Influência da adição de diferentes diluentes na pré-centrifugação para criopreservação de sêmen equino

Abstract

Este trabalho teve como objetivo comparar a influência de quatro diferentes diluentes de sêmen contendo Leite desnatado (G1), Leite desnatado e Pentoxifilina (G2), Colesterol (G3) e Colesterol e Caseína (4) acrescidos na pré-centrifugação do ejaculado de garanhões, visando avaliar cinética e integridade de membrana citoplasmática dos espermatozoides. Foram realizadas sete coletas de sêmen de quatro garanhões (n= 28), de diferentes idades e sadios. As amostras foram separadas em quatro alíquotas e diluídas nos extensores supracitados, a criopreservação foi realizada seguindo metodologia de Papa et al (2002). A análise dos parâmetros de cinética foi realizada por meio do sistema computadorizado CASA (HTM-IVOS 12 Hamilton Thorne Research, Beverly, MA, USA), e a análise da integridade de membrana citoplasmática realizada a partir de microscopia de fluorescência. Os parâmetros foram avaliados no momento pré-centrifugação, pós-descongelação e 30 minutos pós- descongelação. Os extensores G3 e G4 apresentaram em média os melhores índices de cinética espermática em ambas as análises. Diluentes a base de colesterol e ciclodextrina obtiveram melhores taxas de cinética pós-descongelação em comparação a extensores baseados em leite desnatado no processo de criopreservação seminal.

This work aimed to compare the influence of four different semen extenders containing Skimmed Milk (G1), Skimmed Milk and Pentoxifylline (G2), Cholesterol (G3) and Cholesterol and Casein (4) added in the pre-centrifugation of stallion ejaculate, in progress to evaluate kinetics and integrity of the sperm cytoplasmic membrane. Seven semen collections were carried out from four stallions (n= 28), of different ages and healthy conditions. The samples were separated into four aliquots and diluted in the aforementioned extenders, cryopreservation was carried out following the methodology of Papa et al (2002). The analysis of kinetic parameters was carried out using the CASA computerized system (HTM-IVOS 12 Hamilton Thorne Research, Beverly, MA, USA), and the analysis of the integrity of the cytoplasmic membrane was carried out using fluorescence microscopy. The parameters were evaluated pre-centrifugation, post-thawing and 30 minutes post-thawing. Extenders G3 and G4 had the best sperm kinetic indexes on average in both analyses. Cholesterol and cyclodextrin-based diluents obtained better post-thawing kinetic rates compared to skimmed milk-based extenders in the seminal cryopreservation process.