado aumento significativo no número de células totais e aumento significativo para colágeno tipo I na ferida tratado com biovidro F18®. Concluiu-se que o biovidro F18® demonstrou efeitos benéficos na cicatrização de feridas cutâneas, destacando sua ação na indução de maior perfusão sanguínea, aumento da força de tensão, diminuição da área da ferida e aumento da taxa de oclusão, e diminuição da quantidade de células de reação inflamatória e estimulo na produção de colágeno tipo I.
  • ItemTese de doutorado
    Abordagem proteômica da gestação inicial em búfalas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-01-18) Codognoto, Viviane Maria; Oba, Eunice [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo deste estudo foi identificar marcadores séricos, urinários e de fluídos uterinos para o diagnóstico precoce da gestação em búfalas. Foram utilizadas 44 fêmeas bubalinas submetidas à sincronização hormonal do estro e divididas aleatoriamente em dois grupos: gestante (n = 30) e não-gestante (n = 14). O grupo gestante foi inseminado artificialmente e dividido em dois outros grupos: P12 (n = 15) e P18 (n = 15), dos quais foram colhidas amostras de fluido uterino, urina e sangue aos 12 e 18 dias após a inseminação durante o abate. Entretanto, no momento da colheita de material, apenas 8 animais de cada grupo apresentaram lavado uterino com a presença de embrião, confirmando a gestação, o que diminuiu o n amostral para 8 (P12 = 8; P18 = 8). O grupo não-gestante também foi redividido em dois grupos no final da sincronização: NP12 (n = 7) e NP18 (n = 7) e amostras de fluido uterino, urina e sangue colhidos no mesmo momento estabelecido para o grupo gestante. Nas amostras de sangue, o plasma foi separado, e a progesterona foi determinada por radioimunoensaio. O restante das amostras e o plasma foram preparados para digestão tríptica e submetidos a espectrometria de massas, por abordagem shotgun. Com relação a progesterona foi observado maior concentrações no grupo gestante (G12: 8,2 ± 1,5 ng/mL; G18: 14,4 ± 1,2 ng/mL) quando comparado aos não-gestante (NG12: 3,7 ± 1,0 g/mL; NG18: 3,9 ± 1,1 ng/mL), respectivamente. O fluido uterino apresentou um total de 1.068 proteínas em ambos os grupos, sendo que 941 diferiram entre os grupos. Na urina foram encontradas 798 proteínas considerando todos os grupos, sendo que 660 diferentes entre eles. As funções moleculares das proteínas relatadas no fluido uterino e urina foram atividade de ligação e catalítica; nos processos biológicos, o processo celular e regulação biológica foram os principais; e entidade anatômica foi o principal componente celular. Concluímos que a determinação da concentração plasmática de progesterona em búfalas pode ser considerada um método de diagnóstico gestacional alternativo quando os demais métodos não podem ser aplicados no período. Já com relação a análise proteômica nossos resultados mostraram mudanças proteicas qualitativas e quantitativas no fluido uterino e urina de búfalas gestantes e não-gestantes, sendo as principais funções destas proteínas atuar no transporte e metabolismo celular, remodelação endometrial necessária para o alongamento do concepto, proteção embrionária e degradação de proteínas defeituosas, funções estas necessárias para manter a receptividade uterina durante o estabelecimento da gestação.
  • ItemTese de doutorado
    Biópsias testiculares em série frequentes com agulha tru-cut permitem avaliação do perfil transcricional sem efeitos adversos em carneiros
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-09-30) Pupulim, Antônio Guilherme Roncada [UNESP]; Ferreira, João Carlos Pinheiro [UNESP]; Kastelic, John Patrick; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Os testículos são os órgãos responsáveis pela produção e secreção de esteroides sexuais masculinos e espermatozoides. As gônadas, localizadas na bolsa escrotal, são ligadas ao corpo pelo funículo espermático. Os mecanismos de termorregulação, são controlados pelo sistema nervoso autônomo, que atua sobre as glândulas sudoríparas e túnica dartos na bolsa escrotal, cone vascular e músculo cremaster. Internamente à bolsa escrotal, encontra-se a túnica vaginal parietal, que reveste o escroto, e a visceral, revestindo os testículos e epidídimos. Envolvendo completamente os testículos, a túnica albugínea invade o parênquima gonadal e o divide em lóbulos, onde encontramos os túbulos seminíferos, local de produção dos espermatozoides, que são conduzidos e armazenados no epidídimo, sofrendo o processo de maturação. Na maturidade sexual, os túbulos seminíferos correspondem a 84% do peso testicular, sendo esse representado pela circunferência escrotal, critério utilizado para a seleção de reprodutores. Nos carneiros, a espermatogênese, evento cíclico que culmina na formação dos espermatozoides, dura aproximadamente 47 dias. Histologicamente, os túbulos seminíferos são divididos em compartimento tubular, composto pelas células germinativas e as de Sertoli, além do compartimento intersticial, onde são encontradas às células de Leydig, produtoras de testosterona. A avaliação andrológica afere o potencial reprodutivo masculino e avalia a condição física, qualidade espermática, libido e as características morfológicas do sistema reprodutor. Por permitir a análise ultrassonográfica da histomorfologia testicular, a ultrassonografia tem sido usada como ferramenta complementar ao exame andrológico. O uso da biópsia testicular fornece informações as quais auxilia no prognóstico das funções reprodutivas. Entretanto, são poucos os estudos que detalharam os procedimentos pré- e pós-biópsia voltados a garantir a integridade funcional testicular. Além disso, não há relatos da realização de biópsias sequenciais em pequeno intervalo de tempo. O objetivo deste trabalho foi apresentar as alterações testiculares ao longo do desenvolvimento, principais métodos de avaliação andrológica e testicular, bem como avaliar os efeitos de biópsias sequenciais na qualidade espermática, ultrassonografia e análise dos transcritos. Foram realizadas biopsias testiculares com agulha 16 G Tru-cut em seis carneiros Santa Ines x Dorper, nos momentos 0, 3, 6, 12, 24 e 48 h. Antes do primeiro procedimento os carneiros receberam uma aplicação de benzilpenicilina benzatina (30,000 IU/kg IM) e flunixin meglumine (1.1 mg/kg, uma aplicação ao dia por 3 d). Antes de cada biópsia, realizava aplicação de botão anestésico com 1 ml de lidocaína 2% e antissepsia da pele da bolsa escrotal. Imediatamente após cada biópsia, foi aplicado pressão digital (> 5 min) seguido de compressa de gelo (10 min). As amostras testiculares foram analisadas pelo RT-q PCR para quantificação de transcritos envolvidos na inflamação aguda (TNFα, IL-1), estresse oxidativo (GPX1, SOD2, HSP70) e esteroidogênese (STAR). A coleta de sêmen foi realizada 3 dias antes e 28 dias após a primeira biópsia. As avaliações ultrassonográficas foram realizadas 5 dias após a primeira biopsia e a cada 4 dias até completar 21 dias. Não houve diferença (P > 0,05) nas características do perfil transcricional, seminais e ultrassonográficas. Além disso, não foram encontrados sinais de dor, aumento da temperatura, inchaço ou sangramento até 28 dias. Portanto, biopsias testiculares não causaram alterações inflamatórias macroscópicas na bolsa escrotal e testículos, não afetaram as caraterísticas seminais e ultrassonográficas do parênquima testicular e não alteram o perfil testicular transcricional de genes envolvidos na inflamação, estresse oxidativo e esteroidogênese.
  • ItemTese de doutorado
    Avaliação dos biomarcadores no líquido sinovial de ovinos com osteoartrite tratados com membranas sintéticas e células-tronco mesenquimais
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-27) Rosa, Gustavo dos Santos [UNESP]; Alves, Ana Liz Garcia [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Devido ao baixo potencial de reparação apresentado pela cartilagem articular, as enfermidades articulares são causas frequentes de dor e diminuição de desempenho. Por seu caráter crônico, a osteoartrite representa um desafio aos tratamentos disponíveis. Assim, novas estratégias e abordagens são necessárias para aprimorar o reparo do tecido cartilaginoso. A engenharia tecidual se destaca neste sentido, valendo se da associação entre biomateriais, células e fatores de crescimento, para promover um aporte biomecânico e celular potencialmente benéfico para a reparação condral. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os biomarcadores articulares após tratamento da osteoartrite experimental em 32 ovinos, utilizando diferentes membranas sintéticas associadas ou não a células-tronco mesenquimais. As membranas constituídas por polidioxanona apresentaram os resultados mais relevantes, incluindo maior concentração de biomarcadores de síntese e menor concentração de biomarcadores de degradação de matriz extracelular. A comparação dos resultados nos diferentes grupos indica que a associação de diferentes princípios da engenharia tecidual, como a inclusão de uma fonte celular em um arcabouço, é a estratégia que gera melhores parâmetros nos biomarcadores do metabolismo da matriz extracelular condral.
  • ItemTese de doutorado
    Uso de índices do fluxo aórtico derivados da ecocardiografia transtorácica para avaliar a resposta ao desafio hídrico em cães anestesiados
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-11-18) Oliveira, Guillermo Carlos Veiga de; Teixeira Neto, Francisco José [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Objetivo: avaliar a habilidade das medidas de fluxo aórtico pela ecocardiografia transtorácica para discriminar a resposta a uma prova de carga (PC) em cães anestesiados hígidos. Delineamento experimental: estudo experimental, prospectivo. Animais: Total de 48 cães anestesiados com isoflurano (14,2-35,0 kg) submetidos à cirurgia eletiva. Métodos: A fluido responsividade foi avaliada antes da cirurgia através de uma PC (Ringer lactato 10 mL/kg por via intravenosa durante 5 minutos). Aumentos percentuais no volume sistólico através da termodiluição transpulmonar (VSTDTP) >15% dos valores registrados antes da PC definiram os respondedores a expansão volêmica. Um grupo de 24 animais foi definido como não respondedores (VSTDTP ≤15%). Quando VSTDTP foi > 15% após a primeira PC, outras provas adicionais foram administradas até o VSTDTP ser ≤15%. O status final de fluido responsividade foi baseado na resposta a última PC. Os aumentos percentuais após a PC nos índices de fluxo aórtico [integral de velocidade em função do tempo (VTIPC) e velocidade máxima (VmaxPC)] e na pressão arterial média (PAMPC) foram comparados com VSTDTP. Resultados: Após uma PC, 24 animais foram respondedores. Para os não respondedores, o VSTDTP foi ≤15% após uma, duas e três PCs em oito/24, 15/24 e um/24 animais, respectivamente. A PC que definiu a responsividade aumentou VSTDTP em 29 (18-53)% nos respondedores e em 8 (-3 a 15)% nos não respondedores [média (intervalo)]. A área sob a curva de características de operação do receptor (AUROC) de VTIDH (0,901) foi maior que as AUROCs de VmaxPC (0,774, p = 0,041) e PAMPC (0,519, p < 0,0001). PAMPC não previu a capacidade de resposta (p = 0,826). Os melhores valores de corte para discriminar respondedores, com as respectivas zonas de incerteza diagnóstica (“gray zones”) foram >14,7 (10,8-17,6)% para ∆VTIPC e >8,6 (-0,3 a 14,7)% para ∆VmaxPC. Os animais dentro da “gray zone” foram 17% (∆VTIPC) e 50% (∆VmaxPC). Conclusões e relevância clínica: As alterações no VTI induzidas pela PC podem determinar a responsividade com razoável acurácia em cães e podem desempenhar um papel importante na fluidoterapia guiada por metas.
  • ItemTese de doutorado
    Instabilidade cromossômica em embriões equinos provenientes de injeção intracitoplasmática de espermatozoide (icsi)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-09-21) Scheeren, Verônica Flores da Cunha; Papa, Frederico Ozanam [UNESP]; Ruijter-Villani, Marta de; Stout, Tom; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) é um método estabelecido e amplamente utilizado para alcançar a fertilização de oócitos em tecnologias de reprodução assistida equina. A ICSI reúne diversas aplicações, como para éguas doadoras idosas, éguas que precisam ser sacrificadas ou que morrem repentinamente, animais com distúrbios do trato reprodutivo, sêmen de má qualidade, palhetas raras e/ou caras de sêmen congelado. No entanto, nem todos os oócitos fertilizados por ICSI sofrem clivagem e se desenvolvem em embriões viáveis. A primeira divisão mitótica no zigoto é bastante singular em comparação com a divisão mitótica em células somáticas. O oócito perde seus centríolos durante a oogênese e na fertilização, o espermatozoide reintroduz dois centríolos no oócito. Os mecanismos que impulsionam essas divisões pós-zigóticas propensas a erros ainda são pouco compreendidos. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência e o tipo de defeitos de segregação cromossômica durante as primeiras divisões mitóticas de embriões de ICSI equinos. A imunofluorescência sistemática e a microscopia confocal foram realizadas em zigotos equinos fixados (n = 177 oócitos injetados) 24 horas após ICSI. Quarenta e nove zigotos estavam em mitose, 13 em fase pronuclear (26,5%), 11 em prófase ou pró-metáfase (22,4%), 14 em metáfase (28,5%) e 11 em anáfase ou telófase (22,4%). Os erros mais comuns observados nos zigotos em mitose foram centrossomos fragmentados e centrossomos mal posicionados. Concluímos que o centrossomo não é crucial para a montagem do fuso. Além disso, observamos uma alta incidência de fragmentação de material pericentrossomal. Isso poderia explicar por que os embriões de ICSI equinos ainda apresentam baixa eficiência quando comparados a outras espécies animais.
  • ItemTese de doutorado
    Radiographic indirect lymphography using liposoluble contrast for sentinel lymph node mapping of dogs with cutanoeus mast cell tumor
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-04) Albernaz, Vinicius Gonzalez Peres [UNESP]; Quitzan, Juliany Gomes [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O mastocitoma cutâneo (MCTc) é uma das neoplasias cutâneas mais comuns em cães. Metástase para o linfonodo (LN) drenante é a principal rota de disseminação sistêmica do MCTc. A detecção precoce de metástases em LNs é crucial no estadiamento e tratamento correto de cães com MCTc. O LN sentinela é amplamente variado entre indivíduos. O objetivo desta tese é realizar uma revisão descritiva do sistema linfático canino aplicado ao mapeamento de LNs sentinelas de cães com MCTc. Simultaneamente, foi conduzido um estudo clínico de cães com ocorrência natural de MCTc para avaliar se o papel da linfografia indireta (LI) com óleo iodado (OI) combinado com o método colorimétrico com azul patente (AP) na detecção do LN sentinela. A principal hipótese era que a LI ajudaria o cirurgião a detectar LNs intracavitários e mais LNs que a técnica do AP. Vinte e três cães fizeram parte do estudo prospectivo. LI OI detectou 29 LNs sentinelas em 19 cães, enquanto 4 não exibiram opacificação em LNs. O AP detectou 26 LNs em 19 cães, com 4 cães não demonstrando coloração azulada em LNs. Trinta e um LNs foram resseccionados, sendo que 10 estavam metastáticos. Laparotomia foi necessária para remover LNs ilíacos opacificados em 26% dos cães. A taxa de concordância entre a LI OI e LN regionais e AP e LNs regionais foi de 82,6%. A taxa foi de 78.2% quando comparando a LI com o AP. Somente um cão apresentou o LN sentinela drenante diferente do LN regional detectado pela LI. Em um contexto clínico, a LI com OI foi responsável por aumentar o número de LNs ressecionado em 41% (29% dos LNs removidos). Não houve diferença estatística quando comparando AP e a LI no cenário base do estudo (p=0.01855), contudo em um cenário clínico houve diferença significativa favorecendo a LI (p=0.0081). A opacificação desigual dos LNs sentinelas não teve associação significativa com a presença de metástase (p=0.2264). O mesmo ocorreu com a coloração azul clara do LN (p=0.6673). Contudo, o tamanho dos LNs metastáticos foi significativamente maior que os normais (p=0.0456). LNs aumentados de tamanho apresente 4.6 mais riscos de estarem metastáticos que os LNs não-palpáveis ou normais (p=0.0374). Locais de alto risco, limites de 3cm no tamanho, invasão profunda e sinal de Darier não estavam associados com metástase locorregional (p>0.05). Os resultados provenientes do mapeamento de LNs sentinelas foram responsáveis por 62,5% das indicações para quimioterapia adjuvante pós-operatória, mas somente um caso teve indicação alterada somente pela LI. Contudo, 60% dos cães com doença metastática apresentaram um LN sentinela metastático intracavitário que só pode ser detectado no pré-operatório pela LI. A LI com OI pré-operatória associada com o AP é um método eficiente de detectar LNs sentinelas em MCTc realizando cirurgia curativa. LI aumenta a taxa de detecção de LNs sentinelas em um contexto clínico. O padrão de opacificação do LN sentinela não deve ser utilizado para predizer metástases.
  • ItemTese de doutorado
    Análise morfométrica dos discos intervertebrais e descrição da técnica de acesso intradiscal em cães
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-11) Prata, Luiza Garcia; Machado, Vânia Maria de Vasconcelos [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    As enfermidades da coluna vertebral estão entre as mais ocorrentes dentro das doenças neurológicas em cães, sendo a hérnia de disco a de maior prevalência. O tratamento é normalmente conservador com ou sem associação da cirurgia. Na medicina procedimentos minimamente invasivos e a substituição de discos por implantes tem sido realizados com êxito. Este estudo tem como objetivo descrever a técnica de acesso adaptada ao paciente canino e analisar a morfometria dos discos por ressonância magnética. Seis cães post-mortem foram utilizados para reproduzir o procedimento, guiado por tomografia computadorizada e fluoroscopia. Dois discos lombares foram infiltrados com um cateter 20G e se registrou dados sobre angulação, o decúbito e o tempo decorrido. Pela tomografia a variação angular da agulha para acesso intranuclear foi de 43° a 67°. O tempo de procedimento variou de 30 a 60 minutos, aproximadamente. Pela fluoroscopia C-arm o intervalo foi a metade do tempo gasto no tomógrafo. O procedimento guiado por ambas as técnicas de imagem permitiu o acesso em 100 % dos discos e excelente visualização da agulha. A técnica pode ser utilizada para diversos procedimentos que necessitem ingressar o disco ou estruturas próximas. Realizou-se análise de 140 discos intervertebrais hígidos por exames de ressonância magnética, separados por segmento vertebral e em dois grupos de peso. Mediu-se o comprimento, a largura e a área dos discos e dos respectivos núcleos pulposos. O menor disco cervical foi o C2-3 e o maior disco C4-5. Na coluna toracolombar os discos de maior e menor dimensão divergiram entre os grupos de peso. Observou-se que o núcleo pulposo possui cerca de 25% do tamanho total do disco na cervical em todas as raças. Esta relação permaneceu similar em cães condrodistróficos e reduzida para não condrodistróficos e sem raça definida, no segmento toracolombar. Pela análise do volume nuclear, sugere-se de 1 a 4 ml como dose para administração de substâncias de acordo com o peso do animal e com o tipo de veículo a ser administrado. Informações morfométricas contribuem em vários âmbitos, desde o desenvolvimento de próteses, diagnósticos imaginológicos e procedimentos terapêuticos.
  • ItemTese de doutorado
    Estudo anatômico do abdome do tamanduá-bandeira (myrmecophaga tridactyla linnaeus 1758) por tomografia computadorizada
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-04) Oliveira, Fernanda Gabriela da; Monteiro, Maria Jaqueline Mamprim de Arruda [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O Myrmecophaga tridactyla Linnaeus 1758 (Tamanduá-bandeira) é uma espécie ameaçada de extinção devido aos altos índices de atropelamentos e perda de habitat. Estudos de diagnóstico por imagem e anatômicos, são primordiais para instituir tratamento adequado e para conservação dessa espécie. Este estudo tem por objetivo proporcionar a identificação das estruturas abdominais do Tamanduá-bandeira nas imagens de TC e nos espécimes anatômicos, com o intuito de servir como material didático de consulta a fim de auxiliar médicos veterinários na rotina clínica. Foram obtidas imagens tomográficas do abdome de cinco Tamanduá-bandeira. Para ilustrar a anatomia macroscópica, foram utilizados 4 cadáveres da espécie Tamanduá-bandeira adultos, com causa mortis por atropelamento, para a confecção de fotos macroscópicas das estruturas internas do abdome. Foi possível identificar grande parte das estruturas anatômicas abdominais do Tamanduá-bandeira e as imagens macroscópicas permitiram uma visão mais ampla da anatomia topográfica facilitando a identificação dos órgãos nas imagens de TC.
  • ItemTese de doutorado
    Efeitos das diferentes soluções de congelação sobre a criopreservação de células-tronco mesenquimais caninas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-27) Santos, Bruna Aparecida dos; Landim, Fernanda da Cruz [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Para utilizar as células-tronco mesenquimais caninas (CTMs) em terapias é imprescindível que sejam formados criobancos de armazenamento celular, sendo assim, a metodologia da criopreservação de CTMs necessita de estudos, uma vez que o efeito da congelação e dos agentes crioprotetores sobre as células obtidas de tecido adiposo canino ainda é pouco conhecido. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de diferentes tipos de soluções na criopreservação das CTMs, sobre a estrutura, viabilidade, proliferação celular, ultraestrutura e expressão gênica, bem como no seu desenvolvimento pós-descongelação. Para isto, foram isoladas células-tronco de 12 cadelas. As amostras foram divididas em 5 tratamentos: não criopreservado (controle) = NCRIO; 90% SFB (Soro fetal Bovino) com 10% DMSO = SFB; Meio de cultivo DMEM/F12 alta glicose acrescido com 20% SFB e 10% DMSO = DMEM/F12; DMEM/F12 alta glicose, acrescido com 5%PVA, 5% de ITS, 5% de BSA e 10% DMSO = PVA/ITS/BSA e BambankerTM = BAM. Sendo que em todos foram utilizados o Dimetilsufóxido (DMSO) como agente crioprotetor principal. As células foram avaliadas antes da criopreservação, pós-descongelação imediata e após o recultivo. Foi realizada uma análise de custo das diferentes soluções. A viabilidade e apoptose celular foram avaliadas pelo teste de exclusão com o corante Trypan blue e anexina V; a proliferação celular, pela curva de crescimento; a ultraestrutura em microscópio eletrônico de transmissão, a expressão gênica por RT-qPCR e a análise de custo através de pesquisa de mercado. Todos os dados foram submetidos a análise estatística pelo software SAS versão 9.4. Os resultados mostraram que as CTMs criopreservadas com o meio comercial foi superior aos demais quanto ao número de células e a proliferação celular, mas foi similar aos grupos NCRIO e PVA/ITS/BSA quanto a viabilidade celular. Embora não tenham sido observadas alterações morfológicas significativas entre os tratamentos de criopreservação, a ultraestrutura celular variou de acordo com os componentes do meio, no qual a morfologia mais próxima da encontrada nas células frescas foi observada nos grupos PVA/ITS/BSA e BAM. A expressão gênica demonstrou que as células apresentaram diferenças quanto aos tratamentos para os transcritos CD44, TGFB1, CXCL12 e IDO. Neste estudo foi observado que embora o tratamento com a marca comercial tenha sido superior aos demais crioprotetores, as outras combinações de substâncias crioprotetoras testadas foram eficientes na criopreservação das CTMs caninas, sendo alternativas que podem ser utilizadas. Todos os tratamentos possibilitaram a retomada das funções celulares normais após a descongelação e recultivo. E as soluções autoformuladas são economicamente mais viáveis que a marca comercial. Esses resultados são importantes para o estabelecimento de protocolos de criopreservação de CTMs nessa espécie, pois aumentam as possibilidades de escolha da solução crioprotetora e também permite o uso de soluções com custos mais acessíveis e sem componentes contaminantes como o SFB.
  • ItemTese de doutorado
    Mapas corneais e tomografia de segmento anterior do bulbo ocular de gatos e coelhos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-06-28) Ramos, Leticia de Andrade; Brandão, Claudia Valeria Seullner [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo deste trabalho foi analisar os mapas topográficos da córnea e imagens tomográficas de câmara anterior de gatos domésticos e coelhos fornecidos pelo Galilei G4 (Galilei G4 Lens Profissional TM – Ziemer Ophthalmics System AG, Suiça). Foram avaliados 13 gatos (25 olhos) adultos sem raça definida, machos e fêmeas; e 20 coelhos (n=40 olhos) machos, entre 2 e 14 meses. Dez coelhos (Oryctolagus cuniculus) foram avaliados aos 2 (M2) e 5 (M5) meses. Outro grupo também composto por 10 coelhos foi avaliado aos 5 (M5), 8 (M8) e 14 (M14) meses. Os seguintes mapas foram analisados: poder total da córnea; paquimetria; anterior e posterior da curvatura axial e instantânea, elevação BFS e BFTA. Com relação aos gatos, nós observamos algumas diferenças dos mapas topográficos da córnea em relação aos humanos: os mapas de curvatura anterior e posterior e poder corneal total apresentaram-se uniformes e mais planos; e o mapa de paquimetria apresentou-se uniforme sem padrão característico do mapa de córnea humana. Nas imagens tomográficas foi observado que a superfície anterior e posterior da córnea e anterior da lente tendem ao paralelismo. Com relação aos coelhos, os padrões encontrados nos mapas se mantiveram nas diferentes faixas etárias: os mapas de curvatura apresentaram padrão asférico; o mapa de curvatura instantânea posterior apresentou anel de encurvamento (“donut”) central. Considerando o mapa de poder total da córnea foi observada multifocalidade, com o centro com maior poder que a periferia. E o mapa paquimétrico apresentou-se uniforme, diferente do padrão do mapa humano. Pelo conhecimento dos autores, esse é o primeiro estudo que descreve os mapas topográficos da córnea dos gatos e dos coelhos utilizando o Galilei. Destaca-se a necessidade de mais estudos a respeito dos mapas topográficos da córnea dos animais a fim de enriquecer o conhecimento acerca da óptica ocular.
  • ItemTese de doutorado
    Técnica da membrana induzida usando cimento ósseo ortopédico ou resina acrílica odontológica, acrescidos ou não de antibiótico, em defeito segmentar no rádio de galinhas (Gallus gallus domesticus)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-07-15) Campeiro Junior, Luiz Donizete; Rahal, Sheila Canevese [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do estudo foi avaliar membranas induzidas pela técnica de Masquelet com o emprego de cimento ósseo ortopédico ou resina acrílica odontológica, acrescidos ou não de antibiótico, em modelo de falha óssea segmentar induzida no rádio esquerdo de galinhas. Foram utilizadas 60 galinhas hígidas, as quais foram distribuídas em Experimento 1 (G1 – cimento ósseo ortopédico, G2 – cimento ósseo ortopédico acrescido de cefazolina em pó) e Experimento 2 (G1 – resina acrílica odontológica, G2 - resina acrílica odontológica acrescida de cefazolina em pó). Em ambos experimentos foram realizados exames radiográficos do antebraço esquerdo no pós-operatório imediato e aos sete, 15 e 21 dias de pós-operatório. Para a coleta da membrana induzida, procedeu-se em cada grupo a eutanásia de cinco aves aos sete, 15 e 21 dias de pós-operatório. No Experimento 1, radiograficamente o cimento ósseo foi identificado com uma massa radiopaca ocupando a falha óssea. Pela análise histológica não houve diferença na espessura média entre os grupos em todos os momentos. As células multinucleadas multifocais diferiram entre os grupos aos 7 (G1>G2) e 21 (G2>G1) dias após a cirurgia. O infiltrado inflamatório mononuclear diferiu entre os grupos apenas no dia 21 (G1>G2). A proliferação de tecido fibroso não diferiu entre os grupos em todos os momentos de avaliação. A densidade dos vasos sanguíneos diferiu apenas aos 21 dias de pós-operatório (G2G2). No Experimento 2, a resina acrílica tinha radiograficamente densidade próxima aos dos tecidos moles. Não ocorreram diferenças da espessura média da membrana e na densidade de vasos sanguíneos, entre G1 e G2 aos 15 e 21 dias de pós-operatório. A área focal de metaplasia mixoide e áreas multifocais de metaplasia cartilaginosa não diferiram entre G1 e G2. A porcentagem de células multinucleadas multifocais foi mais evidente no G2. Conclui-se que é possível produzir membranas induzidas com produtos derivados do polimetilmetacrilato, com ou sem o uso de antibiótico; contudo, com diferenças histológicas.
  • ItemTese de doutorado
    Teste de açúcar oral em jumentos das raças Pêga e Nordestina
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-04-29) Becegatto, Daniela Bortoli; Watanabe, Marcos Jun [UNESP]; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Asininos podem ser acometidos por alterações endócrinas e metabólicas, entre elas a síndrome metabólica asinina (SMA). Neste sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a resposta glicêmica e insulinêmica de asininos ao teste de açúcar oral (TAO) e a relação da glicemia e insulinemia basal com o escore de condição corporal (ECC) em jumentos das raças Nordestina e Pêga. Foram utilizados 20 animais, 10 fêmeas da raça Nordestina (G1) e 10 da raça Pêga (G2). Previamente à execução do teste, foram realizados exame físico, mensuração do peso, avaliação quanto ao ECC e escore de crista de pescoço (ECP). Para a realização do TAO, foi utilizado xarope de milho na dose de 0,15 ml/kg via oral e amostras de sangue venoso foram colhidas antes, e após 5, 15, 30, 45, 60, 75, 90, 120, 150, 180, 210 e 240 min para a determinação da glicemia e 5, 15, 45, 60, 75, 90, 120, 150 min para a insulinemia. Os resultados demonstraram diferença entre as raças na resposta glicêmica, apresentando diferença estatística com o momento basal, os momentos de pico foram variáveis, sendo que a maior frequência foi aos 45, 60, 75 min. Com relação à insulina não houve diferença estatística entre as raças após a administração do xarope, para os valores de insulina a média basal foi de 5,02 ± 2.09 µUI/ml para a raça Nordestina e 5,4 ± 2,95 µUI/ml para a raça Pêga. Nas avaliações morfométricas, foi encontrada diferença na média de peso, no ECC e ECP, o ECC da raça Nordestina teve média de 4,3 ± 1,05, para a raça Pêga a média foi de 5,6 ± 1,64. Os resultados demonstraram correlação positiva entre glicose e insulina, o que suporta o uso do TAO na avaliação da relação entre glicose e insulina, e correlação positiva entre ECC e insulina, demonstrando a importância do monitoramento de animais com alto ECC, foi possível observar que fatores relacionados à espécie, raça, escore corporal e fatores ambientais devem ser levados em consideração ao se avaliar a resposta a testes dinâmicos.