Efeito modulatório dos ácidos graxos na síntese de prostaglandinas F2α e E2 em embriões bovinos produzidos in vitro

RESUMO Em bovinos, a mortalidade embrionária precoce decorrente de falhas no reconhecimento materno da prenhez (RMP) constitui uma das principais causas de insucesso reprodutivo. A síntese de prostaglandinas (PGs), especialmente prostaglandina F2α (PGF2α) e E2 (PGE2), pelo endométrio e células trofoblásticas do embrião e concepto, é determinante para o RMP. A PGE2 favorece o RMP, enquanto a PGF2α exerce ação luteolítica. Além disso, uma maior razão PGE2:PGF2α está associada ao desenvolvimento embrionário, implantação e RMP. Ácidos graxos (AGs) têm sido estudados por modular a biossíntese de PGs, assim, hipotetizou-se avaliar os efeitos da suplementação de AGs específicos no cultivo in vitro (CIV) de embriões bovinos sobre a síntese de PGs. Ovários provenientes de fêmeas Nelore abatidas tiveram folículos de 2 a 10 mm aspirados, e oócitos com citoplasma homogêneo e múltiplas camadas de células do cumulus foram submetidos à maturação in vitro (MIV) por 24 horas. Em seguida, os oócitos foram fertilizados in vitro (FIV) com sêmen de um único touro Nelore durante 18 horas (D0 = dia da FIV). Após a FIV, os prováveis zigotos foram cultivados em meio suplementado com 100 μM de ácido linoleico conjugado (CLA), 100 μM de ácido linoleico (AL), 100 μM de ácido oleico (AO), ou 50 μM de ácido eicosapentaenoico + 50 μM de ácido docosahexaenoico (EPA + DHA), além do grupo controle (CT). As concentrações de PGs foram determinadas por ELISA, e a produção embrionária avaliada no D7 e D9. A análise estatística foi realizada utilizando o software PROC MIXED do SAS, considerando o poço de cultivo como unidade experimental. A síntese de PGE2 nos grupos AL e AO não diferiu do CT; porém, CLA e EPA+DHA apresentaram menor síntese quando comparado ao CT (P = 0,0001). A síntese de PGF2α foi maior nos grupos AL e AO e menor nos grupos CLA e EPA+DHA em comparação ao CT (P = 0,0001). A razão PGE2:PGF2α não diferiu entre AL, AO, CLA e CT. Entretanto, EPA+DHA apresentou menor razão PGE2:PGF2α (P = 0,0001) e menor taxa de blastocistos no D7 (P = 0,0378) e D9 (P = 0,0036). Em conclusão, a suplementação do meio de cultivo com AGs específicos alterou a síntese de PGs em embriões bovinos produzidos in vitro, sem promover o aumento da taxa de clivagem e a produção de blastocistos. O grupo EPA+DHA diminuiu a produção embrionária, enquanto AL e AO aumentaram a síntese de PGF2α. Já CLA e EPA+DHA reduziram as concentrações de PGE2 e PGF2α, sendo que EPA+DHA também diminuiu a razão PGE2:PGF2α.

Resumo (inglês)

ABSTRACT In cattle, early embryonic mortality due to failure in maternal recognition of pregnancy (FRP) is one of the main causes of reproductive failure. The synthesis of prostaglandins (PGs), especially prostaglandin F2α (PGF2α) and E2 (PGE2), by the endometrium and trophoblastic cells of the embryo and conceptus, is crucial for FRP. PGE2 favors FRP, while PGF2α exerts a luteolytic action. Furthermore, a higher PGE2:PGF2α ratio is associated with embryonic development, implantation, and FRP. Fatty acids (FAs) have been studied for modulating PG biosynthesis; therefore, this study aimed to evaluate the effects of supplementing specific FAs in the in vitro culture (IVC) of bovine embryos on PG synthesis. Ovaries from slaughtered Nelore females had follicles of 2 to 10 mm aspirated, and oocytes with homogeneous cytoplasm and multiple layers of cumulus cells were subjected to in vitro maturation (IVM) for 24 hours. Subsequently, the oocytes were fertilized in vitro (IVF) with semen from a single Nelore bull for 18 hours (D0 = day of IVF). After IVF, the prospective zygotes were cultured in a medium supplemented with 100 μM conjugated linoleic acid (CLA), 100 μM linoleic acid (LA), 100 μM oleic acid (OA), or 50 μM eicosapentaenoic acid + 50 μM docosahexaenoic acid (EPA + DHA), in addition to the control group (CT). PG concentrations were determined by ELISA, and embryonic production was evaluated on days 7 and 9. Statistical analysis was performed using the SAS PROC MIXED software, considering the culture well as the experimental unit. PGE2 synthesis in the AL and AO groups did not differ from CT; however, CLA and EPA+DHA showed lower synthesis compared to CT (P = 0.0001). PGF2α synthesis was higher in the AL and AO groups and lower in the CLA and EPA+DHA groups compared to CT (P = 0.0001). The PGE2:PGF2α ratio did not differ between AL, AO, CLA, and CT. However, EPA+DHA showed a lower PGE2:PGF2α ratio (P = 0.0001) and a lower blastocyst rate on days 7 (P = 0.0378) and 9 (P = 0.0036). In conclusion, supplementation of the culture medium with specific fatty acids altered PG synthesis in bovine embryos produced in vitro, without promoting an increase in cleavage rate and blastocyst production. The EPA+DHA group decreased embryonic production, while AL and AO increased PGF2α synthesis. CLA and EPA+DHA reduced PGE2 and PGF2α concentrations, with EPA+DHA also decreasing the PGE2:PGF2α ratio.

Palavras-chave

Embriologia Oócitos Bovinos

Idioma

Português

Citação

BERNARDO, Eduardo Carvalho. Efeito modulatório dos ácidos graxos na síntese de prostaglandinas F2α e E2 em embriões bovinos produzidos in vitro. 2026. 61 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Zootecnia) – Universidade Estadual Paulista (UNESP), Dracena, 2026.