Controle de bactérias no cultivo in vitro de híbridos comerciais de Eucalyptus
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Data
2022-11-16
Autores
Orientador
Faria, Glaucia Amorim
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Engenharia Agronômica - FEIS
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
A contaminação bacteriana é um dos principais problemas que ocorrem na cultura de tecidos vegetais. Tendo como prioridade para o estabelecimento de protocolos a obtenção de explantes axênicos, o uso de antibióticos nos meios de cultivo vem se tornando uma alternativa para o controle destas contaminações, evitando descarte e perda de material vegetal de grande valor genético. Este trabalho teve como objetivo isolar e realizar testes de sensibilidade para controle de duas bactérias (B6 e B11) com ocorrência frequente no cultivo in vitro de um híbrido comercial de eucalipto, aos antibióticos ampicilina (Ampicillin sodium salt) e tetraciclina (Tetracycline hydrochloride), a fim de entender qual o antibiótico e a concentração mais eficaz para o controle destas bactérias durante o cultivo in vitro da cultura. Para tal, foram realizados dois experimentos: no experimento I foi averiguada a sensibilidade das bactérias aos antibióticos, pelo teste de antibiograma por disco-difusão com discos de papel em ágar contendo seis concentrações (0; 100; 200; 300; 400 e 500 mg L-1) dos antibióticos com cinco repetições cada em Delineamento Inteiramente Casualizado, sendo avaliado o diâmetro médio do halo formado após 24 horas. No experimento II a fim de analisar a resposta da interação entre planta, bactéria e antibiótico, foi realizado o ensaio in vitro utilizando os dois melhores tratamentos obtidos no experimento I, compostos por 20 unidades experimentais cada, em Delineamento Inteiramente Casualizado, avaliando-se por meio de escala de notas o vigor, oxidação dos explantes e a manifestação bacteriana após 28 dias em sala de crescimento. Os melhores resultados obtidos no experimento I foram com o antibiótico tetraciclina nas concentrações de 400 e 500 mg L-1 para B6 e B11, respectivamente. No experimento II, foi verificado que a tetraciclina teve efeito fitotóxico, promovendo redução do vigor e aumento da oxidação dos explantes, apesar de controlar a contaminação durante o cultivo in vitro do eucalipto.
Resumo (português)
Bacterial contamination is one of the main problems occurring in plant tissue culture. Considering as a priority for the establishment of protocols to obtain axenic explants, the use of antibiotics in the culture media has become an alternative for the control of these contaminations and avoiding the discard and loss of plant materials of great genetic value. This work aimed to isolate and perform sensitivity and control tests of two bacteria (B6 and B11) commonly found in in vitro culture of a commercial hybrid of Eucalyptus using the antibiotics ampicillin (Ampicillin sodium salt) and tetracycline (Tetracycline hydrochloride), in an attempt to understand which antibiotic and concentration are more effective to control these bacteria while growing the culture in vitro. Two experiments were performed, in part I of the experiment, to determine the sensitivity of the selected bacteria to the antibiotics, the antibiogram test was performed by disc-diffusion with paper discs on agar containing six different concentrations (treatments) of 0; 100; 200; 300; 400 and 500 mg L-1 of the antibiotics and five repetitions each, in completely randomized design Completely Randomized Design, and the average diameter of the halo formed after 24 hours was evaluated. In part II of the experiment, in order to analyze the response of the interaction between plant, bacteria and antibiotic, the in vitro assay was performed with the two best treatments obtained in part I composed of 20 experimental units each, in Completely Randomized Design, and it was evaluated through a scale of notes the vigor, oxidation of the explants and bacterial manifestation after 28 days in the plant growth room. The best results obtained in part I for bacterial growth inhibition were with the tetracycline antibiotic at concentrations of 400 and 500 mg L-1 for B6 and B11, respectively. In part II, since tetracycline has a phytotoxic effect, the results obtained showed a reduction in vigor and an increase in oxidation of the explants, but the contamination was controlled during the in vitro cultivation of the Eucalyptus explants.
Descrição
Idioma
Português