Efeito transdentinário de partículas de ionômero de vidro pré-tratadas superficialmente (S-PRG) sobre células odontoblastoides

Abstract

A bioatividade de materiais restauradores incorporados com partículas de ionômero de vidro pré-reagido superficialmente(S-PRG) é atribuída aos diversos íons eluidos. Objetivo: Investigar a resposta transdentinária de células odontoblastoides após aplicação do eluato obtido de partículas S-PRG. Material e método: Discos de dentina humana (0,4 mm de espessura) padronizados quanto à permeabilidade foram adaptados em câmaras pulpares artificiais. Células odontoblastoides MDPC-23 foram semeadas na superfície pulpar dos discos. A superfície oclusal foi tratada com (n=10): água ultrapura (controle negativo – CN), peróxido de hidrogênio 29% (controle positivo – CP), eluato de S-PRG por 1 min seguido por lavagem com água (S-PRG 1 min), ou eluato de SPRG por 30 min sem lavagem (S-PRG 30 min). Após 24 h, viabilidade (alamarBlue; n=10) e morfologia (MEV; n=2) das células semeadas nos discos foram avaliadas. O meio condicionado (extrato) foi coletado e aplicado sobre novas MDPC- 23 cultivadas em placas de cultura, por mais 24 h (n=10). Após 24 h, 72 h e 7 dias, essas células foram avaliadas quanto à viabilidade (alamarBlue) e formação de nódulos mineralizados (Alizarin Red) no último período. Os dados foram analisados com ANOVA e pós-testes (α=5%). Resultados: S-PRG 30 min reduziu 17,9% da viabilidade das células do disco, valor intermediário ao CN e CP (74,8%). Ambos os tratamentos com S-PRG resultaram em baixo desprendimento celular do disco quando avaliados em MEV. As células remanescentes mantiveram morfologia clássica com alguma contração citoplasmática. Apenas S-PRG 30 min aumentou ligeiramente (6%) a viabilidade celular em 24 h após contato com o extrato. Enquanto S-PRG 1 min não diferiu do CN, S-PRG 30 min estimulou a mineralização em 39,7%. Apenas CP reduziu a viabilidade e a mineralização. Conclusão: O eluato de partículas S-PRG não apresentou efeito citotóxico transdentinário sobre células odontoblastoides. Ademais, a aplicação por 30 min, sem lavagem, estimulou a atividade de mineralização dessas células.

The bioactive effects of restorative materials incorporated with surface pre-reacted glass-ionomer (S-PRG) fillers are attributed to the eluted ions. For this reason, the eluate obtained from S-PRG fillers has been investigated for several therapeutic applications aimed at increasing the longevity of restorations and reducing the progression of caries and erosion lesions. However, the effect of these ion-releasing particles, when applied on dentin, on pulp cells is still unknown. Therefore, the objective of this study will be to evaluate the transdentinal response of odontoblast-like cells after the application of S-PRG eluate. Thirty-two healthy third molars will be selected and transversally cut to obtain coronal dentin discs (0.4 mm thick). The hydraulic conductance of the discs will be assessed to allow obtaining specimens with similar permeability. After adapting the discs in artificial pulp chambers, MDPC-23 odontoblast-like cells will be seeded on the pulpal surface of the discs. The occlusal surface will be treated with (n=8/group): 29% hydrogen peroxide (positive control), SPRG eluate followed by water rinsing, or S- PRG eluate without rinsing. As a negative control, discs will receive ion-free water. After 48 h, the cells cultured on the discs will be evaluated for viability (alamarBlue; n=8) and morphology (SEM; n=2). The conditioned medium (extract) will be collected and applied on new plate-seeded MDPC-23 (n=8). After 24 h of contact with the conditioned media, the plate-seeded cells will be evaluated for viability (alamarBlue) and the formation of mineralized nodules (Alizarin Red). Each dataset will be analyzed for the normal distribution (Shapiro-Wilk) and homogeneity of variances (Levene) for the application of appropriate statistical tests at a significance level of 5%. The analysis of cell morphology in SEM will be descriptive.