Avaliação do processo de reparo alveolar em ratos portadores de diabetes tipo 2, induzido por dieta hiperlipídica e baixa dose de estreptozotocina: análise morfométrica, imunoistoquímica e por microscopia de birrefringência

Abstract

Type I diabetes interferes with bone metabolism, delaying alveolar bone repair, but little is known about the influence of type II disease in the alveolar repair process after the dental extraction. Objective: To analyze the dynamics of alveolar bone repair in type II diabetic rats by immunohistochemical, birefringence, microtomographic and confocal microscopy analysis. Fifty rats (n = 25 per group) were used, divided into two groups: Control (CO) and Diabetic type II (DBT-2). The animals in the DBT-2 group had diabetes induced by caffeteria diet and a single application of streptozotocin (35mg/kg). After the verification of type II diabetes, the animals were submitted the surgery of dental extraction and euthanasia after 3, 7, 14 and 42 days respectively. For the immunohistochemical analysis, antibodies against TNFα, TGFβ, IL6 (inflammatory response at 3 and 7 days) and TRAP, OC, WNT (bone repair at 14 and 42 days) were used. For the birefringence analysis, the sections stained with Picrosirius-red were analyzed to evaluate the organization and quantity of the collagen fibers at 14 and 42 days after the dental extraction. For Micro-CT analysis (42 days) the parameters evaluated were BV/TV, Po.Tot, Tb.Th, Tb.N and Tb.Sp. For confocal microscopy analysis, the parameters used were bone tissue dynamics and active mineralization surface. The quantitative data were submitted to a statistical analysis and a significance level of 5% was adopted. Results: In the immunohistochemical analysis, at 3 days, the CO group presented a light staining for IL-6, TNFα and TGFβ while at 7 days, presented light staining for IL-6, and moderate for TNFα and TGFβ. In the DBT-2 group, at 3 days the markers for IL-6, TNFα and TGFβ were moderate whereas at 7 days, there was intense staining for IL-6 and TGF and moderate for TNFα. At 14 days, the CO group presented moderate staining...

O diabetes tipo I interfere no metabolismo ósseo atrasando o reparo ósseo alveolar, porém pouco se sabe da influência do tipo II da doença no processo reparacional alveolar pós exodontia. Objetivo: Analisar a dinâmica do reparo ósseo alveolar em ratos diabéticos tipo II através das análises imunoistoquímica, por birrêfringência, de microtomografia computadorizada e por microscopia confocal. Foram utilizados 50 ratos (n=25 por grupo), divididos em dois grupos: Controle (CO) e Diabéticos tipo II (DBT-2). Os animais do grupo DBT-2 tiveram o diabetes induzido por dieta hiperlipídica e aplicação única de Estreptozotocina (35mg/kg). Após a comprovação do diabetes tipo II, os animais foram submetidos à cirurgia de exodontia e eutanásiados aos 3, 7, 14 e 42 dias respectivamente. Para a análise imunoistoquímica, foram utilizados anticorpos contra TNFα, TGFβ, IL6 (resposta inflamatória aos 3 e 7 dias) TRAP, OC, WNT (reparo ósseo aos 14 e 42 dias). Para a análise de birrefringência, os cortes corados com Picrosirius-red, foram analisados para avaliar a organização e quantidade das fibras colágenas aos 14 e 42 dias após a exodontia. Para análise de Micro-CT (42 dias) os parâmetros avaliados foram BV/TV, Po.Tot, Tb.Th, Tb.N e Tb.Sp. Para a análise de microscopia confocal, os parâmetros utilizados foram de dinâmica do tecido ósseo e superfície de mineralização ativa. Os dados quantitativos foram submetidos a uma análise estatística e foi adotado nível de significância de 5%. Resultados: Na análise imunoistoquímica, aos 3 dias, o grupo CO apresentou uma marcação leve para IL-6, TNFα e TGFβ enquanto aos 7 dias, apresentou marcação leve para IL-6, e moderado para TNFα e TGFβ. No grupo DBT-2, aos 3 dias as marcações para IL-6, TNFα e TGFβ foram moderadas enquanto aos 7 dias, houve marcação intensa para IL-6 e TGFβ e moderada para TNFα. Aos 14 dias, o grupo CO apresentou...