A IL-27 regula a resposta imune adaptativa associada ao controle da replicação do parasita na Leishmaniose Canina

Abstract

A interleucina 27 (IL-27) é uma citocina que regula a resposta imunológica à infecção por Leishmania infantum em humanos e modelos experimentais. Essa citocina ainda não foi descrita na Leishmaniose Canina (LCan). Portanto, investigamos se a IL-27 e a IL-21 tem um papel imunoregulador na LCan. As subunidades EBI3 e p28 da IL-27 e a IL-21 foram avaliadas em sobrenadante de cultura de leucócitos esplênicos de cães com LCan e correlacionadas com a carga parasitária, com os níveis de IL-21, de anticorpos anti-L. infantum e com parâmetros hematológicos e bioquímicos que são considerados marcadores clínicos da progressão da doença. Um ensaio funcional com bloqueio de IL-27 foi realizado e mensuramos a carga parasitária, a produção de IL-4, IL-2, IL-6, IL-10, IL-12, IL-17, IL-21, TNF-α, IFN-γ no sobrenadante e a expressão de PD-1, CTLA-4, phosphoStat-1, phospho-Stat-3, T-bet, GATA3 e a produção de óxido nítrico (NO) em leucócitos esplênicos. Os níveis de ambas as subunidades da IL-27 e da IL-21 estavam aumentadas no sobrenadante de cultura de leucócitos esplênicos de cães com Lcan quando comparadas ao grupo controle e foram associados positivamente com os níveis de IL-21 no sobrenadante desses cães. A subunidade EBI3 foi ainda associada negativamente com os níveis de albumina no soro e positivamente com a carga parasitária, com os níveis de anticorpos IgG anti-L. infantum e com os níveis de globulina e de proteína total no soro, alterações laboratoriais frequentemente observados na doença. A IL-27 pode estar associada à falha da imunidade que controlar a replicação do parasita por meio da regulação da expressão de PD-1, CTLA-4, T-bet e NO em leucócitos esplênicos de cães com Lcan. Esses achados sugerem que as vias reguladas pela IL-27 estão envolvidas na patogênese da CanL no hospedeiro e podem ser alvos para novas terapias.

Interleukin 27 (IL-27) is a cytokine that regulates the immune response to Leishmania infantum infection in humans and experimental models. This cytokine has not yet been described in Canine Leishmaniasis (CanL). Therefore, we investigated whether IL-27 and IL-21 has an immunoregulatory role in CanL. IL-27 EBI3 and p28 subunits and IL21 were evaluated in culture supernatant of splenic leukocytes of dogs with CanL and compared to control dogs. We also correlated EBI3 and p28 levels with IL-21, anti-L. infantum, parasite load and hematological and biochemical parameters that are considered clinical markers of disease progression. Functional assay followed by IL27 blockade was performed and we measured the parasite load, the production of IL4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-17, IL-21, TNF-α, IFN- γ in the supernatant and the expression of PD-1, CTLA-4, phospho-Stat-1, phospho-Stat-3, T-bet, GATA3 and nitric oxide (NO) production in splenic leukocytes. Our results showed that both IL-27 subunits and IL21 were increased in the culture supernatant of splenic leukocytes of dogs with CanL when compared to control dogs. EBI3 and p28 levels showed a moderate positive correlation with IL-21, and the EBI3 subunit was positively associated with anti-L. infantum IgG, parasite load, globulin and total protein levels, showed a negative correlation with albumin levels (frequently observed clinical markers in the disease). IL-27 and IL-21 participate of mmune responses in CanL. IL-27 may be associated with the failure of immunity to control parasite replication via regulation of the expression of PD-1, CTLA-4, T-bet and NO in splenic leukocytes from dogs with Lcan. These findings suggest that the pathways regulated by IL-27 are involved in CanL pathogenesis in the host and may be targets for new therapies.