Botucatu - FMVZ - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia
URI Permanente para esta coleçãohttps://hdl.handle.net/11449/254460
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PublicaçãoTese de doutorado Resistoma de isolados Salmonella spp. obtidos de carcaças e cortes de frango: uma análise temporal de 2004 a 2020.(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-02-06) Caron, Evelyn Fernanda Flores
; Pereira, Juliano Gonçalves ; Possebon, Fábio Sossai ; Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia - FMVZ - Campus de Botucatu ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) Devido à importância da resistência antimicrobiana na saúde pública e a crescente identificação de genes de resistência por técnicas moleculares, o estudo investigou o perfil genotípico de Salmonella spp. isolados de carcaças e cortes de frango entre 2004 e 2020, comparando a resistência fenotípica e genotípica aos antimicrobianos. Foram analisados 28 isolados, divididos em "antigos" (2004-2006) e "novos" (2019-2020). O método de disco-difusão foi utilizado para obter o perfil fenotípico e o sequenciamento de próxima geração (NGS) para identificar genes de resistência antimicrobiana. Entre os isolados "antigos" (n=12), o sorovar Enteritidis foi mais prevalente. Dois isolados antigos apresentaram resistência fenotípica para estreptomicina, mas houve uma variedade de genes de resistência, incluindo ampC1, ampH, PBP3, TEM-60 e TER-1 (beta-lactâmicos), AAC(6')-Iy (aminoglicosídeos) e gyrA (fluorquinolonas), além de genes de bomba de efluxo. Nos isolados "novos" (n=16), o sorovar mais prevalente foi Heidelberg. Apenas um isolado demonstrou sensibilidade fenotípica a todos os antibióticos testados. A resistência mais frequente foi para tetraciclina (87,50% dos isolados resistentes), seguido por ceftazidima, cefoxitina e ampicilina (75%), estreptomicina (18,75%), imipenem, ciprofloxacina e cloranfenicol (6,25%). O perfil genotípico dos isolados novos foi mais diversificado, com presença dos genes ampC1, ampH, PBP3, TEM-60, blaCMY-2, CMY-2, CMY-99, CMY-102 e TLA-2 (beta-lactâmicos), AAC(6')-Iy, aadA, aph(3')-Ia e AAC(6')-Iaa (aminoglicosídeos); qnrB19 (fluorquinolonas); sul2 (sulfametoxazol-trimetoprim); floR (fenicóis) e tet(A) (tetraciclinas), além de genes de bomba de efluxo. Os isolados novos apresentaram maior diversidade e frequência de resistência antimicrobiana tanto fenotípica quanto genotípica em comparação aos isolados antigos.PublicaçãoTese de doutorado Maturação oocitária in vitro baseada em referências fisiológicas: efeitos sobre a produção embrionária em bovinos(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-29) Dellaqua, Thaisy Tino; Buratini, José ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) A maturação in vitro (MIV) de oócitos é um desafio na produção de embriões, devido à desregulação entre a maturação nuclear e citoplasmática causada pelos protocolos vigentes. Modelos de MIV bifásica, que simulam condições fisiológicas, são empregados para melhorar a comunicação cumulus-oócito e competência oocitária. Este estudo investigou os efeitos de uma nova abordagem bifásica, com indução sequencial de FSH e AREG durante a MIV de oócitos bovinos, sobre a progressão meiótica, perfil proteico das células do cumulus (CCs) e o desenvolvimento embrionário inicial in vitro. Complexos cumulus-oócito (COCs) foram aspirados de ovários de abatedouro e maturados in vitro sob duas abordagens: contínua (controle, com FSH e AREG) e sequencial (SEQ, com FSH seguido por FSH+AREG). A progressão meiótica foi determinada pela proporção de oócitos que atingiram a quebra da vesícula germinativa (GVBD), metáfase I (MI) e II (MII) às 6, 9 e 22 h de MIV, respectivamente. As CCs foram desnudas dos oócitos e analisadas pela abordagem proteômica shotgun. A expansão do cumulus foi avaliada após 24 h de MIV e os COCs foram destinados à fertilização e cultivo in vitro. A produção embrionária foi determinada pelas taxas de clivagem, formação de blastocistos e número total de células embrionárias (CEUA, nº 0021/2022). Diferenças na progressão meiótica, expansão do cumulus, produção de blastocisto e número total de células foram analisadas pelo teste T (P < 0,05). Na proteômica das CCs, as proteínas diferencialmente abundantes foram identificadas por análises multivariadas (PCA) e univariada (teste T ajustado por false discovery rate), e utilizadas na análise de enriquecimento de vias, de acordo com a função molecular. A separação dos grupos foi confirmada pela PCA e evidenciada pelo heatmap. Às 6 h de MIV, 58% dos oócitos no grupo controle e 33,9% no grupo SEQ atingiram a GVBD (P=0,0037). Às 9 e 22 h, proporções semelhantes de oócitos atingiram a MI e MII, respectivamente, sem diferenças na expansão do cumulus, clivagem, produção de blastocistos ou número total de células embrionárias. A proteômica das CCs identificou 835 proteínas. Em resposta à abordagem SEQ, às 6 h, 22 proteínas foram diferentemente abundantes, das quais nove estavam associadas a melhorias na produção de energia, sinalização celular e controle proteolítico. Às 9 h, 32 mostraram alterações significativas, sendo 13 associadas a efeitos adversos no metabolismo energético, desequilíbrio redox e disfunções celulares. Já às 22 h, 40 proteínas diferentemente abundantes foram identificadas, das quais duas estavam associadas à regulação positiva da atividade proteassomal. Os dados demonstram que a abordagem sequencial atrasou a progressão meiótica inicial e alterou o proteoma das CCs, sugerindo melhorias no metabolismo energético e comunicação cumulus-oócito após 6 h de MIV. Apesar dos comprometimentos em 9 h, o sistema SEQ parece restaurar as funções celulares ao aumentar a atividade proteassomal no final da MIV, destacando seu potencial para otimizar a maturação oocitária. Este estudo fornece uma base para investigações futuras sobre MIV com indução sequencial, visando ajustes para prolongar a comunicação cumulus-oócito e melhorar os desfechos da produção embrionária.PublicaçãoTese de doutorado Desenvolvimento de um protótipo de espectrômetro NIR portátil com análise de micotoxinas por quimiometria(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2025-01-16) Evangelista, Mariane Zabotto; Tse, Marcos Livio Panhoza ; University of Natural Resources and Life Sciences (BOKU) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) Micotoxinas são metabólitos tóxicos que ocorrem em diversos grãos e cereais e causam danos à saúde pública e na produção animal, assim como na suinocultura. As técnicas laboratoriais mais utilizadas para analisar micotoxinas são caras e demoradas e métodos/técnicas alternativos podem ser uma opção mais rápida e acessível. O presente trabalho teve o objetivo de desenvolver um protótipo de espectrômetro portátil que utiliza a região do infravermelho próximo (NIR) para analisar micotoxinas em milho moído naturalmente contaminado por meio do modelo quimiométrico, classificando para suínos, as micotoxinas zearalenona (ZEA), deoxinivalenol (DON) e fumonisinas B1+B2 (FUMO) em alta e baixa contaminação (AC, BC, respectivamente). Duzentas e cinquenta e nove amostras de milho de 300 g cada foram utilizadas, sendo que cada uma foi subdividida em cinco subamostras de aproximadamente 15 gramas, resultando em cinco repetições. Os espectros médios foram submetidos ao pré-processamento Standard Normal Variate (SNV) e primeira derivada (filtro Savitzky–Golay) e um modelo de análise discriminatória Partial Least Squares Discriminant Analysis (PLS-DA) foi desenvolvido para classificar ZEA, DON e FUMO em AC e BC. As amostras foram analisadas em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS/MS) e os resultados foram utilizados como referência para um modelo de regressão Partial Least Squares Regression (PLS-R) desenvolvido. Os limites máximos tolerados (LMT’s) utilizados para classificar como AC e BC foram 400 μg/kg para ZEA, 2.000 μg/kg para DON e 5.000 μg/kg para FUMO, segundo IN 160/2022 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA); e 150 ou 100 μg/kg para ZEA (leitões e porcas), 300 μg/kg para DON e 1000 μg/kg para FUMO, segundo níveis praticados a campo para suínos. O modelo apresentou bom desempenho com boa acurácia para ZEA 100 μg/kg, DON 300 μg/kg e FUMO 1000 μg/kg (89,6, 70,3 e 80,3%, respectivamente), boas predições (RMSEP = 5,173, 70,53 e 39,54, respectivamente) e correlação alta e positiva com a técnica LC-MS/MS (R2 = 99,59%, 95,61% e 99,15%, respectivamente). Conclui-se que o modelo possui exatidão elevada para classificar ZEA 100 μg/kg, DON 300 μg/kg e FUMO 1000 μg/kg, atende aos LMT’s praticados a campo na suinocultura e pode ser usado na calibração do protótipo e no desenvolvimento de um software para vizualização de resultados.PublicaçãoTese de doutorado Estudo da ocorrência de impingimento de processos espinhosos de vértebras torácicas (kissing spines) em equinos das raças puro sangue inglês e puro sangue árabe(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-12-14) Gallo, Marco Aurélio; Machado, Vânia Maria de Vasconcelos ; Zanotto, Gustavo Miranda ; Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia de Botucatu ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) A coluna vertebral é essencial para o desempenho dos equinos. A dor no dorso compromete os equinos em competição ou reprodução. O segmento torácico é onde a sela do cavaleiro se apoia e que pode gerar dor, a qual deve ser evitada, rapidamente detectada e o prognóstico e tratamento serem prontamente estabelecidos. O impingimento dos processos espinhosos das vértebras torácicas, denominada de Kissing Spines Syndrome (KSS) é uma afecção que acomete equinos e causa queda do desempenho. É considerada a principal causa de dor no dorso. Há trabalhos que buscam melhor entender a ocorrência da KSS, levando-se em consideração a idade, o sexo, a raça e a atividade esportiva a qual o equino exerce e os fatores que aumentem o risco do surgimento; entretanto, a causa determinante não está totalmente elucidada. Os métodos imaginológicos rastreiam alterações compatíveis com a KSS; contudo, a correlação entre os achados de imagem e a manifestação clínica necessita ser aprimorada, por meio de estudos mais aprofundados em equinos sintomáticos e assintomáticos. O exame radiográfico é rápido, eficiente, de baixo custo, que o torna ferramenta de grande auxílio para melhor entender as características da KSS. Este trabalho tem o objetivo de estabelecer um critério prático de posicionamento radiográfico para o auxílio diagnóstico da KSS, triar sua ocorrência e medir as distâncias dos espaços interespinhosos de T2 a T18. Em intervalo de seis meses demonstrou-se haver diferenças significativas. As distâncias dos espaços interespinhosos torácicos podem ser utilizadas como referência anatômica.PublicaçãoTese de doutorado 
Acesso Aberto Controle dos Entes Públicos no cadastro de aves nativas brasileiras e a crescente presença no cadastro das mulheres no ambiente de criação de aves nativas(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-21) Magorbo, Aníbal Bruno; Teixeira, Carlos Roberto ; Universidade Estadual Paulista (UNESP) FMVZ ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O presente estudo tem por objetivo analisar o controle do Estado de São Paulo sobre a criação de aves nativas, a qual é um tema de grande importância no setor da atual consciência ambiental e saúde animal no sentido amplo da palavra. Por meio desse controle/ cadastro o governo busca evitar a propagação de criadores ilegais, seja por meio do comércio de aves nativas ilegais, escambo ou a troca de anilhas de aves sem cadastro, prevenindo assim uma propagação de ilícitos ou surtos de doenças perante os criadores e garantir assim a qualidade e controle das aves. Uma das principais formas de controle do Estado é a implementação de normas, isso inclui o registro obrigatório da pessoa física no IBAMA (Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis) e SISPASS (Sistema de Controle e Monitoramento da Atividade de Criação Amadora de Pássaros) com dados pessoais do voluntário, a qual declara nos documentos citados que autorizará inspeções periódicas e o cumprimento de requisitos específicos de cadastro, registro e higiene na criação das aves. Essas medidas têm como objetivo proteger o cadastro, a saúde das aves e a prevenção ao tráfico de aves por todo o Brasil. Os agentes governamentais realizam visitas periódicas aos estabelecimentos cadastrados para verificar o cumprimento das regulamentações, caso sejam identificadas irregularidades, as autoridades podem aplicar multas, interditar a produção e até mesmo suspender a licença. No atual trabalho será apresentado dados sobre uma crescente no atual cadastro de mulheres para serem criadoras de aves, ponto este que durante a pesquisa se tornou um alerta para o cadastro, haja vista que em muitos casos as mulheres são coagidas pelo maridos ou companheiros a se cadastrarem para que eles possam manter seu PLANTEL de aves ativo, seja por eles terem perdido o direito de cadastro ou não mais terem acesso por várias autuações ambientais, visando minimizar os impactos negativos sobre tráfico de aves e venda ilegal.PublicaçãoTese de doutorado Expressão de proteínas da via de sinalização do mTOR em ceratose actínica e carcinoma espinocelular cutâneo em cães e gatos(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-25) Oliveira, Alana Lucena; Alves, Carlos Eduardo Fonseca ; Universidade Estadual Paulista (UNESP) ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O carcinoma de células escamosas (CCEs) é uma neoplasia cutâneo maligna, que surge a partir dos queratinócitos cutâneos. Em cães e gatos essa neoplasia apresenta alto poder de invasão tecidual. Nessas espécies os animais apresentam diversos aspectos variando desde o desenvolvimento de lesões em regiões glabras ou com pigmentação leve. A presente tese é dividida em três capítulos, que abordam diferentes aspectos do carcinoma de células escamosas em cães e gatos. O primeiro capítulo faz uma avaliação epidemiológica retrospectiva dos CCEs em cães e gatos. O segundo capítulo é focado na investigação de S6K1 e p-4E-BP1 em CCEs felinos e o terceiro capítulo investiga as mesmas proteínas em CCEs caninos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar casos de ceratose actínica e CCEs. A caraterização na mesma amostra através da utilização de marcadores da via PI3K/Akt/mTOR na transição morfológica e molecular do epitélio normal para ceratose e carcinoma. O perfil dos pacientes levantados do estudo retrospectivo de ambas as espécies apresentam características de pelagem clara e idosos o que impacta na predisposição dos pacientes. A via de sinalização PI3K/Akt/mTOR é um regulador chave das funções celulares, a demonstração que pacientes felinos e caninos apresentam ativação ocasionando em impacto em estudos para novas opções terapêuticas para os felinos e os caninos.PublicaçãoTese de doutorado Acesso Aberto Desenvolvimento de biomodelos ósseos da mastofauna selvagem em impressão 3D para fins didáticos(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-16) Barbosa, Luiz Gustavo Bicas; Mota, Lígia Souza Lima Silveira da ; Paschoarelli, Luís Carlos ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O estudo da anatomia, que inicialmente dependia da dissecação de cadáveres, evoluiu com o tempo e agora inclui técnicas modernas como modelos de mídias virtuais, programas computacionais e biomodelos impressos. A impressão 3D possibilita a criação de biomodelos tridimensionais realistas, que facilitam a visualização e o entendimento da anatomia, sendo uma alternativa valiosa para o estudo de animais selvagens. Estes, por sua vez, têm um número reduzido de amostras para dissecação em comparação com as espécies domésticas. Dado que as espécies selvagens possuem estruturas anatômicas distintas e que há escassez de modelos disponíveis, os biomodelos impressos em 3D são uma ferramenta importante para estudar essas peculiaridades. Este trabalho teve como objetivo produzir material didático a partir do escaneamento de peças anatômicas de diferentes espécies e criar arquivos apropriados para impressão por Modelagem por Deposição Fundida (FDM). Os modelos criados foram avaliados por especialistas e 84,21% apresentaram resultados satisfatórios, com medidas que correspondem aos valores encontrados na literatura. Esses modelos foram bem recebidos devido à sua fidelidade visual e clareza nos detalhes anatômicos, demonstrando seu potencial como recursos didáticos eficazes. O estudo conclui que a impressão 3D é uma solução inovadora para a criação de materiais didáticos em anatomia, embora algumas melhorias sejam necessárias para aumentar a precisão de certos modelos.PublicaçãoTese de doutorado Acesso Aberto Nitrogen metabolism and excretion in Holstein dairy heifers fed different levels of metabolizable protein.(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-10) Oliveira, Maria Helena de; Costa, Ciniro ; Fernandes, Tatiane ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) Apesar dos avanços, a otimização do metabolismo de nitrogênio em bovinos leiteiros continua sendo um desafio. No Capítulo 1, uma revisão abrangente da literatura sintetiza o conhecimento atual e identifica lacunas de pesquisa relacionadas à complexa interação de fatores que influenciam o metabolismo e a utilização de proteínas em ruminantes, com foco particular no uso eficiente de nitrogênio dietético. No Capítulo 2, o objetivo foi avaliar os efeitos de três níveis de proteína metabolizável na fermentação ruminal, taxas de entrada de aminoácidos e concentração plasmática de aminoácidos, além do metabolismo e excreção de ureia. Seis novilhas Holandesas dotadas de canulas ruminais foram alocadas em um delineamento em quadrado latino duplicado 3 × 3 com três novilhas cada. Os tratamentos dietéticos foram equilibrados para fornecer níveis semelhantes de proteína bruta (16%) e níveis crescentes de proteína metabolizável para medir as diferenças na eficiência de uso de nitrogênio. Nos primeiros 10 dias de cada período, as novilhas foram alimentadas uma vez ao dia; nos últimos quatro dias de cada período, as novilhas foram alimentadas a cada duas horas (95% da ingestão) para estabilizar o metabolismo dos animais entre as coletas. Coletas pontuais de urina, fezes, conteúdo ruminal, saliva e sangue foram realizadas do dia onze ao dia quatorze de cada período. Aumento da ingestão de proteína degradável no rúmen em uma dieta de Baixa proteína metabolizável resultou em maior produção de ácidos graxos voláteis de cadeia ramificada por meio da degradação de aminoácidos de cadeia ramificada, indicando uma utilização ineficiente de nitrogênio. Novilhas alimentadas com dieta de Alta proteína metabolizável apresentaram maior eficiência de nitrogênio e menor excreção de nitrogênio na urina, juntamente com maior balanço de nitrogênio devido ao maior fornecimento de proteína não degradavel no rúmen. Em conclusão, dietas de Alta proteína metabolizável otimizam a utilização de nitrogênio e melhoram a eficiência dietética.PublicaçãoTese de doutorado New predictive factors identified by molecular study in chemoresistant human and canine mammary carcinoma cells(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-27) Lainetti, Patrícia de Faria; Fonseca-Alves, Carlos Eduardo ; Grieco, Valeria ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) Mammary disorders in dogs occur very frequently in non-neutered and older animals. The majority of these tumors are classified as malignant and the occurrence of metastases in lymph nodes and distant organs can reach 30% of all cases. Canine mammary tumors (CMTs) share similarities with women’s Breast Cancer (BC), including their spontaneous occurrence and higher incidence in older individuals, in addition to similar clinical and molecular characteristics. Although surgical removal is the standard treatment, chemotherapy is discussed as an adjuvant treatment. However, resistance to treatment is a challenge and may be related to acquired or pre-existing genetic mechanisms in tumors. Genetic mutations, such as the presence of SNPs and CNVs in DNA and miRNAs dysregulation can be involved in CMTs and BC resistance. In human BC, several studies have investigated the genetic and epigenic mechanism of chemoresistance. However, little is known about this mechanism in CMTs development and progression. Therefore, this study aimed to identify genetic changes and miRNA dysregulation associated with resistance to chemotherapy in mammary carcinoma cells from dogs and model to human BC. In the first step of this research, five cell lines were used and MDR1, BCRP, MRP1, MRP2 and MRP3 gene expression were assessed to evaluate the baseline expression of these multiple drug resistance genes. Then, these cells were subjected to an induced chemoresistance protocol using doxorubicin. The cell DNA was collected prior and after inducing treatment and subjected to a SNP microarray platform. In this step, we established a standard protocol for inducing MCTs cancer cell lines chemoresistance and identified several SNPs related to chemoresistance in vitro. Only UNESP-CM70 cells were able to induce growth in vivo. The IC50 was determined for each cell type, in the control group and in the treated group. The IC50s were UNESP-CM1 (CTRL = 7.8 μM; DOX = 0.21 μM), UNESP-CM4 (CTRL = 12.54 μM; DOX = 2.9 μM), UNESP-CM5 (CTRL = 0.04 μM; DOX = 0.57 μM), UNESP-CM70 (CTRL = 1.67 μM; DOX = 6.3 μM), UNESP- CMR1 (CTRL = 0.5 μM; DOX = 0.63 μM). Two genes related to the SNP mutations were found, ALK and RALGAPA2, which are associated with tumor progression, invasion, and metastasis. Then, we evaluated miRNAs (miR-29b, miR-146b, miR-191, miR-375) RT-qPCR in 36 CMTs tissue samples. The miR- 29b, miR-146b and miR-375 were found to be downregulated in group grade III when compared to the others groups. These miRNAs may be related to genes responsible for PI3K-AKT signaling pathways, focal adhesion and interaction with the extra-cellular matrix. It was possible to conclude that SNP mutations in ALK and RALGAPA2 genes were identified during CMT chemoresistance induction and miRNA downregulation was associated with high grande CMTs.PublicaçãoTese de doutorado Sequenciamento de genoma completo como ferramenta para determinação do papel das cadeias de produção convencional e alternativa de carne de frango na promoção de resistência aos antibióticos em Salmonella spp., Escherichia coli e Enterococcus spp.(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-20) Cerqueira-Cézar, Camila Koutsodontis; Pereira, Juliano Gonçalves ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O presente estudo se propôs a investigar os perfis fenotípico e genotípico de resistência a antimicrobianos de Salmonella spp., Escherichia coli e Enterococcus spp. em cortes de frango provenientes de cadeias convencionais e antibiotic-free, adquiridos em estabelecimentos comerciais na região de Botucatu, São Paulo, Brasil. Ao total, 284 amostras de cortes de frangos foram coletados, sendo 141 de cadeia convencional e 143 de cadeia antibiotic-free, foram submetidos a análises diagnósticas para detectar a presença dos três microrganismos mencionados, seguindo protocolos específicos para cada. Para Salmonella spp., 10,9% das amostras foram positivas, sendo 26 (18,18%) provenientes do sistema convencional e 5 (3,5%) do sistema antibiotic-free. Quanto a Escherichia coli, foram encontradas 63 (22,1%) amostras positivas, com 29 (20,28%) originárias do sistema convencional e 34 (24,11%) do sistema antibiotic-free. Para Enterococcus spp., 154 (93,9%) amostras foram positivas, sendo 76 provenientes do sistema convencional e 78 do sistema antibiotic-free. Além das análises de resistência, o estudo revelou que 90% dos 210 isolados analisados apresentaram genes de resistência antimicrobiana. Na cadeia livre de antibióticos, 94% dos isolados carregavam genes de resistência, em comparação com 84,9% na cadeia convencional. Entre os isolados de E. coli, foram identificados 41 genes de resistência, dos quais 61% foram compartilhados entre as cadeias. Salmonella spp. apresentou 20 genes de resistência na cadeia convencional e apenas 8 na cadeia livre de antibióticos. Enterococcus spp. apresentou 28 genes de resistência, com 22 na cadeia convencional e 19 na cadeia livre de antibióticos. Os mecanismos de resistência predominantes foram as bombas de efluxo em Salmonella spp. e E. coli, e as alterações no local de ação em Enterococcus spp. O compartilhamento de genes entre E. coli e Salmonella spp., especialmente na cadeia convencional, destaca o risco de transferência horizontal de genes. Estes resultados evidenciam que a simples adoção de sistemas de produção livre de antibióticos pode não ser suficiente para conter a resistência antimicrobiana, sublinhando a necessidade de estratégias multifacetadas para enfrentar esse problema crescente.PublicaçãoTese de doutorado Óleo de pequi (Caryocar brasiliense Camb.) na dieta de frangos de corte submetidos ao estresse pelo calor: abordagem nutricional e proteômica(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-26) Lima, Gabrieli Andressa de; Sartori, José Roberto ; Vieira, José Cavalcante Souza ; Universidade Estadual Paulista (UNESP) O presente estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar o efeito da inclusão do óleo de pequi (OP) em dietas para frangos de corte submetidos ao estresse cíclico pelo calor sobre o desempenho, peso relativo e comprimento dos órgãos, atividade de enzimas antioxidantes do fígado, morfometria intestinal e o perfil diferencial de proteínas expressas no tecido hepático por meio do método shotgun LC-MS/MS. Foram alojados 216 pintos de corte, machos, com um dia de idade, da linhagem Cobb® 500, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2×2, sendo duas câmeras climáticas: termoneutra (TN) e estresse cíclico pelo calor (EC); e duas dietas: Controle (CT) e CT + 0,60% de inclusão do óleo de pequi (OP), com nove repetições de seis aves cada, totalizando quatro tratamentos. As aves e as rações experimentais foram pesadas semanalmente para avaliação do desempenho zootécnico. Aos 42 dias de idade, uma ave por repetição foi sacrificada para a coleta de órgãos, amostras de intestino (duodeno e jejuno) e tecido hepático, para a realização das análises laboratoriais. Não foram observadas interações significativas entre temperatura e dieta para as variáveis de desempenho, peso relativo dos órgãos, atividade hepática das enzimas antioxidantes e morfometria intestinal (P>0,05), porém foram observadas interações significativas para a variável contagem de células caliciformes (CC) no duodeno. No período de 1 a 21 dias de idade, frangos alimentados com OP apresentaram maior peso final (PF) e ganho de peso (GP) em comparação com os frangos do CT. No período de 1-42 dias, os frangos mantidos em EC apresentaram menor PF, GP e consumo de ração (CR), conversão alimentar (CA) e fator de eficiência produtiva (FEP), e os frangos que receberam OP apresentaram maior PF e GP em comparação aos alimentados com dieta CT. Frangos mantidos em EC apresentaram menor peso relativo do fígado e do intestino delgado, e menor largura da base da vilosidade (LB) no duodeno, e os frangos do tratamento OP apresentaram menor peso relativo do fígado e maior LB no duodeno. Foi observada maior atividade hepática das enzimas SOD e GPx em frangos submetidos ao EC. Na análise do perfil de proteínas expressas, foram encontradas um total de 668 proteínas no proteoma do fígado de frangos de corte alimentados com 0,60% de OP. Estas proteínas estão associadas ao metabolismo celular, metabolismo de proteínas e lipídios, sistema antioxidante, e choque térmico. Conclui-se que o OP demonstra ser um aditivo promissor na melhora do desempenho de frangos de corte, promovendo alterações positivas na morfometria duodenal, além de ser eficaz para diminuir os efeitos deletérios causados pelo estresse pelo calor. O EC foi capaz de induzir o estresse oxidativo, causando efeitos negativos sobre o desempenho e disfunção hepática em frangos de corte.PublicaçãoTese de doutorado Frequências das variantes associadas aos genes calpain e calpastatin em bovinos da raça Brahman no Brasil(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-24) Albertino, Lukas Garrido; Oliveira Filho, José Paes de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) A maciez da carne é considerada como importante componente de palatabilidade e aceitação pelo consumidor, e certos biomarcadores podem ser utilizados para identificar animais com melhor maciez, como aqueles associados ao sistema calpaína-calpastatina. Neste estudo, as frequências alélicas dos biomarcadores CAPN1-316, CAPN1-4751, CAPN3 e CAST foram analisados em reprodutores e matrizes da raça Brahman no Brasil. Um total de 108 amostras de DNA de Brahman (n=54 reprodutores e n=54 matrizes) foram utilizadas neste estudo. As amostras foram submetidas a PCR e sequenciamento direto de Sanger para determinar o genótipo dos animais e comparar as sequências e eletroferogramas com amplicons previamente determinados para a técnica ARMS-PCR. O biomarcador CAST foi o mais prevalente neste estudo, com 48% (52/108 amostras) classificadas como homozigoto A/A. Consequentemente, um protocolo e primers para a técnica de ARMS-PCR foram desenvolvidos e validados para a variante CAST. A técnica de ARMS-PCR para o gene CAST mostrou-se 100% eficiente, relativamente simples e de baixo custo na determinação do genótipo do animal. Esses resultados podem auxiliar produtores e criadores a obter produtos com melhor características de carne, contribuindo para melhor aceitação pelo consumidor e ganhos para produção.PublicaçãoTese de doutorado Avaliação nutricional e sua relação com a saúde e o bem estar de tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla Linnaeus, 1758)(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-26) Pereira, Fernanda Mara Aragão Macedo; Melchert, Alessandra ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O objetivo deste estudo foi avaliar a relação do manejo dietético sobre parâmetros físicos, clínicos e laboratoriais de tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla). Foram utilizados 43 animais, 21 de vida livre e 22 de zoológicos, com apoio do Instituto de Conservação de Animais Silvestres e zoológicos do estado de São Paulo. Foi realizada mensuração biométrica; avaliação clínica de saúde; ultrassonografia da gordura de pontos da superfície corporal e musculatura epaxial; colheita de sangue para hemograma, bioquímica sérica, dosagem de eletrólitos e minerais; e coleta de fezes para identificação da microbiota. A dieta oferecida em cativeiro e o conteúdo estomacal de animais mortos recuperados em vida livre foram encaminhados para análise bromatológica. A dieta artificial diferiu do conteúdo estomacal em energia bruta, matéria mineral, extrato etéreo e todos os minerais dosados. Os valores de hemácias, neutrófilos e monócitos foram maiores nos tamanduás cativos, e eosinófilos e basófilos foram maiores em vida livre. As dosagens séricas de albumina, alanina aminotransferase e creatinina foram mais elevadas em cativeiro, já globulina, nitrogênio ureico, cálcio e fosfatase alcalina foram maiores em vida livre. A análise biométrica e de condição corporal indicou que o peso, medidas de antebraço, tórax, abdômen, pescoço, fêmur, tíbia, úmero, e índices de condição corporal foram maiores nos animais de cativeiro. O escore de condição corporal teve boa correlação com a espessura da gordura subcutânea e circunferências de tórax e abdômen. Os tamanduás-bandeira selvagens apresentam condição corporal moderada e os cativos variaram de moderados a obesos, com acúmulo de gordura significativo na região do flanco e quadris. A diversidade da microbiota diferiu também entre animais cativos e selvagens, existindo maior abundância relativa de Ruminococcaceae, Streptococcaceae e Lachnospiraceae em vida livre; e Lachnospiraceae, Clostridiaceae 1 e Lactobacillaceae em cativeiro.PublicaçãoTese de doutorado Acesso Aberto Avaliação nutricional e escore de condição corporal em tucanuçus (Ramphastos toco, Statius Muller, 1776)(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-22) Gallo, Caroline de Cássia; Melchert, Alessandra ; Testa, Carolyne Assis Eigenheer Pinke ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O objetivo do estudo foi avaliar a ingestão de nutrientes e o aproveitamento destes em duas dietas para tucanuçus (Ramphastos toco) mantidos sob cuidados humanos, bem como a aplicação da tomografia computadorizada (TC), na determinação da gordura na cavidade celomática e a correlação com o escore de condição corporal (ECC), tempo de cativeiro, dominância e sexo. Foram estudados dez tucanuçus adultos hígidos. As dietas avaliadas foram compostas de 92% de frutos in natura e 8% de ração comercial seca (Dieta 1) e 80% de frutos, legumes e ovo cozido, acrescidos de 20% de ração comercial seca (Dieta 2). Foi realizada análise bromatológica das dietas e fezes dos animais, e determinada a ingestão alimentar, o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) dos nutrientes, e as frações digestíveis aparentes. Os resultados de energia obtidos para mostraram valores de 3.313 kcal/kg para energia metabolizável aparente (EMA) e 82% para energia bruta (CDAEB%) para Dieta 1 e EMA= 3.138 kcal/kg e CDAEB%= 75% para Dieta 2. Os CDAs da energia bruta, matéria mineral, extrativo não nitrogenado, fibra bruta e detergente neutro foram superiores para a Dieta 1, enquanto a matéria seca foi superior para a Dieta 2. Sob vigência da Dieta 2 houve melhora do escore fecal e ECC. No segundo estudo, foi avaliada a porcentagem de gordura na cavidade celomática das aves pela TC, ocorreu correlação positiva com o ECC, tempo de cativeiro e dominância, enquanto para sexo não houve correlação. Desta forma, conclui-se que o incremento com legumes, ovos e maior quantidade de ração na dieta proporcionou melhores condições de saúde. Além disso, a TC se mostrou uma importante ferramenta para mensuração de gordura celomática, permitindo maior previsibilidade na elaboração de uma dieta balanceada, proporcionando nutrição adequada e, consequentemente, bem-estar animal e qualidade de vida aos indivíduos.PublicaçãoTese de doutorado Morfologia das glândulas salivares maiores do gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-08) Farha, Aline Herrera; Schimming, Bruno Cesar ; Universidade Estadual Paulista (Unesp) O gambá-de-orelha-branca é um marsupial brasileiro oportunista e onívoro. Esta dieta onívora pode incluir frutas, insetos, néctar, ovos, e pequenos vertebrados, e até mesmo animais mortos, o que contribui significativamente para sua sobrevivência em ambientes impactados pela atividade humana. Sua preferência por frutos silvestres torna-o um importante disseminador de sementes. A frugivoria e dispersão de sementes são processos fundamentais para o meio ambiente. E esta dieta requer a ação da saliva secretada pelas glândulas salivares, pois a saliva é essencial para os processos de mastigação, deglutição e o início da digestão que ocorre na cavidade oral. Dessa maneira, o objetivo deste estudo foi descrever a morfologia das glândulas salivares maiores no gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris), o que inclui as glândulas mandibulares, parótidas e sublinguais. Para tanto, foram usados oito gambás, os quais tiveram suas glândulas salivares dissecadas em nível macroscópico. Além disso, fragmentos destas glândulas foram retirados, fixados em solução de formaldeído a 10% e destinados à rotina histológica em nível de microscopia de luz, corados com Hematoxilina e Eosina e Tricrômico de Masson. Alguns destes fragmentos foram destinados à rotina histoquímica com colorações de Ácido Periódico de Schiff (PAS), Alcian Blue (AB pH 2,5) e Ácido Periódico de Schiff associado ao Alcian Blue (PAS + AB pH 2,5). Os resultados foram comparados com relatos prévios em mamíferos metatérios e eutérios e são encontrados nos artigos no corpo deste trabalho. Acredita-se que as características morfológicas e histoquímicas encontradas estejam relacionadas principalmente com o tipo de dieta do gambá-de-orelha-branca.PublicaçãoTese de doutorado Suplementação de fitase e mio-inositol: efeitos no desempenho produtivo e saúde de tilápia-do-nilo submetida a desafio por infecção bacteriana(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-29) Rodrigues, Edgar Junio Damasceno; Barros, Margarida Maria ; Carvalho, Pedro Luiz Pucci Figueiredo de ; Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia Este estudo objetivou avaliar os efeitos da suplementação in vitro de mio-inositol (MI) no burst respiratório e proliferação de leucócitos isolados de tilápia do Nilo. Adicionalmente, foram avaliados os efeitos da suplementação dietética de MI e fitase no perfil hematológico, desempenho produtivo, parâmetros dos sistemas imune e antioxidante de tilápias-do-Nilo submetidas à desafio imunológico por infecção bacteriana. A pesquisa foi dividida em três fases distintas: ensaio in vitro, desempenho produtivo e desafio imunológico. Para a primeira fase, foram utilizados 60 juvenis com aproximadamente 60 gramas mantidos por 30 dias em 30 aquários (38L). Para a segunda fase, foram utilizados 675 juvenis com aproximadamente 14.9 gramas mantidos por 90 dias em 45 aquários (250L). Após este período foram avaliados: parâmetros zootécnicos, perfil hematológico, atividade de enzimas do sistema antioxidante e respostas imunológicas. Para a segunda fase, 192 peixes provenientes da primeira fase experimental, foram infectados por Aeromonas hydrophila e submetidos a desafio imunológico por sete dias. Posteriormente, todos os parâmetros mencionados foram reavaliados, exceto parâmetros zootécnicos. Os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, com um tratamento controle (sem suplementação), quatro níveis de quatro níveis de MI (300, 600, 900, e 1200 mg kg-1 / L-1) para os experimentos in vitro e in vivo e quatro níveis de fitase (500, 1500, 2500, e 3500 FTU kg-1). Os resultados do estudo in vitro demonstraram que a adição de 900 mg L-1 determinou aumento significativo para o burst respiratório, atividade fagocítica e proliferação de leucócitos (P<0.05) em relação à cultura celular não suplementada. Resultados semelhantes foram observados no estudo in vivo com MI. Baseado nos parâmetros de saúde e desempenho, 900 mg kg-1 foi determinado como nível ótimo de suplementação para tilápias. Considerando os efeitos no desempenho produtivo, e parâmetros de saúde avaliados, 500 FTU kg-1 foi determinado como nível ótimo de suplementação de fitase para tilápia do Nilo. Portanto, a sequência de estudos conduzidos evidencia os efeitos positivos da suplementação de MI e fitase para a espécie estudada sendo recomendada a suplementação de 900 mg kg-1 de MI ou 500 FTU kg-1 em dietas vegetais para melhorar o desempenho e aumentar a resistência da tilápia do Nilo à infecção bacteriana. Palavras-chave: imunoestimulante; capacidade antioxidante; nutrição funcional;PublicaçãoTese de doutorado Acesso Aberto Efeito de dose letal e subletal do imidaclopride no transcriptoma de abelhas Apis mellifera africanizadas(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-30) Lippi, Isabella Cristina de Castro; Orsi, Ricardo de Oliveira ; Kadri, Samir Moura A introdução de subespécies europeias e africanas no Brasil levou ao surgimento das abelhas africanizadas, que combinam alta produtividade com comportamento defensivo. As abelhas desempenham um papel crucial na polinização, essencial para a fertilização e reprodução de plantas, contribuindo para 35% da produção agrícola global. A polinização aumenta a qualidade e quantidade das culturas, movendo um setor econômico significativo. A polinização, além de sua importância econômica, é vital para a biodiversidade e a produção sustentável de alimentos. A perda de polinizadores pode trazer consequências negativas para a produção agrícola e a saúde humana, evidenciando a necessidade de práticas agrícolas sustentáveis e de proteção às abelhas. A atividade apícola é vital para a agricultura familiar, oferecendo produtos como mel, própolis, cera, e geleia real, com o Brasil se destacando como um grande produtor de mel orgânico. As abelhas enfrentam ameaças significativas de agrotóxicos, que têm efeitos letais e subletais. Esses produtos químicos, como os neonicotinoides, afetam o comportamento, desenvolvimento e saúde das abelhas, comprometendo a sobrevivência das colônias. Os neonicotinoides agem como agonistas da acetilcolina nas abelhas, causando hiperexcitabilidade e, em doses subletais, problemas comportamentais e fisiológicos. As ferramentas moleculares são fundamentais para estudar esses efeitos servir como guia para o desenvolvimento de estratégias de mitigação. O presente estudo expos as abelhas a doses letais (Ingestão:0,081 μg/abelha; Contato:0,063 μg/abelha) ou subletais (Ingestão:0.00081 μg/abelha; Contato: 0.00063 μg/abelha) de imidaclopride por ingestão ou contato e analisaram seus transcriptomas após 1 e 4 horas de exposição. Os resultados mostraram uma expressão diferencial significativa de genes associados a processos biológicos fundamentais, como o sistema imunológico, metabolismo nutricional, detoxificação, ritmo circadiano e comportamento de forrageamento. Após 1 hora de ingestão de imidaclopride, 1.516 genes (73 da dose letal; 1.509 da dose subletal) apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, enquanto após 4 horas, 758 genes (733 da dose letal; 25 da dose subletal) exibiram expressão diferencial em comparação com o controle. Após uma hora de contato com o inseticida, 49 genes apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, sendo 20 exclusivos de cada dose e 9 genes foram comuns entre os tratamentos. Considerando o período de 4 horas de contato com o inseticida, 48 genes apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, sendo 42 genes diferencialmente expressos na dose letal e 18 na dose subletal. A exposição ao imidaclopride pode afetar a função olfativa das abelhas, essencial para a polinização. Além disso, foram observadas alterações metabólicas que podem impactar o desempenho das abelhas, bem como perturbações nos ritmos circadianos, essenciais para a sobrevivência das colônias. Houve também evidências de uma resposta adaptativa ao estresse oxidativo. Esses estudos ressaltam a importância de considerar os efeitos subletais dos pesticidas e suas consequências a longo prazo para as populações de abelhas e o funcionamento dos ecossistemas. Eles fornecem insights valiosos para o desenvolvimento de políticas públicas visando o manejo sustentável de pesticidas e a preservação das abelhas, essenciais para a segurança alimentar global.PublicaçãoTese de doutorado Prejuízos causados por oestrose e helmintoses em cordeiros(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0025-06-24) Silva, Naiara Mirelly Marinho da; Amarante, Alessandro Francisco Talamini do ; Albuquerque, Ana Claudia Alexandre de ; Bassetto, César Cristiano O objetivo do estudo foi avaliar a influência do sexo e de diferentes tipos de tratamentos antiparasitários em ovinos naturalmente parasitados por Oestrus ovis e nematódeos gastrintestinais sobre os parâmetros parasitológicos, hematológicos, bioquímicos e o desempenho produtivo. Trinta e nove cordeiros (21 machos e 18 fêmeas), sem raça definida, com idades entre 4 e 5 meses, foram divididos em três grupos de tratamento: seletivo (SEL), supressivo (SUP) e supressivo + Closantel (SUPCLO). O grupo SEL recebeu tratamento antiparasitário somente quando o volume globular era ≤ 23%, enquanto os grupos SUP e SUPCLO foram tratados quatro vezes, a cada 28 dias, com SUPCLO recebendo adicionalmente Closantel. Os neutrófilos, linfócitos e basófilos variaram apenas com os dias experimentais (P<0,05). Os basófilos não foram afetados pelos efeitos dos tratamentos, sexo e dias experimentais (P>0,05). No entanto os valores de eosinófilos foram superiores (P<0,05) nos grupos SEL comparado ao SUP e SUPCLO e também foram maiores nas fêmeas em relação aos machos (P<0,05). Os valores de albumina foram menores (P<0,05) no tratamento SEL (2,45 ± 0,03) comparados aos SUP (2,60 ± 0,02) e SUPCLO (3,02 ± 0,05). Os valores de globulina foram maiores (P<0,05) nos tratamentos SEL (3,00 ± 0,06) e SUPCLO (3,02 ± 0,05) comparado ao SUP (2,84 ± 0,05). Essas duas variáveis foram superiores nos ovinos machos comparado as fêmeas (P<0,05). As variáveis proteínas totais, triglicerídeos e colesterol não foram afetadas pelo tratamento e sexo (P>0,05), mas variaram com os dias experimentais (P<0,05). Os valores de ferro não sofreram alterações por nenhum dos efeitos avaliados (P>0,05). Na recuperação dos nematódeos gastrintestinais Haemonchus contortus foi a espécie predominante, seguido por Trichostrongylus colubriformis e por último Cooperia curticei. Houve efeito significativo (P<0,05) do sexo dos animais na carga parasitária de O. ovis e na intensidade média de infecção por H. contortus e C. curticei. No caso dessas variáveis, as fêmeas apresentaram médias inferiores em comparação aos machos. O closantel apresentou elevada eficácia contra O. ovis o que resultou em valores significativamente inferiores no tratamento SUPCLO (P<0,05). Houve correlação positiva moderada para as fêmeas entre O. ovis e C. curticei (r = 0,50; P<0,05) e para os machos entre O. ovis e T. colubriformis (r = 0,58; P<0,05). Houve correlação positiva moderada para os cordeiros do grupo SUP entre O. ovis e C. curticei (r = 0,65; P<0,05) e correlação positiva forte entre C. curticei e H. contortus (r = 0,78; P <0,05). Embora os ovinos machos tenham apresentado maior suscetibilidade ao parasitismo por O. ovis e nematódeos gastrintestinais, apresentaram maior ganho em peso em comparação às fêmeas. Os diferentes tratamentos antiparasitários aplicados (seletivo, supressivo e supressivo mais closantel) propiciaram a manutenção dos valores bioquímicos e hematológicos dentro dos intervalos de referência para a espécie ovina. Apesar de não ter sido observados prejuízos notórios, a necessidade de tratamentos desnecessários pode gerar custos adicionais se contabilizados, além de favorecer a resistência principalmente nos nematódeos gastrintestinais.PublicaçãoTese de doutorado Efeito do plasma rico e pobre em plaquetas na congelação do sêmen ovino(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-25) Silva, Luan Sitó da; Oba, Eunice O plasma rico em plaquetas (PRP) é um concentrado de plaquetas com uma quantidade acima da encontrada no sangue. A utilização do PRP teve início na década de 70, inicialmente em transfusões para tratar trombocitopenia. Na medicina veterinária, destacou-se na dermatologia (tratamento de feridas), oftalmologia e medicina esportiva em equinos. Na reprodução veterinária, começou com o tratamento de endometrite crônica em éguas, levando a um aumento da recuperação embrionária e uma maior taxa de fertilidade. Também existem relatos no tratamento de endometrite bovina e em vacas repetidoras de cio. No campo da andrologia veterinária, o uso de PRP é recente. Inicialmente, foi aplicado no sêmen humano, tanto em amostras frescas como criopreservadas e, posteriormente, em caprinos e búfalos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do plasma rico em plaquetas quando adicionado ao meio diluente de criopreservação de sêmen ovino. Foram utilizados oito carneiros, em idade reprodutiva. Dois ejaculados/carneiro foram colhidos por vagina artificial. O sêmen foi avaliado por meio do sistema computadorizado de sêmen (CASA) e dividido em cinco tratamentos: Controle (diluente comercial puro – BotuBov ®); PRP10 (diluente acrescido de 10 milhões de plaquetas/mL); PRP20 (diluente acrescido de 20 milhões de plaquetas/mL); PRP40 (diluente acrescido de 40 milhões de plaquetas/mL) e PLA (diluente suplementando com plasma pobre em plaquetas- PPP, no mesmo volume do grupo PRP40). O sêmen foi congelado e após a descongelação foi avaliado novamente para os parâmetros de cinética espermática e avaliação por citometria de fluxo. O PRP e o PPP demonstraram ser seguros quando adicionados ao meio diluente para criopreservação do sêmen ovino. Foi possível observar melhorias nos parâmetros de integridade da membrana plasmática e do acrossomo (P=0,02), células mais estáveis (P=0,03) e maior produção de H2O2 (P=0,05). Conclui-se que, o PRP e o PPP são seguros, bem como alternativas viáveis para criopreservação do sêmen ovino, devido as suas atividades antioxidantes.PublicaçãoTese de doutorado Novos insights nos mecanismos da ação protetora do selênio em relação à toxicidade do mercúrio em peixes da Amazônia: estudo envolvendo estratégias metaloproteômicas(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-03) Bataglioli, Izabela da Cunha; Padilha, Pedro de Magalhães ; Moreira, Fabíola Xochilt Valdez Domingos ; FMVZ O mercúrio é um metal tóxico que se acumula ao longo da cadeia trófica, representando um risco para humanos e ecossistemas. O consumo de peixes contaminados é a principal fonte de exposição ao mercúrio (Hg) para as populações tradicionais da região Amazônica. Estudos mostram que a presença de selênio (Se) pode atenuar os efeitos deletérios do Hg no organismo humano e animal, no entanto, os mecanismos dessa ação protetora do Se ainda não foram completamente elucidados. Nesse contexto, a metalômica que tem como objetivo principal esclarecer o papel biológico de espécies metálicas e/ou metalóides que se ligam às biomoléculas e sua função no organismo poderá contribuir com novos insights para elucidar o efeito atenuante do Se em relação à toxicidade do Hg em peixes. Sendo assim, esta tese foi dividida em dois capítulos principais (Artigo 1 e 2). Artigo 1 – Reporta os resultados do estudo metalômico do Hg e Se no tecido hepático das espécies Psectrogaster amazonica (Branquinha) e Raphiodon vulpinus (Cachorra) do rio Madeira, Rondônia/Brasil utilizando a associação das técnicas de espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS) - eletroforese bidimensional (2D PAGE) - espectrometria de massas em sequência acoplada com cromatografia líquida (LC – MS/MS). Os resultados obtidos permitiram identificar cinco metal binding proteins (MBP) nos spots proteicos associadas ao Hg e Se no proteoma hepático de Psectrogaster amazonica e oito de Raphiodon vulpinus, indicando a possível formação de complexos Hg-Se na estrutura das MBP, e que a ligação com Se poderia mitigar os efeitos tóxicos do Hg. Análises de atividades das enzimas CAT (Catalase), SOD (Superóxido Dismutase), GPx (Glutationa Peroxidase), e de LPO (Lipoperoxidação de Lipídeos), demostraram não ocorrência de estresse oxidativo induzido pela concentração de Hg, o que corrobora com os dados metaloproteômicos. Artigo 2 – Reporta os resultados do estudo metalômico do Hg e Se no tecido muscular das espécies Psectrogaster amazonica (Branquinha) e Raphiodon vulpinus (Cachorra) do rio Madeira, Rondônia/Brasil utilizando a associação da técnica GFAAS com Shotgun – Espectrometria de massas em sequência acoplada com cromatografia líquida (Shotgun – LC – MS/MS). As determinações de Hg e Se por GFAAS no tecido muscular e frações proteicas permitiram o cálculo dos valores de Se para benefícios à saúde (Se HBVs). Os valores de Se HBVs foram superiores a cinco para Psectrogaster amazonica e superiores a dez para Raphiodon vulpinus, indicando que ambas as espécies de peixes possuem reservas de Se no tecido muscular necessárias para controlar os efeitos tóxicos do Hg. As análises da variação da abundância relativa de proteínas Shotgun – LC – MS/MS no proteoma muscular das duas espécies de peixes realizadas por comparação de indivíduos dos grupos com menores e maiores concentrações de Hg e Se (CHg/CSe), indicaram que 15 e 20 proteínas foram expressas apenas nos grupos com >CHg/CSe (proteínas Uniques) de tecido muscular de Psectrogaster amazonica e Raphiodon vulpinus, respectivamente. Os resultados preliminares reportados na presente pesquisa fornecem novos insights para elucidar os mecanismos complexos do efeito protetor do Se em relação à toxicidade do Hg em peixes.