Araraquara - FOAR - Faculdade de Odontologia

URI Permanente para esta coleçãohttps://hdl.handle.net/11449/254432

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Uma nova composição de vidro bioativo para regeneração óssea e osseointegração de implantes dentários: estudos in vitro e pré-clínicos em coelhos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-01) Balderrama, Ísis de Fátima ; Marcantonio Júnior, Elcio ; Universidade Estadual Paulista (UNESP) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Este estudo teve como objetivo avaliar uma nova composição de vidro bioativo (F18) para futura aplicação clínica na Implantodontia. Para isto, o estudo foi dividido em cinco artigos. No primeiro artigo, uma revisão de literatura investigou artigos científicos sobre a aplicação do enxerto ósseo sintético derivado do vidro bioativo para uso na Implantodontia, focando em regeneração óssea assim como em revestimento de implantes de titânio. Os achados científicos demonstraram que o vidro bioativo possui propriedade de biocompatibilidade, ligação com osso, não-citotóxico e antimicrobiano, através de evidência científica por estudos in vitro, pré-clínicos e clínicos. No segundo artigo, 3 discos de diferentes superfícies: 1) usinado (M), 2) nano-hidroxiapatita (Nano- Ha) e 3) biofuncionalizado com F18 (BSF18) foram analisados em diferentes testes in vitro. Os discos foram submetidos a contaminação de Staphylococcus aureus por um período de 24 horas. De acordo com os resultados de contagem bacteriana (UFC/mL), a superfície BSF18 demonstrou valores diminuídos quando comparado com a superfície usinada ou Nano-Ha (p<0.0001), assim como as imagens de cepa bacteriana aderida nas superfícies e analisadas por MEV e Microscopia confocal, demonstraram maiores aglomerados bacterianos nas superfícies M e Nano-Ha quando comparada com BSF18. No terceiro artigo, a fim de investigar o potencial osteoindutor das superfícies de 3 diferentes discos, tais como, 1) usinado (M), 2) nano- hidroxiapatita (Nano-Ha) e 3) biofuncionalizado com F18 (BSF18). Para isto, um total de 5 mL de aspirado de medula óssea foi coletado da tíbia de 8 coelhos albinos para obter as células-tronco da medula óssea (Bone Marrow Stem Cells-BMSC). Propriedades físico-químicas das superfícies dos discos e análises biológicas in vitro foram investigadas. Os resultados evidenciaram que a superfície BSF18 demonstrou ser mais hidrofílica quando comparada com M e Nano-Ha. O teste de detecção de nódulos mineralizados nas superfícies aos 21 dias e atividade de fosfatase alcalina aos 10 dias, demonstrou uma diferença estatística com valor aumentado para BSF18 (p<0.05) quando comparada com as superfícies M e Nano-Ha. No quarto artigo, 40 coelhos foram submetidos ao levantamento do seio maxilar bilateral e inserção dos seguintes enxertos ósseos, G1) Hidroxiapatita com beta-tricálcio fosfato (HA/β-TCP); G2) F18; G3) HA/β-TCP + F18; G4) BMSC + F18; G5) Coágulo sanguíneo (BC). Após 30 e 60 dias, biópsias foram coletas destas áreas e analisadas quanto a porcentagem de osso neoformado, tecido conjuntivo e biomaterial. Implantes dentários de diferentes superfícies (Nano-Ha e BSF18) foram instalados nas áreas previamente enxertadas e análises de estabilidade primária e secundária, contato-osso implante (BIC), formação óssea entre as roscas (BAFO) e propriedades nanomecânicas (dureza e módulo de elasticidade) foram investigadas. Como resultados, aos 60 dias, G1 e G2 demonstraram maior quantidade de osso neoformado quando comparado com 30 dias. Implantes de superfície Nano-Ha revelaram uma maior estabilidade primária para o G1 aos 60 dias. G2 demonstrou uma melhor porcentagem de BIC aos 60 dias para a superfície Nano-Ha quando comparada com G5 e G4. BSF18 instalado em áreas do G3 após 60 dias demonstrou valores aumentados em propriedades nanomecânicas quando comparado com G5. No quinto artigo, a fim de investigar a formação óssea ao redor de implantes BSF18 instalados em área de baixa densidade óssea animais associados ou não com comprometimento sistêmico, 8 coelhos foram induzidos ao Diabetes Mellitus através da aplicação de 105 mg/kg de Aloxana, e 8 coelhos receberam uma dose de soro fisiológico (controle). Animais foram divididos em 4 grupos, tais como, saudáveis com implantes Nano-Ha (G1), saudáveis com implantes BSF18 (G2), diabéticos com implantes Nano-Ha (G3), diabéticos com implantes BSF18 (G4). Após 3 dias da indução, os animais foram submetidos a instalação dos implantes Nano-Ha e BSF18 em osso de ilíaco bilateralmente (4 implantes/animal). A eutanásia ocorreu após 7 dias, onde o remanescente ósseo dos implantes que receberam torque de remoção foi submetido a análise histológica e histométrica, assim como detecção do marcador de proteína Runx-2 pela análise de imuno-histoquímica, por outro lado, as áreas ósseas contendo os implantes foram analisados quanto a porcentagem de BIC e BAFO, e propriedades nanomecânicas (dureza e módulo de elasticidade). Amostras sanguíneas foram coletadas para análise de glicemia do sangue, assim como, imunoglobina glicada. Como resultados, a glicemia e hemoglobina glicada revelaram valores aumentados para G3 e G4. As peças histológicas do osso remanescente demonstraram maior predomínio de células inflamatórias para G3 quando comparada com G4. Maior detecção do gene Runx-2 para amostras do G2 quando comparado com G3 e G4. Superfície BSF18 demonstrou maior BIC para animais saudáveis quando comparado com diabético. Propriedade de dureza no osso cortical em animais saudáveis demonstrou resultados relevantes para a superfície BSF18 quando comparado com Nano-Ha. Pode-se concluir que o vidro- bioativo F18 é um material promissor para aplicação na Implantodontia.
Revestimentos responsivos para o combate de infecções em implantes percutâneos: contextualizando conceitos para o desenvolvimento de um novo biomaterial
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-10-31) Pereira, Marta Maria Alves ; Avila, Erica Dorigatti de ; Pavarina, Ana Claúdia ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Infecções associadas à implantes percutâneos, como a doença peri-implantar, surgem como uma prevalente complicação biológica tardia que quando progride pode levar à perda de osso ao redor dos implantes e consequentemente, à falha na reabilitação. Com a proposta de discutir desde os procedimentos clínicos atuais, a contextualização de conceitos até o desenvolvimento de um novo biomaterial para combater a infecção já estabelecida, aqui, apresentamos cinco publicações que convergem para propostas complementares. O primeiro artigo, se refere a apresentação clínica de uma sequência de procedimentos para tratar a peri-implantite em paciente susceptível com controle de 9 anos. Na sequência, analisamos e discutimos as razões para a discrepância entre o elevado número de trabalhos na área de desenvolvimento de materiais versus a estagnação de um produto comercial. Neste artigo, concluímos que de um total de 1.777 estudos dentro do tópico, mais de 80% dos estudos ainda se encontram na fase laboratorial, in vitro. A discrepância entre o número de estudos publicados revela claramente que as investigações pré-clínicas ainda enfrentam vários desafios a superar antes de avançar para um cenário clínico. Na Publicação 3, nos preocupamos em conceituar a tríade necessária para o sucesso do desenvolvimento de um biomaterial nesta área: doença, proposta e partes do implante, contextualizando os conceitos de prevenção e tratamento em diferentes categorias. Na sequência, exploramos os conceitos químicos e efeitos biológicos da estratégia de liberação controlada de droga por meio da construção de multicamadas responsivas (LbL) sobre superfícies de pilares de implantes para tratamento da peri-implantite. Por fim, o último artigo se refere ao desenvolvimento de um novo material responsivo ao pH, à base poli(ácido metacrílico) (PMAA), sobre um revestimento antimicrobiano para superfícies de pilares de implantes. Do ponto de vista clínico, a ideia seria substituir o pilar parafusado por um produto revestido, para atuar de forma complementar nas intervenções atuais, no tratamento da doença já instalada. Caracterizações detalhadas sobre o material foram realizadas por meio de técnicas qualitativas e quantitativas. Do ponto de vista comercial, o filme se apresentou viável pela facilidade de preparo e espessura em escala nanométrica que não comprometeria a função do componente em contato com o tecido mole. O filme a base de PMAA também não interferiu nas propriedades físico-químicas requeridas para tais estruturas (pilares) e não interferiu na atividade antimicrobiana do sistema de liberação de drogas. Convenientemente, o filme também estimulou o prolongamento da membrana plasmática de células epiteliais demonstrando capacidade adesiva. Estudos in vivo validaram a biocompatibilidade dos materiais e confirmou a relevância dos reagentes para estimular a produção de colágeno no tecido ao redor. Os resultados do conjunto de publicações destacam o progresso concomitante aos desafios ainda presentes para viabilizar estudos em humanos. Contudo, mesmo diante de dados promissores, é preciso intensificar as pesquisas ainda na fase pré-clínica para estender o efeito antimicrobiano do sistema e garantir a integração do tecido mole nos pilares revestidos como uma estratégia indireta para aumentar a resistência do tecido mole à resposta inflamatória.
Investigação do potencial terapêutico da eriocitrina na modulação da inflamação periodontal em modelos pré-clínicos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-30) Carvalho, Jhonatan de Souza ; Spolidorio, Luís Carlos ; Faculdade de Odontologia de Araraquara (FOAr/UNESP) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A nutrição é reconhecida como um componente essencial na prevenção de diversas doenças. Em especial, flavonoides cítricos, como a eriocitrina (ERIOC), mostram potencial no controle de inflamações orais e sistêmicas, incluindo doenças periodontais. Este estudo investigou os efeitos da ERIOC sobre fatores pró-inflamatórios, anti-inflamatórios e pró-resolutivos em modelos in vitro e in vivo. Para isso, macrófagos da linhagem RAW 264.7 e macrófagos derivados de monócitos humanos foram estimulados com LPS+IFN-γ e tratados com ERIOC por 24 e 48 horas, respectivamente. Avaliou-se a expressão dos genes característicos dos fenótipos M1 (NOS2/iNOS) e M2 (MMR e ARG-1) por qPCR. Também foram analisadas as expressões dos marcadores de superfície para os fenótipos M1 (CD80 e CCR7) e M2 (CD163 e CD206) por citometria de fluxo, além das vias de sinalização intracelular STAT1, STAT3, p65 NF-kB e p38 MAPK. Em neutrófilos humanos, avaliou-se o efeito de ERIOC sobre marcadores relacionados ao fenótipo, atividade fagocítica e apoptose também utilizando citometria de fluxo. Adicionalmente, foi investigada a capacidade da ERIOC e seu metabólito eriodictiol (ERIOD) na captura dos radicais livres ABTS•+, DPPH• e Ânion Radical Superóxido (O2-•). In vivo, camundongos foram tratados com ERIOC nas doses de 25 e 50 mg/kg de peso corporal/dia por 60 dias. No 30º dia, a doença periodontal foi induzida por injeção bilateral de LPS de Escherichia coli nos tecidos gengivais próximos aos primeiros molares superiores. Após a eutanásia, foram coletadas amostras para análise de citocinas pró e anti-inflamatórias por imunoensaio multiplex, quantificação de leucotrieno B4 por ELISA, análise histológica e avaliação da atividade de peroxidase eosinofílica (EPO) no tecido gengival e mensuração da peroxidação lipídica no tecido gengival e no plasma. O tratamento com ERIOC reduziu a expressão gênica de NOS2 e a intensidade média de fluorescência (MFI) de CD80 e da via NF-kB em comparação ao grupo estimulado apenas com LPS+IFN-γ (M1). Sobre neutrófilos humanos, ERIOC aumentou a atividade fagocítica e a porcentagem de células apoptóticas, além de elevar a expressão de CD33, uma proteína transmembrana que previne autorreatividade inadequada durante respostas inflamatórias. Tanto ERIOC quanto ERIOD apresentaram alta capacidade de captura dos radicais ABTS•+, DPPH• e O2-•. No estudo in vivo, o tratamento com ERIOC reduziu significativamente o infiltrado de células inflamatórias, a atividade de EPO, os níveis de leucotrieno B4 e a expressão de citocinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-1β no tecido gengival dos animais submetidos as injeções de LPS. Além disso, observou-se redução do estresse oxidativo, medido pela peroxidação lipídica no tecido gengival e no plasma. O tratamento também aumentou a atividade das enzimas antioxidantes endógenas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx) no tecido gengival. Esses resultados mostraram que o tratamento com ERIOC foi eficaz em reduzir a expressão de marcadores pró-inflamatórios em macrófagos e melhorou a atividade dos neutrófilos ex vivo. Em complemento, reduziu o infiltrado de células inflamatórias in vivo e mostrou eficácia na neutralização de radicais sugerindo potencial proteção sobre o estresse oxidativo. A redução da peroxidação lipídica no plasma e no tecido gengival dos animais com periodontite experimental e aumento das enzimas SOD, CAT e GPx corroboram com esses achados. Essas descobertas destacam a eriocitrina como um potente antioxidante e agente anti-inflamatório, capaz de reduzir marcadores pró-inflamatórios e melhorar o perfil oxidativo. Esses efeitos tornam a eriocitrina uma candidata promissora para a prevenção de doenças relacionadas ao estresse oxidativo e inflamação crônica.
Desenvolvimento de estratégias inovadoras para clareamento dental de consultório: eficácia estética e biocompatibilidade associadas à redução do tempo clínico
(UNESP, 2024-08-19) Ribeiro, Rafael Antonio de Oliveira ; Costa, Carlos Alberto de Souza ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Apesar do excelente resultado estético obtido com o clareamento dental de consultório, o qual utiliza géis clareadores com elevadas concentrações de peróxido de hidrogênio (H2O2), esta terapia profissional pode resultar em danos pulpares irreversíveis e sensibilidade pós-tratamento. Assim, alguns novos protocolos, baseados na redução da concentração de H2O2 nos géis e/ou do tempo de aplicação deles sobre os dentes, têm sido propostos. Entretanto, foi demonstrado que esses novos protocolos afetam negativamente o resultado estético do procedimento ou requerem a aplicação de diversas sessões clareadoras, o que inviabiliza sua implementação clínica. Diante destes fatos, torna-se necessário desenvolver estratégias de clareamento profissional que sejam rápidas e que favoreçam o resultado estético, sem agredir a polpa e causar desconforto para os pacientes. Desta forma, o objetivo geral deste estudo foi utilizar os conhecimentos de engenharia de biomateriais e processos oxidativos avançados (POA), para desenvolver biomateriais poliméricos catalisadores a serem usados para recobrir o esmalte dentário previamente à aplicação do gel clareador, o qual desse ver irradiado (fotocatálise) com LED violeta (LEDv). Num primeiro momento (Publicação 1 do projeto), foi avaliada a possível influência de diferentes moléculas coloridas (cromóforos) sobre a difusão trans-amelodentinária de H2O2 liberado dos géis clareadores e seus efeitos citotóxicos. Foi observado que os diferentes cromóforos presentes no esmalte/dentina não interferem na citotoxicidade da terapia clareadora, independentemente do tipo de solução de manchamento utilizada (café, chá, vinho ou o blend das soluções). Na sequência (Publicação 2 do projeto), foi observado que apesar da irradiação do gel clareador de consultório com LEDv aumentar a eficácia clareadora, este procedimento de fotocatálise não previne ou reduz a citotoxicidade comumente causada por esta modalidade de terapia profissional. Foi determinado ainda, que ampliar o tempo de irradiação do gel não aumenta a eficácia clareadora e nem reduz a citotoxicidade do tratamento. Com base nos conhecimentos adquiridos até então, foi possível executar a Publicação 3 do projeto, onde um scaffold nanofibrilar (SN) e um primer polimérico catalisador (PPC) foram desenvolvidos. Esses biomateriais catalisadores foram usados para revestir o esmalte dentário antes da aplicação do gel clareador, o qual foi irradiado ou não com LEDv. Foi observado que o uso combinado de SN+PPC+LEDv aumenta a eficácia estética do clareamento convencional de consultório, de tal forma que o resultado esperado pode ser alcançado num tempo mais curto e sem causar intensos efeitos citotóxicos para células pulpares. Na Publicação 4 do projeto, foi determinado que a estratégia de irradiar (LEDv) um gel clareador de consultório, aplicado por apenas 15 minutos sobre o esmalte previamente recoberto com SN+PPC, causa apenas discreto estresse oxidativo sobre células pulpares. Assim, esta inovadora estratégia clareadora, a qual é baseada na catálise química/fotocatálise do H2O2, além de acelerar o resultado estético, também causa limitado efeito tóxico sobre células da polpa, as quais exibem baixa expressão de mediadores inflamatórios e elevada expressão de marcadores para mineralização.
Acurácia diagnóstica, planejamento estratégico e segmentação baseada em inteligência artificial de estruturas da cavidade pulpar por meio de imagens tridimensionais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-30) Santos Júnior, Airton Oliveira ; Tanomaru Filho, Mario ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Publicação 1 – Desenvolvimento e validação de um algoritmo de inteligência artificial (IA) baseado em redes neurais convolucionais para a segmentação automática da câmara pulpar e do canal radicular em exames de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) de dentes unirradiculares (Publicação 1) e birradiculares (Publicação 2). A ferramenta de IA demonstrou excelente acurácia na segmentação de dentes unirradiculares (coeficiente de similaridade Dice [CSD]: 89–93%; 95% distância Hausdorff [DH]: 0,10–0,13 mm) e birradiculares (CSD: 88–93%; 95% DH: 0,13–0,16 mm). Além disso, a eficiência de tempo foi significativamente otimizada, com a IA sendo 54 vezes mais rápida para dentes unirradiculares e 75 vezes mais rápida para birradiculares, em comparação ao método manual realizado por especialistas humanos. Publicação 3 – Avaliação da influência do filtro Blooming Artifact Reduction (BAR), integrado ao software e-Vol DX, na detecção de espaços vazios em canais radiculares ovais longos obturados com os cimentos endodônticos AH Plus Jet (AHPJ) e Bio-C Sealer (BCS), utilizando dois aparelhos de TCFC e tendo como referência as imagens de microtomografia computadorizada (micro-CT). No aparelho de TCFC OP300 Maxio, o filtro BAR aumentou significativamente a área sob a curva ROC (AUC) para a detecção de espaços vazios no terço apical em canais obturados com AHPJ e BCS, além de aumentar os valores de especificidade na detecção de espaços vazios no terço apical com AHPJ. No aparelho VeraView X800, os fatores estudados não influenciaram os valores de AUC e sensibilidade, mas o uso do filtro BAR aumentou significativamente a especificidade na detecção de vazios nos terços cervical/médio em canais radiculares obturados com BCS. Publicação 4 – Investigou a capacidade de preparo e a preservação da dentina pericervical nos canais mesiovestibulares (MV1 e MV2) de molares superiores, utilizando os sistemas de níquel-titânio (NiTi) ProTaper Ultimate (PU) e ProDesign Logic 2 (PDL2). O sistema PU aumentou significativamente o volume no terço cervical do canal MV1 em comparação ao PDL2, que produziu menos debris no terço apical. No geral, ambos os sistemas de NiTi apresentaram uma porcentagem semelhante de superfícies não instrumentadas e mantiveram uma espessura de dentina acima de 0,5 mm. A TCFC subestimou ligeiramente a espessura da dentina em comparação com as medições feitas pela micro-CT. Publicação 5 – Comparou o desempenho no retratamento endodôntico e a preservação da dentina pericervical dos sistemas de NiTi PDL2, Reciproc Blue (RB) e WaveOne Gold (WOG) nos canais MV1 e MV2 de molares superiores. O sistema RB demonstrou maior eficácia na remoção do material obturador no canal MV1 em comparação ao PDL2, enquanto o PDL2 superou o WOG no terço apical do canal MV2. Todos os sistemas de NiTi apresentaram mínima alteração na trajetória apical. No geral, a remoção de dentina foi semelhante, mas houve uma redução significativa na espessura da dentina na parede distal (zona de perigo) do canal MV2 para valores abaixo de 0,5 mm após o retratamento, independentemente do sistema de NiTi ou da modalidade de imagem utilizada (TCFC ou micro-CT). Exames de TCFC pré-operatórios são importantes para a seleção adequada dos sistemas de NiTi no retratamento dos canais MV1 e MV2, visando proteger a dentina pericervical na zona de perigo do canal MV2.
Estratégias restauradoras em dentes vitais e tratados endodonticamente
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-06) Vitória, Matheus Sousa ; Dantas, Andréa Abi Rached ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A substituição do tecido dentário perdido agora emprega materiais com características semelhantes ao esmalte e à dentina, reduzindo a necessidade de procedimentos mais invasivos. Essa evolução reflete o progresso tecnológico e científico, especialmente na compreensão das interações entre tecidos dentários e materiais restauradores. Sistemas adesivos hidrofílicos, de autocondicionamento e de condicionamento total, possibilitam a ligação e selamento da dentina, isolando bactérias e impedindo sua atividade cariogênica. Essa abordagem promove uma filosofia de tratamento mais conservadora. Restaurações extensas em dentes tratados endodonticamente ou vitais apresentam desafios, incluindo tratamento inadequado da dentina, estresse de polimerização de materiais e características mecânicas desses materiais, podendo levar a falhas nas restaurações. O Immediate Dentin Sealing (IDS), que envolve o recobrimento imediato da dentina com camada adesiva e resina, é uma solução estudada para melhorar a adesão. O uso de fibras de polietileno, como o Ribbond, tem sido investigado para reduzir fraturas em restaurações extensas, proporcionando alta elasticidade e resistência à tração. No entanto, apesar dos avanços, a literatura carece de métodos comparativos entre abordagens, como restaurações diretas versus indiretas, ou em dentes vitais versus tratados endodonticamente, desde a aplicação do sistema adesivo até a restauração final. A falta de diretrizes específicas para escolha de materiais e técnicas em diferentes cenários clínicos destaca a necessidade estudos nessa área.
Avaliação do Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma Gama (PPAR-γ) antes e após o tratamento periodontal de pacientes com Diabetes Mellitus tipo 2
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-14) Nicchio, Ingra Gagno ; Caminaga, Raquel Mantuaneli Scarel ; Orrico, Silvana Regina Perez ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A prevalência de indivíduos afetados por ambas as doenças, Diabetes mellitus tipo 2 (DM2) e Periodontite (P), tem sido cada vez maior. Para o melhor entendimento da interação entre estas condições, mais estudos clínicos são necessários buscando conhecer moléculas com papel-chave na interação entre o metabolismo glicêmico e o sistema imune, além de compreender melhor a interação entre saúde oral e sistêmica do indivíduo. É conhecida a atuação do Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma Gama (PPAR-γ) na regulação do metabolismo glicêmico, lipídico e do sistema imune, mas são poucos os estudos que investigam a ação desta molécula na modulação do DM2 e Periodontite. Indicativos da literatura, assim como resultados de estudos clínicos anteriormente realizados por nosso grupo, embasam nossa hipótese que PPAR-γ, por meio de Fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), seja uma molécula-chave para essas patologias, e que seus níveis estariam diminuídos na presença de saúde sistêmica e periodontal. O objetivo geral deste estudo foi avaliar os níveis de expressão gênica e proteica do PPAR-γ antes e após o tratamento periodontal em pacientes com DM2 e Periodontite, seja cada patologia isolada, ou como comorbidades. Metodologia: 156 indivíduos distribuídos nos grupos: T2DM_poorlyC+P; T2DM_wellC+P; T2DM_without_P; Periodontitis e Control tiveram seu perfil glicêmico, lipídico e periodontal examinado nos períodos baseline, 45, 90 e 180 dias após a finalização do tratamento periodontal. Os pacientes dos grupos com periodontite receberam tratamento periodontal não cirúrgico e, quando necessário cirúrgico, dependendo das necessidades de cada paciente; enquanto indivíduos dos grupos sem periodontite receberam profilaxia e reforço da instrução de higiene oral nos mesmos períodos. Uma amostra de sangue foi obtida de todos os pacientes, nos mesmos períodos citados, para investigação da expressão sistêmica do gene PPARG, a partir dos leucócitos. Além disso, fragmentos gengivais foram obtidos de todos os grupos após o tratamento periodontal básico quando necessárias cirurgias para complementar o tratamento ou em casos com finalidade estética. Os fragmentos de tecido gengival foram utilizados para avaliação histológica, morfométrica e quantificação de células imunopositivas para PPAR-γ por meio de imuno-histoquímica. Após o tratamento periodontal houve melhora significativa nos parâmetros periodontais avaliados em todos os grupos, indicando a eficácia do tratamento periodontal realizado. Foi observada menor expressão do gene PPARG após 180 dias do término do tratamento periodontal, nos grupos T2DM_wellC_without_P (p=0.04) e Control (p=0.03). Os resultados da análise imuno-histoquímica do PPAR-γ revelaram maior quantidade de células imunopositivas nos grupos com Periodontite. Entretanto, diferenças estatisticamente significativas foram observadas apenas entre os grupos T2DM_wellC+P e Control (p=0.001). Conclui-se que houve maior expressão deste gene com papel anti-inflamatório e mudança nos níveis transcricionais de PPARG, sugerindo após o tratamento periodontal, o que poderia contribuir para o controle da inflamação. Para indivíduos com DM2 e periodontite, o estado de compensação metabólica pode influenciar na frequência de células do tecido gengival expressando a proteína PPAR-γ, o que pode contribuir para a redução do estado inflamatório em indivíduos com diabetes compensado.
Avaliação do uso de folha de Polidioxanona para reconstrução orbitária: estudo em modelo animal
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-30) Marola, Luiz Henrique Godoi ; Pereira Filho, Valfrido Antonio ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O traumatismo orbitário é um trauma frequente na rotina da Cirurgia Buco-Maxilo-Facial, necessitando de constante aprimoramento técnico e de materiais. A utilização de implantes absorvíveis nesses traumas tem se mostrado benéfica, mas é ainda pouco difundida no Brasil. A proposta deste trabalho foi avaliar o perfil inflamatório, mensurar a área do tecido de granulação perimplantar e o comportamento do tecido periorbitário, em coelhos, frente ao uso de uma membrana de polidioxanona (PDO) nacional (Plenum Guide). O ensaio foi realizado em 17 coelhos, da espécie Oryctolagus Cunilicus, em que uma das órbitas foi submetida a exposição cirúrgica da bolha alveolar e posicionamento da membrana de PDO em formato circular com 8mm de diâmetro e espessura de 1mm; e na órbita contralateral, foi posicionada uma folha de titânio (FT) (Surgitime Titanium Seal) de 8mm de diâmetro e 0.04mm espessura, servindo ao propósito de controle positivo. As órbitas foram avaliadas para identificação do perfil inflamatório (neutrófilos, plasmócitos, linfócitos e vasos sanguíneos) e mensuração do tecido de granulação ao redor dos implantes, em 7, 15 e 60 dias. Complicações pós-operatórias como proptose clinicamente relevante, inflamação incompatível, edema, sangramento ou abscesso não foram observados em nenhuma das amostras durante as avaliações clínicas. A avaliação histológica não revelou, em nenhum dos grupos, destruição óssea local, formação de granulomas, fibrose, necrose tecidual ou sinais de neoangiogenese patológica com edema ou exsudação. O grupo PDO apresentou maior quantidade de plasmócitos no período de 7 dias em comparação com o grupo FT (p= 0.012). No período de 15 dias, o grupo PDO apresentou maior quantidade de linfócitos (p= <.001), neutrófilos (p= <.001) e plasmócitos (p= <0.004) em comparação com o grupo FT. A análise da área do tecido de granulação revelou maior média ao redor do PDO nos períodos de 7 e 15 dias (p= 0.009 e p= <.001). A avaliação da PDO não sofreu alterações significativas entre os períodos, já o grupo FT revelou diminuição significante entre o período de 7 e 15 dias (p= 0.041) e sem alterações entre 15 e 60 dias. Aos 60 dias, nenhum remanescente da membrana de PDO foi observado em nenhuma das amostras e o tecido local não apresentou sinais de fibrose ou deterioração local. Considerando as limitações deste estudo, concluímos que a membrana de PDO causou um processo inflamatório maior que a FT, entretanto, essa inflamação não se estendeu aos tecidos periorbitais adjacentes e não levou a alterações clínicas relevantes durante o período de acompanhamento pós-operatório.
Níveis de interleucina 7, interleucina 10 e fator transformador de crescimento beta 1 no diabetes mellitus tipo 2 e na periodontite: avaliação em modelo murino
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-07) Silva, Bárbara Roque da ; Scarel-Caminga, Raquel Mantuaneli ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
As interações entre Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2), disfunção do sistema imune e periodontite (P) são conhecidas, mas ainda há muito o que ser esclarecido. A interleucina 7 (IL-7) é uma molécula relevante para o sistema imune, porém existem poucos trabalhos avaliando sua atuação no contexto do DM2 e da periodontite. O objetivo deste estudo foi investigar se a IL-7 é uma molécula-chave para alterações glicêmicas e imunológicas do DM2 e periodontite, isoladamente ou como comorbidades. Metodologia: 48 camundongos C57BL/6J machos foram avaliados em cada grupo: DM, DM+P, Controle, Perio, DM-Metformina (Metf) e DM-Metf+P. DM foi induzido pela combinação de dieta hiperlipídica e injeção de estreptozotocina; e a periodontite foi induzida pela combinação de ligadura e infecção por Porphyromonas gingivalis. O tratamento com Metf foi realizado por 21 dias via oral (250 mg/kg peso animal). O peso corporal e a glicemia pós-prandial dos animais foram avaliados semanalmente. Doze animais em cada grupo foram eutanasiados nos períodos experimentais zero, 7, 14 e 21 dias após indução da periodontite. O plasma e os leucócitos foram obtidos após processamento do sangue total por gradiente de Histopaques. Foram avaliados os níveis plasmáticos de lipídios, frutosamina e insulina. Os níveis traducionais plasmáticos das moléculas IL-7 e IL-10 foram avaliados por multiplex e o Fator Transformador de Crescimento Beta 1 (TGF-β1) por ELISA. Os níveis transcricionais (mRNA) sistêmicos (leucócitos circulantes) e do tecido gengival de Il-7, Tgfb1 e Il10 foram avaliadas por RT-qPCR (sistema TaqMan®), utilizando o gene β-actina (sistêmico) e o Gapdh (tecido gengival) como controle endógeno. O perfil ósseo alveolar dos animais foi analisado por microtomografia computadorizada. Cortes histológicos corados com Hematoxilina & Eosina permitiram a descrição da morfologia geral dos órgãos coletados e a morfometria do tecido gengival. Foi realizada avaliação por imuno-histoquímica (IHQ) das moléculas Il-7 e Tgf-β1 em tecido gengival. Resultados obtidos: níveis elevados da glicemia pós-prandial nos animais com DM comparado ao grupo Controle, e bom controle glicêmico dos animais que passaram pelo tratamento com Metf; aumento dos níveis de colesterol total e HDL em animais com DM; maior presença de gotículas lipídicas ou vacúolos no fígado e rim de animais com DM em comparação ao grupo Controle; maior comprometimento do perfil ósseo alveolar com diminuição do volume ósseo e densidade mineral óssea nos grupos com periodontite experimental comparados ao grupo Controle; maior proporção de células inflamatórias nos grupos com periodontite induzida comparados ao grupo Controle em 21 dias; maior presença de imunomarcações para Il-7 nos grupos Controle e DM-Metf em 21 dias; menor nível transcricional no tecido gengival de Tgfb1 no grupo Perio e maior nível no grupo DM-Metf+P em 07 dias, e aumento de Tgf- β1 após tratamento com Metf, especialmente em 21 dias. Conclui-se que os modelos experimentais de indução de DM e periodontite foram bem-sucedidos, assim como o tratamento com Metf para controle glicêmico dos animais com DM. A citocina Il-7 expressou-se em tecido gengival saudável, inclusive após tratamento de DM com Metf, e a citocina Tgf-β1 foi influenciada pelo decurso da periodontite em tecido gengival, e pelo tratamento com Metf.
Análise das alterações de laminados cerâmicos em diferentes situações forenses: um estudo in vitro.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-01) Silva, Jessica Katarine de Abreu ; Andrade, Marcelo Ferrarezi ; Faculdade de Odontologia de Araraquara, FOAr
A Odontologia tem um papel social e humanitário de extrema relevância. São inúmeras as informações que podem ser obtidas através dos achados odontológicos. Estudos têm sido realizados com o objetivo de identificar as alterações ocorridas nos materiais dentários quando submetidos a temperaturas elevadas ou baixas; mas, até o momento, poucos estudos sobre as mudanças causadas pela submersão em água doce e condições de inumação foram realizados. Alterações de cor e outras mudanças macroscópicas e microscópicas podem carregar informações valiosas para estimar o período que os materiais ficaram expostos a determinadas condições e esses dados podem refletir na dinâmica forense. O objetivo do presente estudo foi analisar as alterações (estabilidade de cor, estereomicroscopia e rugosidade de superfície) de laminados cerâmicos em diferentes situações forenses (simulação de carbonização, afogamento e inumação). Duzentos incisivos inferiores bovinos extraídos, hígidos, com anatomia coronária semelhante, sem trincas e/ou fraturas foram utilizados no estudo. A alocação nos grupos deu-se de acordo com o tipo de cerâmica e particularidade da situação forense em questão (temperatura, tempo de submersão e tempo de inumação). Os dentes foram preparados, assim como as peças, e após tratamento de superfície da peça e cimentação, as amostras foram acomodadas em água destilada durante 7 dias e acondicionados em estufa com 100% de umidade relativa a 37°C. As leituras prévias das amostras foram realizadas e passado o tempo e temperatura previamente estabelecidos, as análises pós-submissão às situações foram realizadas e os dados foram tratados com auxílio de programa estatístico IBM® SPSS Statistics® versão 25.0 para IOs. A normalidade foi verificada através do teste de Shapiro-Wilk (p<0,05) e a homocedasticidade dos dados através do teste f (teste de Levene) (p<0,05). Os dados não cumpriram os pressupostos e, portanto, foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis. Quando submetidos a altas temperaturas, os laminados cerâmicos estudados, apresentaram alterações na cor e na rugosidade de superfície, independente da cerâmica utilizada, desde que a temperatura mínima seja 1200ºC. Quando submetidos a submersão em água doce, é possível observar alteração na cor e na rugosidade de superfície quando laminados cerâmicos são imersos por tempo prolongado em ambiente de água doce a depender do tipo de cerâmica e do tempo de submersão. Quando submetidos a inumação, maiores tempos (dias) de inumação alteram a cor da cerâmica feldspática. Com relação a rugosidade de superfície, maiores tempos (dias) de inumação alteram a rugosidade de superfície em abas as cerâmicas. Portanto, foi possível concluir que os laminados cerâmicos estudados apresentaram alterações quando submetidos a situações de queima intensa e constante acima de 1200ºC, quando submetidos a submersão prolongada em ambiente de água doce por, no mínimo, 360 dias e quando inumados por, no mínimo, 360 dias.
Caracterização imuno-histoquímica das tetraspaninas CD9, CD63 e CD81, oncogênese viral e índice proliferativo em carcinomas espinocelulares da região de cabeça e pescoço
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-02) Silva, Paula Verona Ragusa da ; León, Jorge Esquiche ; Bufalino, Andreia ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O carcinoma espinocelular (CEC) de cabeça e pescoço (CECCP) corresponde a cerca de 95% dos cânceres que acometem esta região anatômica, com uma incidência anual de 700 mil novos casos e 350 mil óbitos, na população mundial. Vários estudos mostram diferenças nos fatores etiológicos, comportamento clínico e prognóstico no CEC cavidade oral (CECO), CEC de orofaringe (CECOrof), CEC de lábio inferior (CECLI) e CEC de laringe (CECLar), os mesmos que são reconhecidos pela organização mundial da saúde (OMS). É possível que alterações moleculares estejam influenciando estas características clinicopatológicas, com estudos mostrando que as tetraspaninas (TSPANs) são importantes reguladoras do microambiente tumoral. Entender o perfil de expressão das TSPANs exossomais CD9, CD63 e CD81 pode ser relevante visando esclarecer os mecanismos etiopatogênicos do CECCP, devido à notável participação dos exossomos na progressão tumoral e no prognóstico, auxiliando com o desenvolvimento de terapias antineoplásicas específicas, com impacto na sobrevida e qualidade de vida. Assim, o objetivo principal deste estudo foi determinar o perfil de imunoexpressão e valor prognóstico das TSPANs CD9, CD63 e CD81 em 537 casos de CECCP, incluindo CECOrof (n=205), CECO (n=181), CECLar (n=104) e CECLI (n=47), focando em associações com status de infecção pelo papilomavirus humano (HPV) e vírus Epstein-Barr (EBV), ambos por hibridização in situ (HIS), e índice proliferativo (ciclina D1 e Ki-67). Nenhum caso foi EBV positivo, já 29, 12, 21 e 1 casos foram HPV-alto risco positivos no CECOrof, CECO, CECLar e CECLI, respectivamente. Não houve associação entre a expressão de TSPANs com HPV-alto risco e potencial proliferativo. O CECO apresentou maior expressão de CD9 do que os outros CECs. Constatou-se que a alta expressão do CD63 está associada com menor tempo de sobrevida no CECOrof e CECLar. A alta expressão do CD9 foi associada com CECCP moderadamente/pobremente diferenciado. Além disso, houve associação entre alta expressão de CD81 e ausência de metástase linfonodal no CECCP. Nossos resultados fornecem valiosas informações prognósticas do perfil de imunoexpressão da TSPANs no CECCP, as quais parecem ser independentes de mecanismos oncogênicos virais e proliferativos, destacando-as como alvos imunoterapêuticos promissores.
Avaliação da expressão gênica e proteica do Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma Gama em modelo murino de Diabetes Mellitus e Periodontite
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-31) Rimachi Hidalgo, Marco Antonio ; Caminaga , Raquel Mantuaneli Scarel
É cada vez mais frequente encontrar pacientes afetados pela combinação de Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) e Periodontite (P). Ambas as patologias elicitam a resposta imune inflamatória no indivíduo, na qual atua o Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma Gama (Ppar-γ) com ação anti-inflamatória, sendo também importante na regulação do metabolismo glicêmico e lipídico. No entanto, são poucos os estudos que investigam a participação do Ppar-γ na modulação do DM2 e P. Estudos com modelos animais tem sido o desenho experimental de escolha quando se deseja conhecer de modo mais controlado a possível influência de uma determinada molécula em um contexto patológico. O objetivo geral deste estudo foi avaliar a expressão gênica e proteica do Ppar-γ em camundongos submetidos à indução do Diabetes Mellitus e Periodontite. Metodologia: 192 camundongos C57BL/6J machos com 8 semanas de idade e 22g de peso foram distribuídos nos grupos: DM, DM_P, P, e C. DM foi induzido pela combinação de dieta hiperlipídica (56 dias antes da indução da Periodontite) e injeção de estreptozotocina, 28 dias antes da indução da Periodontite, que ocorreu pela combinação de ligadura e infecção por Porphyromonas gingivalis (P.g). O peso corporal e a glicemia pós-prandial de todos os animais foram avaliados semanalmente. Doze animais em cada grupo foram eutanasiados nos períodos experimentais Zero, 7, 14 e 21 dias após a indução de P. Os parâmetros bioquímicos foram dosados no plasma. A perda de volume ósseo periodontal nos animais foi analisada por micro-CT. Em todos os grupos e períodos foram avaliados os níveis de Ppar-γ, além de Tnf-α, por meio de: (i) quantificação dos níveis transcricionais sistêmicos (mRNA nos leucócitos), traducionais sistêmicos (níveis proteicos nos leucócitos); além de transcricionais do periodonto (mRNA gengival) e traducionais (imuno-histoquímica em gengiva). Foi realizada morfometria do tecido gengival e avaliação histológica de fígado e rim. Houve sucesso do modelo experimental de DM comprovado por altos níveis de glicemia pós-prandial e colesterol total nos grupos diabéticos. O sucesso do modelo experimental de periodontite foi comprovado por micro-CT dada a maior perda óssea alveolar nos grupos com P. A expressão gênica de Pparg nos leucócitos foi significativamente maior no grupo “C” no tempo Zero e 7 dias. No acompanhamento longitudinal, o grupo “P” é o que apresentou os menores níveis sistêmicos de mRNA do Pparg; e o maior para Tnfa. A expressão do gene Pparg na gengiva foi significativamente maior no grupo “P” em 14 dias, e do gene Tnfa no mesmo período houve tendência de maior expressão no grupo “DM_P”. Nesse mesmo grupo em 7 dias houve significativa maior expressão proteica sistêmica de Tnf-α. Houve uma tendência de mais células imunopositivas para Pparγ no grupo “C” em todos os tempos, e para Tnf-α nos grupos com pelo menos uma das doenças em 7 e 21 dias. Houve maior porcentagem de células inflamatórias e de vasos sanguíneos nas gengivas dos grupos “DM_P” e “P” em 21 dias. Foram observadas em 21 dias gotículas lipídicas ou vacúolos no fígado e rim de animais com “DM” e “DM_P” em comparação ao grupo “C”. Conclui-se que os níveis de mRNA de Pparg sistêmicos, e de Ppar-γ proteicos na gengiva foram maiores no grupo “C”. Em contraste, Tnfa teve a expressão gênica sistêmica principalmente elicitada pelo grupo “P”, e proteica no plasma pelo grupo “DM_P” em 7 dias, concordando com maior porcentagem de células inflamatórias e vasos sanguíneos no tecido gengival em 21 dias.
Utilização do enxerto em bloco cerâmico 3D em comparação ao enxerto em bloco autógeno para aumento ósseo horizontal em região anterior de maxila: estudo clínico randomizado de boca-dividida
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-19) Malzoni, Carolina Mendonça de Almeida ; Marcantonio Junior, Elcio
Procedimentos de enxerto ósseo são imprescindíveis para permitir a reabilitação oral implanto-suportada de regiões com insuficiência óssea. Entre os enxertos utilizados, o de origem autógena se destaca por apresentar propriedades osteogênica, osteoindutora e osteocondutora. No entanto, também oferece desvantagens como maior tempo cirúrgico, maior morbidade pós-operatória e quantidade limitada de tecido disponível. Por esta razão substitutos ósseos vêm sendo utilizados. Com o avanço da tecnologia CAD/CAM (desenho assistido por computador/ manufatura assistida por computador), enxertos ósseos cerâmicos podem ser personalizados e impressos 3D. Esta tecnologia fornece precisão e agilidade ao procedimento cirúrgico e ainda elimina as desvantagens da utilização de enxerto autógeno. Contudo, a literatura ainda carece de estudos clínicos randomizados para avaliar o efeito destes enxertos impressos 3D na regeneração óssea. Desta forma, este estudo clínico randomizado de boca-dividida teve como objetivo comparar a estabilidade volumétrica do enxerto impresso 3D comparativamente ao enxerto autógeno quando utilizados para aumento horizontal de região anterior de maxila. Para isso, 19 pacientes foram incluídos e os defeitos ósseos foram aleatoriamente divididos em grupo teste (enxerto impresso 3D) e grupo controle (enxerto autógeno). O procedimento foi cronometrado em ambos grupos e o exame de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) foi solicitado no pós-operatório imediato (após 1 semana) de todos participantes. Após 8 meses, os pacientes foram submetidos a nova TCFC. Além disso, biópsias das áreas enxertadas foram obtidas e os implantes foram instalados na região. A análise da frequência de ressonância (RFA) foi utilizada para avaliar a estabilidade primária e secundária dos implantes. As biópsias obtidas foram processadas para análises histológica e imuno-histoquímica por meio das proteínas osteocalcina, fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), fosfatase alcalina (ALP) e proteína morfogenética 2 (BMP-2). Após 8 meses, a análise tomográfica indicou cerca de 3x menor reabsorção volumétrica do enxerto impresso 3D (4,12%  2,71) em relação ao enxerto autógeno (12,93%  2,2). Além disso, a utilização do enxerto impresso reduziu o tempo operatório de adaptação e remoção dos enxertos (9,40 minutos  4,06 no grupo teste e 34,65 minutos  14,5 no grupo controle) e não apresentou diferenças em relação à estabilidade primária e secundária dos implantes instalados entre os dois grupos. A análise histológica indicou segurança no uso do Plenum®Oss 3Dβfit, sem infiltrado inflamatório, neoformação óssea favorável e com estágio avançado de mineralização. A análise imuno-histoquímica indicou que o enxerto autógeno após 8 meses apresenta-se mais maduro e com maior imunomarcação para VEGF. A BMP-2 foi pouco perceptível em ambos os grupos e a presença de ALP e OCN no grupo teste indica maior atividade osteoblástica quando o enxerto impresso 3D foi utilizado. O estudo clínico demonstrou, portanto, que o uso do enxerto impresso 3D é extremamente benéfico para o profissional e para o paciente, reduzindo a morbidade pós-operatória, facilitando a técnica e promovendo maior estabilidade volumétrica do enxerto após 8 meses de regeneração.
Efeito do clareamento e polimento na recuperação de propriedades ópticas e susceptibilidade ao manchamento com café em materiais monolíticos CAD-CAM.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-07) Castillo Peña, Ranulfo ; Fonseca, Renata Garcia
Restaurações confeccionadas com materiais monolíticos CAD-CAM podem sofrer alterações em suas propriedades ópticas quando em contato com corantes. Na tentativa de reverter esta condição, evitando-se a substituição destas restaurações, teríamos como opções o clareamento, o polimento com pastas e pontas abrasivas e alternativamente o jato profilático, com pós abrasivos. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do clareamento e do polimento no restabelecimento e na susceptibilidade a alterações de propriedades ópticas de materiais monolíticos CAD-CAM manchados com café. Para as análises das propriedades ópticas, espécimes de cada um dos materiais LavaTM Ultimate (LU), VITA ENAMIC® (VE), IPS Empress® CAD (EMP), IPS e.max® CAD (EMAX) e VITA® Suprinity (VS) foram alocados em 6 grupos em função do tratamento (n=12/grupo) como segue: 1) sem tratamento (controle), 2) polimento com sistema de pastas profiláticas Proxyt (PRO); 3) polimento com pontas de silicone do sistema Ceramisté (CER); 4) clareamento com peróxido de carbamida (OPF) a 10% 6 h ao dia por 7 dias; 5) clareamento com peróxido de hidrogênio (WHP a 35% - 1 aplicação de 45 min e 6) jato profilático com Clinpro Prophy Powder (CPP). Um espectrofotômetro foi empregado para registrar as coordenadas de cor no sistema CIEL*a*b* no baseline (L0), após imersão em café e tratamento (L1) e após nova imersão em café (L2). Para as análises de alteração de luminosidade (ΔL00), cor (ΔE00), parâmetro relativo de translucidez (ΔRTP00) e brancura (ΔWID) foram calculados L1−L0 e L2−L0. Além disso, ΔL00, ΔE00, ΔRTP00 e ΔWID foram interpretados com base nos respectivos limiares de 50:50% perceptibilidade e 50:50% aceitabilidade. Para as análises estatísticas foram empregadas ANOVA de medidas repetidas mista e comparações múltiplas de médias com os intervalos de confiança 95%. O nível de significância foi estabelecido em 0,05. No LU, PRO e OPF reduziram ΔL00(L1-L0), ΔE00(L1-L0) e ΔWID(L1-L0) e apresentaram menores ΔL00(L2-L0), ΔE00(L2-L0) e ΔWID(L2-L0). No VE, todos os tratamentos diminuíram ΔL00(L1-L0), ΔE00(L1-L0) e ΔWID(L1-L0), enquanto ΔL00(L2-L0), ΔE00(L2-L0) e ΔWID(L2-L0) foram menores no OPF do que no grupo controle. Em ambos os momentos, ΔE00 e ΔWID no EMP (também ΔL00) e EMAX foram maiores no OPF do que no grupo controle, do qual os demais tratamentos não diferiram em L1-L0. No EMP, ΔE00(L2-L0) no WHP (também ΔL00(L2-L0)) e PRO também foram maiores em comparação ao grupo controle e no VS, CER diminuiu ΔL00(L1-L0), ΔE00(L1-L0) e ΔRTP00(L1-L0), enquanto OPF aumentou ΔRTP00(L1-L0). ΔE00(L2-L0) do CER e ΔWID(L2-L0) e ΔRTP00(L2-L0) do PRO foram inferiores aos do grupo controle. O tratamento mais adequado para recuperar as propriedades avaliadas sem alterá-las após nova exposição ao café é material-dependente.
Papel imunomodulador das beta-defensinas na resposta inflamatória nos tecidos periodontais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-27) Gutierrez, Lorena Silva ; Zandim-Barcelos, Daniela Leal ; Faculdade de Odontologia de Araraquara
A periodontite é uma doença inflamatória crônica, induzida por bactérias, que causa a destruição dos tecidos de suporte dentário. Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) são importantes componentes da reposta imune inata e um dos principais mecanismos de defesa do sulco gengival, exibindo uma atividade antimicrobiana contra um amplo espectro de bactérias Gram-negativas e positivas, fungos e vírus, além regularem eventos inflamatórios iniciais e aumentarem a imunidade adaptativa. As defensinas, beta (HBD) e alfa-defensinas, são os PAMs predominantes em humanos. Estudos prévios mostraram que há uma diferença na regulação destes peptídeos em sítios com saúde e doença periodontal. Assim, os objetivos deste estudo foram: (1) avaliar o efeito do tratamento periodontal não-cirúrgico (TPNC) sobre os níveis de HBD-1, 2 e 3 no fluido crevicular gengival (FCG) de pacientes sistemicamente saudáveis com periodontite, (2) investigar o impacto do estímulo com HBD-2 em células epiteliais na expressão de IL-8, CCL20 e seus receptores CXCR1, CXCR2 e CCR6. Para o estudo clínico, 22 pacientes com boas condições de saúde geral, portadores de periodontite estágio III ou IV, grau B foram selecionados. Esses pacientes apresentavam pelo menos 4 sítios com profundidade de sondagem (PS) ≥ 4 mm, sangramento à sondagem (SS) e nível clínico de inserção (NCI) ≥ 4 mm em diferentes quadrantes. Os seguintes parâmetros clínicos foram avaliados: índice de placa visível (IPV), índice de sangramento gengival (ISG), PS, SS e NCI. Após uma semana do exame clínico, foi realizada coleta de FCG de dois sítios periodontalmente saudáveis, dois com perda de inserção moderada (PS = 4-5 mm, SS e NCI ≥ 4 mm) e dois com perda de inserção avançada (PS ≥ 6 mm, SS e NCI ≥ 6 mm). Em seguida, o tratamento periodontal nãocirúrgico foi realizado, por um único operador, por meio raspagem e alisamento radicular (RAR). Um mês após o término do TPNC, foram realizadas novas coletas do FCG dos sítios selecionados e reavaliação dos parâmetros clínicos. A quantificação dos níveis das HBDs no FCG foi realizada pela técnica ELISA sanduíche. Para o estudo in vitro, queratinócitos foram estimulados com duas diferentes doses de HBD2 e, então, os níveis dos mediadores inflamatórios e seus receptores foram detectados quanto à expressão gênica pela técnica RT-qPCR em tempo real e a quantificação proteica foi determinada pelo ensaio de ELISA sanduíche. Os dados de ambos os estudos foram tabulados e análises estatísticas apropriadas foram realizadas. No estudo clínico, os níveis de HBD-1 foram significativamente maiores no FCG após tratamento periodontal em comparação com os valores de baseline. Para as HBD-2 e 3 não foram detectadas diferenças nos níveis pré e pós-tratamento. Nos experimentos in vitro, o estímulo com HBD-2 aumentou significativamente a expressão gênica de IL8, CCL20 e seus receptores CXCR1, CXCR2 e CCR6 em queratinócitos. Estes resultados confirmam que as HBDs podem ter um efeito imunomodulador na etiopatogênese da periodontite.
Influência do uso de guias cirúrgicos periodontais manufaturados por fluxo digital na previsibilidade de procedimentos de aumento de coroa clínica em área estética
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-07) Gonçalves, Victor ; Marcantonio Junior, Elcio
O objetivo deste estudo clínico controlado e randomizado foi avaliar a efetividade da utilização de guias cirúrgicos periodontais, confeccionados por fluxo digital, para procedimentos de aumento de coroa clínica estético. Para isso, 20 pacientes com erupção passiva alterada nos elementos dentários de 14 a 24 foram divididos de forma randomizada em dois grupos: teste e controle. Todos pacientes realizaram exames de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC) e escaneamento digital intra-oral (EDI) previamente ao procedimento cirúrgico. O grupo controle, envolveu procedimentos de aumento de coroa clínica tradicionais sem o uso de guias cirúrgicos periodontais, porém com acesso a todas as informações prévias obtidas por exames de diagnóstico clínico e radiográfico (TCFC). Já o grupo teste, envolveu procedimentos de aumento de coroa clínica com o uso de guias cirúrgicos periodontais. O planejamento virtual foi realizado em ambos os grupos, mensurando a altura de tecido gengival a ser removida, porém somente no grupo teste os guias cirúrgicos foram impressos. Nos períodos de 6 meses e 1 ano após o procedimento cirúrgico, para verificar a previsibilidade da técnica cirúrgica em relação ao planejamento inicial, foi realizado um novo EDI de todos os pacientes. A sobreposição dos arquivos do EDI inicial e final foi realizada por meio de softwares Mimics® e 3-matic® e então foi mensurada a altura de tecido gengival removida. Estes valores foram então comparados com os valores do planejamento virtual inicial do caso. Também foi aplicado aos pacientes uma escala visual analógica para que os mesmos quantificassem as sensações dolorosas. O teste de two-way Anova complementado pelo teste de Tukey foi utilizado para análise inferencial dos dados sendo aplicado ao nível de confiança de 95%. A posição do tecido gengival marginal encontrava-se coronalmente ao que foi planejado inicialmente nos caninos, incisivos laterais e incisivos centrais nos períodos de 6 e 12 meses. Não houve diferença entre as técnicas avaliadas na variação da remoção do tecido gengival em ambos os períodos de avaliação. Entretanto, ao comparar os arquivos dos escaneamentos após 6 meses e 1 ano, foi observado maior ganho de tecido gengival marginal nos incisivos laterais superiores no grupo controle em comparação ao grupo teste. Em relação a sensação dolorosa foi observado que o tratamento aplicado impactou a escala VAS, sendo que o tratamento de erupção passiva por cirurgia guiada reduziu a percepção de dor por parte dos pacientes. Os pacientes demonstraram altos níveis de satisfação com o procedimento independente da técnica cirúrgica aplicada. Diante dos achados desse estudo, pode-se concluir que as técnicas de cirurgia guiada e convencional são efetivas para tratamento de erupção passiva alterada, entretanto, a sensação dolorosa e a tendência de recidiva do posicionamento coronal dos tecidos marginais dos incisivos laterais foi menor quando a técnica de cirurgia guiada foi aplicada.
Bisfosfonatos e implantodontia: efeito de inibidores de metaloproteinases da matriz em modelo in vitro
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-03) Cardoso, Laís Medeiros ; Basso, Fernanda Gonçalves
O uso de bisfosfonatos (BFs) é indicado para o tratamento de doenças ósseas neoplásicas e metabólicas, controlando a reabsorção do tecido ósseo. Esses medicamentos apresentam alta capacidade de adesão aos tecidos mineralizados e, a partir de um evento traumático e/ou inflamatório, podem ser liberados. A instalação de implantes dentais osseointegrados em pacientes em tratamento com BF é controversa, pois a indução de um evento traumático no local pode desencadear áreas de osteonecrose. A super-expressão de enzimas metaloproteinases da matriz (MMPs) por células da mucosa oral e osteoblastos em contato com bisfosfonatos, também pode interferir negativamente na osseointegração e formação do selamento biológico dos implantes. Assim, a modulação da atividade das MMPs poderia favorecer tais eventos teciduais. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial de dois inibidores de MMPs – Proantocianidinas (PA) (extrato natural da semente de uva Vitis vinífera) e Naringenina (NA) (sintética), no controle da síntese e atividade dessas enzimas por fibroblastos gengivais humanos (HGF) e osteoblastos (Ob; Saos-2) cultivados sobre superfícies de titânio e tratados com o BF ácido zoledrônico (AZ). Discos de titânio foram individualmente acondicionados em placas de cultura de células, e sobre estes, foram cultivados HGF ou Ob em meio de cultura DMEM + 10% de soro fetal bovino (SFB) por 24 horas. Em seguida, as células foram tratadas com concentração não citotóxica de PA ou NA, previamente definida, por 24 horas, seguido da adição do AZ (5 μM) em DMEM sem SFB. Após diferentes períodos de contato, foram avaliadas a adesão e proliferação celular (microscopia de fluorescência direta), síntese de MMP-2 e MMP-9, bem como dos inibidores teciduais de metaloproteinases (TIMP)-1 e TIMP-2 (ELISA) e atividade gelatinolítica (zimografia in situ). A capacidade de mineralização pelos Ob foi avaliada por meio da atividade de fosfatase alcalina (ALP) após 7 dias de cultura. Os dados foram analisados pelos testes one-way ANOVA e Tukey post-hoc (α = 0,05). O tratamento com AZ prejudicou a adesão e proliferação celular, além de aumentar a síntese (p < 0,05) e a atividade das MMPs; o pré-tratamento com os flavonoides controlou os efeitos gelatinolíticos induzidos pelo AZ, regulando negativamente a síntese e atividade de MMPs (p < 0,05) por HGF e Ob, além de favorecer a adesão e proliferação dessas células. Para HGF, o pré-tratamento com NA e PA não regulou positivamente a síntese de TIMP após exposição ao AZ (p > 0,05); para Ob, o TIMP-2 foi regulada positivamente (p < 0,05) pelos flavonoides, seguido de exposição ao AZ. A atividade de ALP em Ob foi marcadamente diminuída pelo AZ e o pré-tratamento com NA modulou levemente esse efeito (p < 0,05). Portanto, o pré-tratamento com os flavonoides investigados promove resultados interessantes na modulação dos efeitos deletérios do AZ, favorecendo a adesão e proliferação celular, regulando negativamente a síntese e atividade de MMP-2 e MMP-9 por HGF e Ob e regulando positivamente o TIMP-2 por Ob.
Avaliação mecânica e análise por elementos finitos de diferentes desenhos da Osteotomia Sagital do Ramo Mandibular
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-02) Santos, José Cleveilton dos ; Gabrielli, Marisa Aparecida Cabrini
A Osteotomia Sagital do Ramo Mandibular é a mais utilizada para correção de deformidades dentoesqueléticas que envolvam a mandíbula. Várias modificações em seu desenho foram propostas ao longo dos anos, sendo que, atualmente, a osteotomia sagital convencional é a mais utilizada. Entretanto, dois outros desenhos dessa osteotomia são amplamente utilizados na atualidade; um descrito como “short split” e outro descrito como “short cut”. Apesar das vantagens de cada técnica, não há na literatura trabalhos que comparem essas osteotomias, para guiar a escolha do cirurgião e prevenir complicações cirúrgicas. Assim, o objetivo deste estudo foi realizar uma analise mecânica e computacional desses diferentes desenhos da osteotomia citados. Para tanto foi realizado um ensaio mecânico a fim de testar a hipótese nula de que não há diferença na força média necessária para separar os segmentos mandibulares quando utilizados tais desenhos, utilizou-se 30 modelos de hemimandíbulas divididos em 3 grupos cada um com um desenho de osteotomia diferente, adicionalmente foi realizada uma análise computacional por meio do método de elemento finitos para analisar a distribuição de tensões em modelos com osteotomia sagital convencional e short cut. A hipótese nula foi rejeitada após análise estatística com ANOVA de uma via (p < 0,05) que evidenciou a osteotomia convencional com maior média de força necessária para separação dos segmentos. A análise computacional demonstrou a magnitude de deslocamento maiores nas áreas mais distantes, assim como a distribuição da tensão principal máxima e tensão de von Mises, concentradas na região de aplicação da força e direcionada ao longo da osteotomia. Conclui-se que a osteotomia sagital convencional demanda maior força de separação e a osteotomia sagital curta apresenta um maior deslocamento dos segmentos e maior concentração de tensões sugerindo uma separação facilitada, entretanto há uma propagação de tensão de von Mises em direção ao côndilo que indicaria o risco de uma fratura indesejada da região.
Propriedades físico-química, resistência de união e atividade antibiofilme de novos cimentos obturadores à base de silicato de tricálcio
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-25) Pradelli, Jéssica Arielli ; Tanomaru, Juliane Maria Guerreiro
Tempo de presa (n=6), escoamento (n=6), pH (n=10), solubilidade (n=6) e radiopacidade (n=4) de cimentos endodônticos biocerâmicos foram avaliados de acordo com a norma ISO 6876. Resistência de união (foi avaliada pelo teste de Push-Out) e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans pelo teste de contato direto modificado com eluído do cimento fresco e cimento após 24 horas de presa do cimento. Os dados obtidos foram analisados pelos testes ANOVA e Tukey (α=0,05). Publicação 1 – Sealer Plus BC (SPBC) foi comparado ao Bio-C Sealer (BCS) e ao AH Plus Jet (AHP). SPBC apresentou maior tempo de presa que BCS e menor que AHP, menor escoamento que BCS e maior que AHP (p<0,05). SPBC apresenta a menor radiopacidade (p<0,05), e maior resistência de união em relação ao BCS e ao AHP (p<0,05). SPBC e BCS demonstraram pH alcalino e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans no eluído e corpo de prova (p<0,05). No entanto, SPBC e BCS mostraram solubilidade maior que 3%. SPBC apresenta adequados tempo de presa, escoamento e radiopacidade, maior resistência de união, pH alcalino, atividade antibiofilme, mas solubilidade acima do recomendado pela ISO. Publicação 2 – AH Plus Biocerâmico (AHPB) em comparação aos cimentos Bio-C Sealer (BCS) e AH Plus Jet (AHP). AHPB apresentou menor tempo de presa e resistência de união que BCS e AHP (p<0,05). Radiopacidade foi menor que AHP e maior que BCS (p<0,05). AHPB apresentou escoamento maior que AHP e menor que BCS (p<0,05). AHPB e BCS demonstraram pH alcalino e atividade antibiofilme contra E. faecalis associado ou não a C. albicans no eluído (p<0,05). Conclui-se que AHPB apresenta tempo de presa, escoamento e radiopacidade de acordo com as normas ISO 6876, a menor resistência de união, pH alcalino e atividade antibiofilme com eluído do cimento. No entanto AHPBC e BCS, excedem 3% de solubilidade. Publicação 3 – Comparação entre NeoSealer Flo (NSF) e NeoMTA2 (NMTA2) com o Bio-C Sealer (BCS) e AH Plus Jet (AHP). AHP apresentou o maior tempo de presa, seguido por NMTA2 e NSF (p<0,05). NSF e BCS excederam a solubilidade recomendada, enquanto NMTA2 e AHP atenderam aos padrões (p<0,05). NSF e NMTA2 apresentaram os menores valores de radiopacidade (p<0,05). NMTA2 teve o menor escoamento, inferior ao recomendado pela ISO (p<0,05). NSF obteve a maior resistência de união, seguido pelos demais cimentos (p<0,05). Os biocerâmicos promoveram pH alcalino (p<0,05). Todos os cimentos exibiram maior atividade antibiofilme com eluído. Conclui-se que NSF e NMTA2 apresentam propriedades físico-químicas e mecânicas adequadas, pH alcalino e atividade antibiofilme contra Enterococcus faecalis. No entanto, NSF mostrou maior solubilidade e NMTA2 menor escoamento do que o recomendado pelas normas ISO.
Terapia fotodinâmica antimicrobiana com utilização da clorina-e6 e LL-37 em nanoemulsão no tratamento da doença periodontal: estudo in vitro e in vivo
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-27) Carvalho, Gabriel Garcia de ; Zandim-Barcelos, Daniela Leal ; Faculdade de Odontologia de Araraquara
A Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) é considerada a terapia não-cirúrgica de escolha para tratamento da doença periodontal (DP). No entanto, esta terapia pode apresentar limitações e insucessos quando utilizada isoladamente em determinados casos clínicos. Assim, terapias alternativas têm sido investigadas para suprir deficiências da RAR que podem estar relacionadas ao limitado acesso à superfície radicular durante o tratamento, a presença persistente de periodontopatógenos nas bolsas mais profundas e defesa imunológica deficiente. Dentre estas terapias, destaca-se a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) e o uso de peptídeos antimicrobianos (PAM). O objetivo geral deste estudo foi investigar a otimização de clorina-e6 (Ce6) na terapia fotodinâmica e seu efeito como terapia coadjuvante no tratamento não cirúrgico da DP. Os objetivos específicos foram: (1) testar o efeito antimicrobiano da Ce6 irradiada por luz azul ou vermelha sobre biofilme multiespécie de periodontopatógenos; (2) otimizar o Ce6 em nanoemulsão e testar o efeito sinérgico do LL-37 com aPDT sobre biofilme multiespécie de periodontopatógenos; (3) testar o efeito de aplicações múltiplas da aPDT utilizando nanoemulsão carregada com Ce6 e LL-37 no tratamento de ratos com DP induzida. Biofilme multiespécie com bactérias periodontopatogênicas foi desenvolvido em condições ideais para avaliação antimicrobiana nos estudos 1 e 2, e a mesma foi avaliada por meio de ensaio qPCR. No estudo 1, a maior eliminação bacteriana foi observada nos grupos onde a luz azul foi aplicada. No estudo 2, após otimização e caracterização da Ce6 em nanoemulsão, foi observado que a combinação Ce6 e LL-37 em nanoemulsão foi efetiva na eliminação de todas as bactérias testadas. No estudo in vivo, sessões únicas ou múltiplas de terapia fotodinâmica com clorina-e6 conjugada com peptídeo antimicrobiano LL-37 em nanoemulsão como adjuvante da RAR no tratamento da DP não proporcionaram benefícios em comparação à terapia convencional isoladamente.

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