Caracterização das proteínas caveolinas -1 e -2 na placenta de conceptos bovinos clonados transgênicos

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dc.contributor.authorPeres, Kenya C. [UNESP]
dc.contributor.authorTrinca, Vitor [UNESP]
dc.contributor.authorOliveira, Fernanda P. [UNESP]
dc.contributor.authorOliveira, Lilian J.
dc.contributor.authorBressan, Fabiana F.
dc.contributor.authorPimentel, Jose R. V.
dc.contributor.authorMeirelles, Flavio V.
dc.contributor.authorPereira, Flávia Thomaz Verechia [UNESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.institutionMichigan State Univ
dc.contributor.institutionUniversidade de São Paulo (USP)
dc.date.accessioned2015-10-22T06:28:22Z
dc.date.available2015-10-22T06:28:22Z
dc.date.issued2015-05-01
dc.description.abstractThe transgenic application of green fluorescent protein (GFP) as fetal cell marker on cattle cloned placenta could provide an exclusive model for studying the morphologic and immunologic maternal-fetal interactions, providing information about its mapping, distinguishing the fetal from maternal cells. This model will have direct application, mainly because these animals present problems during its development. With this model's support, we intend to verify the substances transport between mother and fetus during endocytosis, through the immunolocalization of protein named caveolae. For these, we used 06 cloned bovine and 30 cattle samples of artificial insemination (AI) with 90 days of pregnancy, which had been their development interrupted by humanitarian slaughter of the recipient and recovery of the pregnant uterus. We collected the placentome and the chorion. A part of the samples was cut and fixed, by immersion, on a solution containing 4% of parafomaldehyde or 10% of formaldehyde on a sodium phosphate buffer (PBS), at 0,1 M pH 7.4, Zamboni solution (4% of paraformaldehyde, 15% of picric acid, on sodium phosphate buffer 0,1 M pH 7.4), metacarn (60% of metanol, 30% of chloroform, and 10% glacial acetic acid), for morphologic and immunohistochemistry verification for caveolinas proteins -1 and -2 (CAV -1 and CAV-2). The caveolins -1 were found in fetal and maternal villi, but its strongest staining was observed in the endometrial stroma. The caveolins -2 had positive staining in trophoblast and chorioallantoic membrane, and specifically in giant trophoblastic binucleated cell. Therefore the results were compared between cloned cattle and from AI or natural mating, for assisting on detection of the reason of many placental alterations, embryonic losses, spontaneous abortion, post-natal mortality and large offspring syndrome on laboratory-manipulated animals. The result suggests that the proteins caveolins -1 and -2 (CAV-1 and CAV-2) are part of the caveolae composition and important structures related to the molecule transfer to the fetus, nourish it through endocytosis and pinocytosis.en
dc.description.abstractA utilização da transgenia com a proteína fluorescente verde (GFP) como marcador de células de origem fetal nas placentas de clones bovinos servirá de modelo inédito para estudo morfofisiológico e imunológico da interação materno-fetal, visto que possibilitará o seu mapeamento, diferenciando as células fetais das maternas. Tal modelo terá aplicação direta, principalmente porque estes são animais que apresentam problemas em relação ao seu desenvolvimento. Com o auxílio deste modelo, pretende-se verificar o transporte de substâncias entre a mãe e o feto via endocitose, pela imunolocalização das proteínas chamadas de caveolinas. Para tanto foram utilizados 06 bovinos clonados e 30 bovinos de inseminação artificial (IA) com idade até 90 dias de gestação, os quais tiveram seu desenvolvimento interrompido mediante abate humanitário das receptoras e ovariosalpingohisterectomia, com posterior recuperação do útero gestante. Foram coletados os placentônios e o cório. Uma parte das amostras foi recortada e fixada, por imersão, em solução de parafolmaldeído a 4% ou formoldeído a 10% em tampão fosfato de sódio (PBS) a 0,1M pH 7.4, solução de Zamboni (4% de paraformoldeído, 15% de ácido pícrico, em tampão fosfato de sódio a 0,1M pH 7.4), metacarn (60% de metanol, 30% de clorofórmio, e 10% de ácido acético glacial), para verificação da morfologia e realização de imuno-histoquímica para as proteínas caveolinas -1 e -2 (CAV -1 e CAV-2). As caveolinas -1 foram localizadas nos vilos fetais e maternos, mas sua marcação mais forte foi observada no estroma endometrial. As caveolinas -2 tiveram marcação positiva no trofoblasto e membrana córioalantoide, e, especificamente em célula trofoblástica gigante binucleada. Sendo assim, os resultados mostram que a proteína CAV-1 teve uma maior expressão em relação à proteína CAV-2 e que as proteínas CAV-1 e -2 são parte da composição das cavéolas, sendo estruturas importantes e relacionadas com a transferência de moléculas para o feto, realizando a nutrição do mesmo mediante endocitose e pinocitose.pt
dc.description.affiliationUniv Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho Un, Lab Morfofisiol Placenta &Embriao, BR-17900000 Dracena, SP, Brazil
dc.description.affiliationMichigan State Univ, Dept Anim Sci, E Lansing, MI 48824 USA
dc.description.affiliationUniv Sao Paulo, Fac Zootecnia &Engn Alimentos, Lab Morfofisiol Mol Desenvolvimento, BR-13635900 Pirassununga, SP, Brazil
dc.description.affiliationUnespUniv Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho, Lab Morfofisiol Placenta & Embriao, BR-17900000 Dracena, SP, Brazil
dc.format.extent477-485
dc.identifierhttp://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-736X2015000500477&lng=en&nrm=iso&tlng=en
dc.identifier.citationPesquisa Veterinaria Brasileira, v. 35, n. 5, p. 477-485, 2015.
dc.identifier.doi10.1590/S0100-736X-2015000500016
dc.identifier.fileS0100-736X2015000500477.pdf
dc.identifier.issn0100-736X
dc.identifier.scieloS0100-736X2015000500477
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/129676
dc.identifier.wosWOS:000357746000016
dc.language.isopor
dc.publisherRevista Pesquisa Veterinaria Brasileira
dc.relation.ispartofPesquisa Veterinaria Brasileira
dc.relation.ispartofjcr0.385
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.sourceWeb of Science
dc.subjectCaveolin-1 and-2 proteinsen
dc.subjectCaveolaeen
dc.subjectPlacentationen
dc.subjectImmunolocalizationen
dc.subjectCattleen
dc.subjectProteínas caveolinas -1 e -2pt
dc.subjectPlacenta de conceptos bovinos clonadospt
dc.subjectTransgênicospt
dc.subjectCavéolapt
dc.subjectCaveolinapt
dc.subjectPlacentaçãopt
dc.subjectImunolocalizaçãopt
dc.titleCaracterização das proteínas caveolinas -1 e -2 na placenta de conceptos bovinos clonados transgênicospt
dc.title.alternativeCaracterization of caveolin -1 and -2 proteins in cloned and transgenic placenta of cattleen
dc.typeArtigo
dcterms.rightsHolderRevista Pesquisa Veterinaria Brasileira
unesp.author.orcid0000-0001-9862-5874[5]
unesp.author.orcid0000-0003-0372-4920[7]
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas, Dracenapt
unesp.departmentEngenharia Agronômica - FCATpt

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