Botucatu - FMVZ - Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia

URI Permanente para esta coleçãohttps://hdl.handle.net/11449/254460

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  • ItemTese de doutorado
    Avaliação nutricional e sua relação com a saúde e o bem estar de tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla Linnaeus, 1758)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-26) Pereira, Fernanda Mara Aragão Macedo ; Melchert, Alessandra ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo deste estudo foi avaliar a relação do manejo dietético sobre parâmetros físicos, clínicos e laboratoriais de tamanduás-bandeira (Myrmecophaga tridactyla). Foram utilizados 43 animais, 21 de vida livre e 22 de zoológicos, com apoio do Instituto de Conservação de Animais Silvestres e zoológicos do estado de São Paulo. Foi realizada mensuração biométrica; avaliação clínica de saúde; ultrassonografia da gordura de pontos da superfície corporal e musculatura epaxial; colheita de sangue para hemograma, bioquímica sérica, dosagem de eletrólitos e minerais; e coleta de fezes para identificação da microbiota. A dieta oferecida em cativeiro e o conteúdo estomacal de animais mortos recuperados em vida livre foram encaminhados para análise bromatológica. A dieta artificial diferiu do conteúdo estomacal em energia bruta, matéria mineral, extrato etéreo e todos os minerais dosados. Os valores de hemácias, neutrófilos e monócitos foram maiores nos tamanduás cativos, e eosinófilos e basófilos foram maiores em vida livre. As dosagens séricas de albumina, alanina aminotransferase e creatinina foram mais elevadas em cativeiro, já globulina, nitrogênio ureico, cálcio e fosfatase alcalina foram maiores em vida livre. A análise biométrica e de condição corporal indicou que o peso, medidas de antebraço, tórax, abdômen, pescoço, fêmur, tíbia, úmero, e índices de condição corporal foram maiores nos animais de cativeiro. O escore de condição corporal teve boa correlação com a espessura da gordura subcutânea e circunferências de tórax e abdômen. Os tamanduás-bandeira selvagens apresentam condição corporal moderada e os cativos variaram de moderados a obesos, com acúmulo de gordura significativo na região do flanco e quadris. A diversidade da microbiota diferiu também entre animais cativos e selvagens, existindo maior abundância relativa de Ruminococcaceae, Streptococcaceae e Lachnospiraceae em vida livre; e Lachnospiraceae, Clostridiaceae 1 e Lactobacillaceae em cativeiro.
  • ItemTese de doutorado
    Avaliação nutricional e escore de condição corporal em tucanuçus (Ramphastos toco, Statius Muller, 1776)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-22) Gallo, Caroline de Cássia ; Melchert, Alessandra ; Testa, Carolyne Assis Eigenheer Pinke ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do estudo foi avaliar a ingestão de nutrientes e o aproveitamento destes em duas dietas para tucanuçus (Ramphastos toco) mantidos sob cuidados humanos, bem como a aplicação da tomografia computadorizada (TC), na determinação da gordura na cavidade celomática e a correlação com o escore de condição corporal (ECC), tempo de cativeiro, dominância e sexo. Foram estudados dez tucanuçus adultos hígidos. As dietas avaliadas foram compostas de 92% de frutos in natura e 8% de ração comercial seca (Dieta 1) e 80% de frutos, legumes e ovo cozido, acrescidos de 20% de ração comercial seca (Dieta 2). Foi realizada análise bromatológica das dietas e fezes dos animais, e determinada a ingestão alimentar, o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) dos nutrientes, e as frações digestíveis aparentes. Os resultados de energia obtidos para mostraram valores de 3.313 kcal/kg para energia metabolizável aparente (EMA) e 82% para energia bruta (CDAEB%) para Dieta 1 e EMA= 3.138 kcal/kg e CDAEB%= 75% para Dieta 2. Os CDAs da energia bruta, matéria mineral, extrativo não nitrogenado, fibra bruta e detergente neutro foram superiores para a Dieta 1, enquanto a matéria seca foi superior para a Dieta 2. Sob vigência da Dieta 2 houve melhora do escore fecal e ECC. No segundo estudo, foi avaliada a porcentagem de gordura na cavidade celomática das aves pela TC, ocorreu correlação positiva com o ECC, tempo de cativeiro e dominância, enquanto para sexo não houve correlação. Desta forma, conclui-se que o incremento com legumes, ovos e maior quantidade de ração na dieta proporcionou melhores condições de saúde. Além disso, a TC se mostrou uma importante ferramenta para mensuração de gordura celomática, permitindo maior previsibilidade na elaboração de uma dieta balanceada, proporcionando nutrição adequada e, consequentemente, bem-estar animal e qualidade de vida aos indivíduos.
  • ItemTese de doutorado
    Morfologia das glândulas salivares maiores do gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-08-08) Farha, Aline Herrera ; Schimming, Bruno Cesar ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O gambá-de-orelha-branca é um marsupial brasileiro oportunista e onívoro. Esta dieta onívora pode incluir frutas, insetos, néctar, ovos, e pequenos vertebrados, e até mesmo animais mortos, o que contribui significativamente para sua sobrevivência em ambientes impactados pela atividade humana. Sua preferência por frutos silvestres torna-o um importante disseminador de sementes. A frugivoria e dispersão de sementes são processos fundamentais para o meio ambiente. E esta dieta requer a ação da saliva secretada pelas glândulas salivares, pois a saliva é essencial para os processos de mastigação, deglutição e o início da digestão que ocorre na cavidade oral. Dessa maneira, o objetivo deste estudo foi descrever a morfologia das glândulas salivares maiores no gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris), o que inclui as glândulas mandibulares, parótidas e sublinguais. Para tanto, foram usados oito gambás, os quais tiveram suas glândulas salivares dissecadas em nível macroscópico. Além disso, fragmentos destas glândulas foram retirados, fixados em solução de formaldeído a 10% e destinados à rotina histológica em nível de microscopia de luz, corados com Hematoxilina e Eosina e Tricrômico de Masson. Alguns destes fragmentos foram destinados à rotina histoquímica com colorações de Ácido Periódico de Schiff (PAS), Alcian Blue (AB pH 2,5) e Ácido Periódico de Schiff associado ao Alcian Blue (PAS + AB pH 2,5). Os resultados foram comparados com relatos prévios em mamíferos metatérios e eutérios e são encontrados nos artigos no corpo deste trabalho. Acredita-se que as características morfológicas e histoquímicas encontradas estejam relacionadas principalmente com o tipo de dieta do gambá-de-orelha-branca.
  • ItemTese de doutorado
    Suplementação de fitase e mio-inositol: efeitos no desempenho produtivo e saúde de tilápia-do-nilo submetida a desafio por infecção bacteriana
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-29) Rodrigues, Edgar Junio Damasceno ; Barros, Margarida Maria ; Carvalho, Pedro Luiz Pucci Figueiredo de ; Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia
    Este estudo objetivou avaliar os efeitos da suplementação in vitro de mio-inositol (MI) no burst respiratório e proliferação de leucócitos isolados de tilápia do Nilo. Adicionalmente, foram avaliados os efeitos da suplementação dietética de MI e fitase no perfil hematológico, desempenho produtivo, parâmetros dos sistemas imune e antioxidante de tilápias-do-Nilo submetidas à desafio imunológico por infecção bacteriana. A pesquisa foi dividida em três fases distintas: ensaio in vitro, desempenho produtivo e desafio imunológico. Para a primeira fase, foram utilizados 60 juvenis com aproximadamente 60 gramas mantidos por 30 dias em 30 aquários (38L). Para a segunda fase, foram utilizados 675 juvenis com aproximadamente 14.9 gramas mantidos por 90 dias em 45 aquários (250L). Após este período foram avaliados: parâmetros zootécnicos, perfil hematológico, atividade de enzimas do sistema antioxidante e respostas imunológicas. Para a segunda fase, 192 peixes provenientes da primeira fase experimental, foram infectados por Aeromonas hydrophila e submetidos a desafio imunológico por sete dias. Posteriormente, todos os parâmetros mencionados foram reavaliados, exceto parâmetros zootécnicos. Os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado, com um tratamento controle (sem suplementação), quatro níveis de quatro níveis de MI (300, 600, 900, e 1200 mg kg-1 / L-1) para os experimentos in vitro e in vivo e quatro níveis de fitase (500, 1500, 2500, e 3500 FTU kg-1). Os resultados do estudo in vitro demonstraram que a adição de 900 mg L-1 determinou aumento significativo para o burst respiratório, atividade fagocítica e proliferação de leucócitos (P<0.05) em relação à cultura celular não suplementada. Resultados semelhantes foram observados no estudo in vivo com MI. Baseado nos parâmetros de saúde e desempenho, 900 mg kg-1 foi determinado como nível ótimo de suplementação para tilápias. Considerando os efeitos no desempenho produtivo, e parâmetros de saúde avaliados, 500 FTU kg-1 foi determinado como nível ótimo de suplementação de fitase para tilápia do Nilo. Portanto, a sequência de estudos conduzidos evidencia os efeitos positivos da suplementação de MI e fitase para a espécie estudada sendo recomendada a suplementação de 900 mg kg-1 de MI ou 500 FTU kg-1 em dietas vegetais para melhorar o desempenho e aumentar a resistência da tilápia do Nilo à infecção bacteriana. Palavras-chave: imunoestimulante; capacidade antioxidante; nutrição funcional;
  • ItemTese de doutorado
    Efeito de dose letal e subletal do imidaclopride no transcriptoma de abelhas Apis mellifera africanizadas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-07-30) Lippi, Isabella Cristina de Castro ; Orsi, Ricardo de Oliveira ; Kadri, Samir Moura
    A introdução de subespécies europeias e africanas no Brasil levou ao surgimento das abelhas africanizadas, que combinam alta produtividade com comportamento defensivo. As abelhas desempenham um papel crucial na polinização, essencial para a fertilização e reprodução de plantas, contribuindo para 35% da produção agrícola global. A polinização aumenta a qualidade e quantidade das culturas, movendo um setor econômico significativo. A polinização, além de sua importância econômica, é vital para a biodiversidade e a produção sustentável de alimentos. A perda de polinizadores pode trazer consequências negativas para a produção agrícola e a saúde humana, evidenciando a necessidade de práticas agrícolas sustentáveis e de proteção às abelhas. A atividade apícola é vital para a agricultura familiar, oferecendo produtos como mel, própolis, cera, e geleia real, com o Brasil se destacando como um grande produtor de mel orgânico. As abelhas enfrentam ameaças significativas de agrotóxicos, que têm efeitos letais e subletais. Esses produtos químicos, como os neonicotinoides, afetam o comportamento, desenvolvimento e saúde das abelhas, comprometendo a sobrevivência das colônias. Os neonicotinoides agem como agonistas da acetilcolina nas abelhas, causando hiperexcitabilidade e, em doses subletais, problemas comportamentais e fisiológicos. As ferramentas moleculares são fundamentais para estudar esses efeitos servir como guia para o desenvolvimento de estratégias de mitigação. O presente estudo expos as abelhas a doses letais (Ingestão:0,081 μg/abelha; Contato:0,063 μg/abelha) ou subletais (Ingestão:0.00081 μg/abelha; Contato: 0.00063 μg/abelha) de imidaclopride por ingestão ou contato e analisaram seus transcriptomas após 1 e 4 horas de exposição. Os resultados mostraram uma expressão diferencial significativa de genes associados a processos biológicos fundamentais, como o sistema imunológico, metabolismo nutricional, detoxificação, ritmo circadiano e comportamento de forrageamento. Após 1 hora de ingestão de imidaclopride, 1.516 genes (73 da dose letal; 1.509 da dose subletal) apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, enquanto após 4 horas, 758 genes (733 da dose letal; 25 da dose subletal) exibiram expressão diferencial em comparação com o controle. Após uma hora de contato com o inseticida, 49 genes apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, sendo 20 exclusivos de cada dose e 9 genes foram comuns entre os tratamentos. Considerando o período de 4 horas de contato com o inseticida, 48 genes apresentaram expressão diferencial em comparação com o controle, sendo 42 genes diferencialmente expressos na dose letal e 18 na dose subletal. A exposição ao imidaclopride pode afetar a função olfativa das abelhas, essencial para a polinização. Além disso, foram observadas alterações metabólicas que podem impactar o desempenho das abelhas, bem como perturbações nos ritmos circadianos, essenciais para a sobrevivência das colônias. Houve também evidências de uma resposta adaptativa ao estresse oxidativo. Esses estudos ressaltam a importância de considerar os efeitos subletais dos pesticidas e suas consequências a longo prazo para as populações de abelhas e o funcionamento dos ecossistemas. Eles fornecem insights valiosos para o desenvolvimento de políticas públicas visando o manejo sustentável de pesticidas e a preservação das abelhas, essenciais para a segurança alimentar global.
  • ItemTese de doutorado
    Prejuízos causados por oestrose e helmintoses em cordeiros
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0025-06-24) Silva, Naiara Mirelly Marinho da ; Amarante, Alessandro Francisco Talamini do ; Albuquerque, Ana Claudia Alexandre de ; Bassetto, César Cristiano
    O objetivo do estudo foi avaliar a influência do sexo e de diferentes tipos de tratamentos antiparasitários em ovinos naturalmente parasitados por Oestrus ovis e nematódeos gastrintestinais sobre os parâmetros parasitológicos, hematológicos, bioquímicos e o desempenho produtivo. Trinta e nove cordeiros (21 machos e 18 fêmeas), sem raça definida, com idades entre 4 e 5 meses, foram divididos em três grupos de tratamento: seletivo (SEL), supressivo (SUP) e supressivo + Closantel (SUPCLO). O grupo SEL recebeu tratamento antiparasitário somente quando o volume globular era ≤ 23%, enquanto os grupos SUP e SUPCLO foram tratados quatro vezes, a cada 28 dias, com SUPCLO recebendo adicionalmente Closantel. Os neutrófilos, linfócitos e basófilos variaram apenas com os dias experimentais (P<0,05). Os basófilos não foram afetados pelos efeitos dos tratamentos, sexo e dias experimentais (P>0,05). No entanto os valores de eosinófilos foram superiores (P<0,05) nos grupos SEL comparado ao SUP e SUPCLO e também foram maiores nas fêmeas em relação aos machos (P<0,05). Os valores de albumina foram menores (P<0,05) no tratamento SEL (2,45 ± 0,03) comparados aos SUP (2,60 ± 0,02) e SUPCLO (3,02 ± 0,05). Os valores de globulina foram maiores (P<0,05) nos tratamentos SEL (3,00 ± 0,06) e SUPCLO (3,02 ± 0,05) comparado ao SUP (2,84 ± 0,05). Essas duas variáveis foram superiores nos ovinos machos comparado as fêmeas (P<0,05). As variáveis proteínas totais, triglicerídeos e colesterol não foram afetadas pelo tratamento e sexo (P>0,05), mas variaram com os dias experimentais (P<0,05). Os valores de ferro não sofreram alterações por nenhum dos efeitos avaliados (P>0,05). Na recuperação dos nematódeos gastrintestinais Haemonchus contortus foi a espécie predominante, seguido por Trichostrongylus colubriformis e por último Cooperia curticei. Houve efeito significativo (P<0,05) do sexo dos animais na carga parasitária de O. ovis e na intensidade média de infecção por H. contortus e C. curticei. No caso dessas variáveis, as fêmeas apresentaram médias inferiores em comparação aos machos. O closantel apresentou elevada eficácia contra O. ovis o que resultou em valores significativamente inferiores no tratamento SUPCLO (P<0,05). Houve correlação positiva moderada para as fêmeas entre O. ovis e C. curticei (r = 0,50; P<0,05) e para os machos entre O. ovis e T. colubriformis (r = 0,58; P<0,05). Houve correlação positiva moderada para os cordeiros do grupo SUP entre O. ovis e C. curticei (r = 0,65; P<0,05) e correlação positiva forte entre C. curticei e H. contortus (r = 0,78; P <0,05). Embora os ovinos machos tenham apresentado maior suscetibilidade ao parasitismo por O. ovis e nematódeos gastrintestinais, apresentaram maior ganho em peso em comparação às fêmeas. Os diferentes tratamentos antiparasitários aplicados (seletivo, supressivo e supressivo mais closantel) propiciaram a manutenção dos valores bioquímicos e hematológicos dentro dos intervalos de referência para a espécie ovina. Apesar de não ter sido observados prejuízos notórios, a necessidade de tratamentos desnecessários pode gerar custos adicionais se contabilizados, além de favorecer a resistência principalmente nos nematódeos gastrintestinais.
  • ItemTese de doutorado
    Efeito do plasma rico e pobre em plaquetas na congelação do sêmen ovino
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-25) Silva, Luan Sitó da ; Oba, Eunice
    O plasma rico em plaquetas (PRP) é um concentrado de plaquetas com uma quantidade acima da encontrada no sangue. A utilização do PRP teve início na década de 70, inicialmente em transfusões para tratar trombocitopenia. Na medicina veterinária, destacou-se na dermatologia (tratamento de feridas), oftalmologia e medicina esportiva em equinos. Na reprodução veterinária, começou com o tratamento de endometrite crônica em éguas, levando a um aumento da recuperação embrionária e uma maior taxa de fertilidade. Também existem relatos no tratamento de endometrite bovina e em vacas repetidoras de cio. No campo da andrologia veterinária, o uso de PRP é recente. Inicialmente, foi aplicado no sêmen humano, tanto em amostras frescas como criopreservadas e, posteriormente, em caprinos e búfalos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do plasma rico em plaquetas quando adicionado ao meio diluente de criopreservação de sêmen ovino. Foram utilizados oito carneiros, em idade reprodutiva. Dois ejaculados/carneiro foram colhidos por vagina artificial. O sêmen foi avaliado por meio do sistema computadorizado de sêmen (CASA) e dividido em cinco tratamentos: Controle (diluente comercial puro – BotuBov ®); PRP10 (diluente acrescido de 10 milhões de plaquetas/mL); PRP20 (diluente acrescido de 20 milhões de plaquetas/mL); PRP40 (diluente acrescido de 40 milhões de plaquetas/mL) e PLA (diluente suplementando com plasma pobre em plaquetas- PPP, no mesmo volume do grupo PRP40). O sêmen foi congelado e após a descongelação foi avaliado novamente para os parâmetros de cinética espermática e avaliação por citometria de fluxo. O PRP e o PPP demonstraram ser seguros quando adicionados ao meio diluente para criopreservação do sêmen ovino. Foi possível observar melhorias nos parâmetros de integridade da membrana plasmática e do acrossomo (P=0,02), células mais estáveis (P=0,03) e maior produção de H2O2 (P=0,05). Conclui-se que, o PRP e o PPP são seguros, bem como alternativas viáveis para criopreservação do sêmen ovino, devido as suas atividades antioxidantes.
  • ItemTese de doutorado
    Novos insights nos mecanismos da ação protetora do selênio em relação à toxicidade do mercúrio em peixes da Amazônia: estudo envolvendo estratégias metaloproteômicas
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-03) Bataglioli, Izabela da Cunha ; Padilha, Pedro de Magalhães ; Moreira, Fabíola Xochilt Valdez Domingos ; FMVZ
    O mercúrio é um metal tóxico que se acumula ao longo da cadeia trófica, representando um risco para humanos e ecossistemas. O consumo de peixes contaminados é a principal fonte de exposição ao mercúrio (Hg) para as populações tradicionais da região Amazônica. Estudos mostram que a presença de selênio (Se) pode atenuar os efeitos deletérios do Hg no organismo humano e animal, no entanto, os mecanismos dessa ação protetora do Se ainda não foram completamente elucidados. Nesse contexto, a metalômica que tem como objetivo principal esclarecer o papel biológico de espécies metálicas e/ou metalóides que se ligam às biomoléculas e sua função no organismo poderá contribuir com novos insights para elucidar o efeito atenuante do Se em relação à toxicidade do Hg em peixes. Sendo assim, esta tese foi dividida em dois capítulos principais (Artigo 1 e 2). Artigo 1 – Reporta os resultados do estudo metalômico do Hg e Se no tecido hepático das espécies Psectrogaster amazonica (Branquinha) e Raphiodon vulpinus (Cachorra) do rio Madeira, Rondônia/Brasil utilizando a associação das técnicas de espectrometria de absorção atômica em forno de grafite (GFAAS) - eletroforese bidimensional (2D PAGE) - espectrometria de massas em sequência acoplada com cromatografia líquida (LC – MS/MS). Os resultados obtidos permitiram identificar cinco metal binding proteins (MBP) nos spots proteicos associadas ao Hg e Se no proteoma hepático de Psectrogaster amazonica e oito de Raphiodon vulpinus, indicando a possível formação de complexos Hg-Se na estrutura das MBP, e que a ligação com Se poderia mitigar os efeitos tóxicos do Hg. Análises de atividades das enzimas CAT (Catalase), SOD (Superóxido Dismutase), GPx (Glutationa Peroxidase), e de LPO (Lipoperoxidação de Lipídeos), demostraram não ocorrência de estresse oxidativo induzido pela concentração de Hg, o que corrobora com os dados metaloproteômicos. Artigo 2 – Reporta os resultados do estudo metalômico do Hg e Se no tecido muscular das espécies Psectrogaster amazonica (Branquinha) e Raphiodon vulpinus (Cachorra) do rio Madeira, Rondônia/Brasil utilizando a associação da técnica GFAAS com Shotgun – Espectrometria de massas em sequência acoplada com cromatografia líquida (Shotgun – LC – MS/MS). As determinações de Hg e Se por GFAAS no tecido muscular e frações proteicas permitiram o cálculo dos valores de Se para benefícios à saúde (Se HBVs). Os valores de Se HBVs foram superiores a cinco para Psectrogaster amazonica e superiores a dez para Raphiodon vulpinus, indicando que ambas as espécies de peixes possuem reservas de Se no tecido muscular necessárias para controlar os efeitos tóxicos do Hg. As análises da variação da abundância relativa de proteínas Shotgun – LC – MS/MS no proteoma muscular das duas espécies de peixes realizadas por comparação de indivíduos dos grupos com menores e maiores concentrações de Hg e Se (CHg/CSe), indicaram que 15 e 20 proteínas foram expressas apenas nos grupos com >CHg/CSe (proteínas Uniques) de tecido muscular de Psectrogaster amazonica e Raphiodon vulpinus, respectivamente. Os resultados preliminares reportados na presente pesquisa fornecem novos insights para elucidar os mecanismos complexos do efeito protetor do Se em relação à toxicidade do Hg em peixes.
  • ItemTese de doutorado
    Análise retrospectiva da doença do disco intervertebral cervical em cães tratados com descompressão cirúrgica por fenda ventral
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-07-31) Siqueira, Emerson Gonçalves Martins de ; Rahal, Sheila Canevese
    O objetivo do presente estudo foi avaliar retrospectivamente cães com extrusão do disco intervertebral cervical, os quais foram tratados cirurgicamente pela descompressão por fenda ventral, realizada por um único cirurgião. Foram avaliados os prontuários médicos de 45 cães com massa corpórea inferior a 15 kg (10,35 ± 3,88), em um período de seis anos e oito meses. Entre os cães com raça (n=34), a maior porcentagem foi dos cães da raça Dachshund (29,4%), seguida pela Lhasa Apso (14,7%), Poodle (14,7%), Yorkshire Terrier (11,8%) e Beagle (11,8%). Havia também 24,4% (10/45) de cães sem raça definida. A idade média foi de 8,5 anos (± 3,65) e a duração média dos sinais clínicos antes da cirurgia foi de 34,16 dias (± 26,86). Na avaliação pré-operatória, todos os cães apresentavam hiperpatia cervical, sendo em três cães apenas este sinal clínico (Grau 1). Por sua vez, nove tinham tetraparesia ambulatória e 33 não ambulatória (Grau 4). Pela análise estatística, ocorreu correlação positiva moderada entre o grau de lesão medular observado no quadro clínico inicial com a deambulação pré-operatória. O diagnóstico definitivo foi efetuado por ressonância magnética (n=25), mielotomografia computadorizada (n=10), tomografia computadorizada (n=8), ressonância magnética e tomografia (n=1), e mielografia (n=1). A lesão discal foi localizada entre C2-C3 (n=15), C3-C4 (n=10), C4-C5 (n=7), C5-C6 (n=9), C6-C7 (n=2), C7-T1 (n=2). As complicações transoperatórias foram lesão do seio venoso (n=4), material discal aderido à dura-máter (n=4), respiração agônica (n=2) e lesão da artéria vertebral com óbito (n=1). As complicações pós-operatórias foram necessidade de manutenção em ventilação mecânica (n=1), piora da ataxia (n=2), piora da hiperpatia cervical (n=2) e infecção superficial do sítio cirúrgico (n=4), com uma eutanásia decorrente de lesão do seio venoso. Outros três animais vieram ao óbito ou foram submetidos à eutanásia por alterações não relacionadas à técnica cirúrgica. Aos 90 dias de pós-operatório, 36 animais tinham Grau 0 (normal) e três Grau 2. Conclui-se que cães com menos de 15 kg tratados pela descompressão por fenda ventral apresentam uma taxa de sucesso de 95,2%, considerando-se apenas as complicações associadas ao procedimento cirúrgico.
  • ItemTese de doutorado
    Efeitos de Quillaja Saponaria, Yucca Schidigera e Saccharomyces Cerevisiae no desempenho produtivo e saúde de tilápias-do-nilo (Oreochromis Niloticus) submetidas a diferentes tipos de estresse
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-03-15) Guimarães, Matheus Gardim ; Barros, Margarida Maria ; Carvalho, Pedro Luiz Pucci Figueiredo de
    Com a expansão contínua da aquicultura e a adoção dos sistemas intensivos de produção, têm sido observado aumento da exposição dos peixes à fatores estressores, uso indiscriminado de antimicrobianos e comprometimento da saúde, o que pode resultar em perdas econômicas significativas. O uso errôneo de antimicrobianos pode afetar negativamente o ambiente além de selecionar agentes patogênicos resistentes. Na tentativa de contornar tais fatores, produtores buscam alternativas, sendo que os aditivos nutricionais se destacam. Desta forma, a utilização de aditivos eubióticos surge como alternativa promissora para promover o desempenho produtivo, resistência a manejos indispensáveis e respostas imunológicas dos peixes, além de permitir a redução no uso de antimicrobianos. Sendo assim, esta pesquisa teve como objetivos avaliar os efeitos da suplementação dietética de Quillaja saponaria, Yucca schidigera e Saccharomyces cerevisiae no desempenho produtivo, morfometria intestinal, digestibilidade, perfil antioxidante, respostas hematológicas e imunológicas de tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus) submetidas a três desafios: estresse por classificação de tamanho, infeção por Streptococcus agalactiae, e infeção por Streptococcus agalactiae + 12 horas de hipóxia. Desta forma, a pesquisa foi dividida em três estudos. No primeiro estudo foi avaliada a digestibilidade das rações. Para tal foram utilizados 216 tilápias-do-Nilo machos (~ 80g) distribuídos em 12 tanques (18 peixes/tanque) e alimentados com quatro dietas experimentais (dieta de controle, dieta suplementada com extrato de Quillaja saponaria + Yucca schidigera, dieta suplementada com Saccharomyces cerevisiae e a combinação de ambos) para coleta de fezes durante período de 9 dias e, posteriormente, cálculado o coeficiente de digestibilidade aparente. Para o segundo estudo, 600 tilápias-do-Nilo machos (~ 8,9 g) foram distribuídos aleatoriamente em 40 tanques de 250 L (15 peixes/tanque) e alimentados com as mesmas dietas anteriormente mencionadas, durante o período de 60 dias. Posteriormente, foram avaliados o desempenho produtivo, a composição bromatológica da carcaça e a morfometria intestinal. Além desses parâmetros foi analisado o perfil hematológico, resposta imune inata, atividade de enzimas do sistema antioxidante e parâmetros bioquímicos. Para tal, foram coletados sangue de dez peixes por tratamento. Os dados obtidos foram considerados antes dos desafios. Também após aos 60 dias, no terceiro estudo, grupos foram submetidos a diferentes tipos de estresse: um grupo de 60 peixes foi submetido a estresse por classificação de tamanho, outro grupo de 72 peixes a infeção por Streptococcus agalactiae (BAC) (15 dias) e, um outro grupo de 136 peixes, a infeção por Streptococcus agalactiae + 12 horas de hipóxia (BAC + HP) (15 dias). Após os desafios, as análises de perfil hematológico, resposta imune inata, atividade de enzimas do sistema antioxidante e parâmetros bioquímicos foram novamente realizadas, para gerar comparativo com o período sem desafio. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Tukey e do teste t. As diferenças foram consideradas estatisticamente significativas quando P < 0,05. Os peixes arraçoados com dietas suplementadas não apresentaram diferenças significativas no desempenho e apresentaram efeitos limitados nos coeficientes de digestibilidade aparente dos nutrientes e da energia. As dietas suplementadas com extrato de Quillaja saponaria + Yucca schidigera apresentaram maior nível de conteúdo fenólico, capacidade antioxidante e maior sobrevivência após BAC e BAC + HP, e a combinação de Quillaja saponaria, Yucca schidigera e Saccharomyces cerevisiae, o menor. A suplementação de Saccharomyces cerevisiae melhorou o comprimento das vilosidades do intestino médio e promoveu menor sobrevivência após BAC e BAC + HP. Os peixes alimentados com dietas suplementadas com Saccharomyces cerevisiae apresentaram melhores respostas imunitárias inata e capacidade antioxidante após desafios. Os resultados deste estudo sugerem que a suplementação dietética com Saccharomyces cerevisiae determinou melhores resultados gerais para saúde, mas não foi suficiente para evitar a mortalidade por infecção bacteriana. Além disso, mais estudos são necessários para validar a combinação de aditivos eubióticos a base de Quillaja saponaria, Yucca schidigera, Saccharomyces cerevisiae e suas combinações na nutrição dos peixes.
  • ItemTese de doutorado
    Estudo neuroanatômico do encéfalo em ovinos e dinâmica educacional imaginológica
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-01-31) Moraes, Alessandra Regina Dhom Pimentel ; Machado, Vânia Maria de Vasconcelos
    Além da importância econômica e da disponibilidade de espécimes para estudos, os ovinos (Ovis aries) têm se destacado como modelos experimentais ideais para pesquisas de neuroimagem, devido às semelhanças anatômicas e fisiológicas do encéfalo ovino comparado ao encéfalo humano. O presente estudo teve como objetivo realizar a avaliação neuroanatômica pela ressonância magnética (RM) e tomografia computadorizada (TC) do encéfalo em ovinos, comparando os achados de imagem com cortes de peças anatômicas das mesmas regiões avaliadas pela neuroimagem, adicionalmente, verificar a aplicabilidade desse material para dinâmica educacional imaginológica. Foram realizadas imagens por RM e TC de crânios de ovinos post mortem e estudo anatômico seccional. Para obtenção das imagens de RM, foram realizadas sequências ponderadas em Spin Eco T1 e Spin Eco T2, STIR e FLAIR nos planos axial, sagital e dorsal. Para o exame de TC, as imagens foram obtidas em cortes de 1 a 3 milímetros, nos planos axial e reconstrução multiplanar. A utilização de imagens por ressonância magnética e tomografia computadorizada da região crânioencefálica do ovino, comparadas com peças anatômicas, oferece uma avaliação minuciosa do encéfalo dessa espécie. As imagens de RM e TC e das peças foram compiladas e foi realizada a identificação das principais estruturas neuroanatômicas visibilizadas nas modalidades de imagem e associadas ao estudo de anatomia seccional. Foram apresentadas as imagens de RM, TC e das estruturas neuroanatômicas macroscópicas seguidas de um exercício a alunos de graduação de medicina veterinária para verificar a aplicabilidade do presente estudo como forma complementar para o ensino de neuroanatomia visando avaliar a percepção dos alunos sobre o impacto da inclusão do material de diagnóstico por imagem avançado em comparação à neuroanatomia seccional em peças anatômicas na adaptação do material didático. Foi empregada análise qui-quadrado para comparar os grupos distintos das duas faculdades participantes, assim como para diferenciar entre os alunos que já concluíram a disciplina de diagnóstico por imagem e aqueles que ainda estão cursando. Os resultados dessas análises foram então apresentados em formato tabular e em gráficos. Os estudantes perceberam o diagnóstico por imagem avançado como uma adição valiosa, que estabeleceu conexões claras com a neuroanatomia do encéfalo de ovinos, ampliando a compreensão dos benefícios de sua aplicação. A inclusão desses recursos didáticos de neuroanatomia em conjunto com imagens tomográficas e de ressonância magnética pode aprimorar e contribuir para estudos tanto em medicina veterinária quanto humana
  • ItemTese de doutorado
    Efeitos da inclusão de produtos da agroindústria na qualidade da silagem de gramíneas e no desempenho de ruminantes
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 0001-03-24) Barbosa, Cristiane Rebouças ; Costa, Ciniro ; Meirelles, Paulo Roberto de Lima ; Torres, Rodrigo de Nazaré Santos
    O uso de subprodutos agroindustriais (BP) em silagem de gramíneas (GS) visa não apenas reduzir custos de produção, mas também atender às preocupações ambientais, não competir com a alimentação humana e promover a sustentabilidade na produção de alimentos para animais. Contudo, há contradições sobre seus efeitos na qualidade da silagem e no desempenho animal. No artigo I, avaliou-se por meio da abordagem meta-analítica os efeitos da inclusão de BP sobre o padrão de fermentação de GS. Bem como, o efeito da inclusão de GS com BP (GS-BP) em dieta sobre o desempenho de ovinos. Foram criados dois bancos de dados sendo o primeiro para avaliar o efeito da inclusão de BP sobre a qualidade da silagem de capim (conjunto de dados composto por 37 estudos com 179 médias de tratamento); O segundo banco de dados foi utilizado para avaliar o efeito da GS e da GS-BP no desempenho de ovinos (conjunto de dados composto por 7 estudos com 23 médias de tratamento). Sendo avaliado pela diferença de médias ponderadas (WMD) entre o grupo controle (Dataset 1 =GS sem adição de BP; Dataset 2 = dietas com GS) e o grupo tratamento (Dataset 1= DGS (GS sem adição de BP; Dataset 2 = DGS-BP (dietas com GS-BP). A adição de BP em GS reduziu o pH (P <,0001), N-NH3 (MS; P <,0001), acetato (P = 0,002) e o butirato (P = 0,028) e, aumentou a concentração de ácido lático (P <,0001) e a contagem de bactérias ácido lácticas (P <,0001). O tipo de BP e o momento de colheita da GS foram as principais covariáveis que influenciaram o efeito da inclusão de BP sobre as características fermentativas da silagem. O capim-elefante e a polpa cítrica foram a gramínea (87,7%) e o subproduto (aproximadamente 12%) mais utilizado na produção de silagem. Os silos experimentais foram os mais utilizados (84,91%) em relação aos silos em escala agrícola (15,09%), que impactaram apenas, na menor concentração de acetato na silagem, em silos experimentais. A DGS-BP para ovinos aumentou o consumo de proteína bruta (P <,0001) e fibra em detergente neutro (P = 0,001), digestibilidade de nutriente digestíveis total (P = 0,006) e peso de carcaça (P = 0,023). As principais covariáveis que influenciaram as respostas da DGS-BP foram o tipo de BP e o tempo de armazenamento. O artigo II, consistiu na avaliação dos efeitos da idade de colheita de capim-elefante BRS Capiaçu e a inclusão de polpa cítrica peletizada (PCP) sobre a qualidade da silagem, desempenho e análise econômica das silagens na alimentação de touros Nelores confinados. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2x5, sendo duas idades de colheita (90 e 120 dias) e cinco níveis de inclusão de PCP (0, 3, 6, 12 e 24%, base na matéria verde) da forragem de Capiaçu ensilada. O teor de matéria seca (MS) aumentou com o período de rebrota (P <0,01) e obteve resposta quadrática (P = 0,001) com os níveis de inclusão de PCP. Houve redução no teor de proteína bruta em função da idade de colheita (P = 0,021) e à inclusão de PCP nas silagens (P = 0,014). Os nutrientes digestíveis totais reduziram com o avanço da idade de colheita do Capiaçu (P = 0,011), enquanto aumentaram linearmente com a inclusão dos níveis de PCP nas silagens (P <,0001). A digestibilidade in vitro da MS aumentou linearmente com a inclusão da PCP (P <,0001) e com o avanço da idade de colheita (P <,0001). O pH das silagens aumentou (P = 0,042) com o avanço da idade do Capiaçu e teve resposta quadrática com a adição de PCP (P <,0001). As concentrações de N-NH3 reduziram linearmente com a adição de PCP (P <,0001) e à idade de colheita do capim. O aumento da idade de colheita do Capiaçu proporcionou aumento no teor de MS e nos valores de pH, com redução na produção por efluentes das silagens. A inclusão de PCP em até 24% na matéria fresca no momento da ensilagem do Capiaçu melhora o perfil fermentativo e o valor nutritivo das silagens, aumentando os teores de MS, NDT e os valores de pH, reduzindo a fração fibrosa e melhorando os parâmetros de digestibilidade. Com base na análise de desempenho e de custo de produção das dietas experimentais, silagem de Capiaçu ensilado aos 120 dias contendo 12% de PCP pode viabilizar desempenho satisfatório e dietas mais econômicas para a terminação de touros Nelore em confinamento.
  • ItemTese de doutorado
    Frequência alélica da variante dmrt3 g.22999655c>a (equcab2.0) em asininos e muares com marcha batida ou picada
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-08-11) Herman, Mariana ; Oliveira Filho, José Paes de ; Borges, Alexandre Secorun ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    The DMRT3:g.22999655C>A SNP influences the gait types of horses, and the wild-C and mutant-A alleles have been associated with batida and picada gaits, respectively. Donkeys and mules also have batida or picada gaits, and this study aimed to determine the allele frequency of the DMRT3 SNP in gaited donkeys and mules and to verify whether the genotype influences the type of gait in these animals. Thus, 159-mules and 203-donkeys were genotyped. Among the 159 mules assessed, 47% had a CC genotype, and 53% had a CA genotype. The CC genotype was predominant in the donkeys (97%). The AA genotype was not found in the mules or donkeys. The CC and CA genotypes were similarly distributed in the mule group with batida or picada gaits. The frequencies of the CC genotype in the donkeys were similar, regardless of whether the gait was batida or picada. However, the CA genotype was more frequent in donkeys with a picada gait than in those with a batida gait. The previous description of the three genotypes in Mangalarga and Campolina horses, which are the main breeds involved in the production of marching mules in Brazil, explains the higher percentage of CA mules and the very low presence of the mutated allele in donkeys, allowing us to speculate that the mutated allele was inherited from the mares used in the crosses with donkeys. In addition, these results suggest that the gait is not influenced by the aforementioned mutation and that other genes and polymorphisms may influence the trait in equids.
  • ItemTese de doutorado
    Técnica de masquelet em defeito ósseo segmentar do rádio em coelhos com emprego do biovidro bioativo F18
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-07-14) Silva Júnior, José Ivaldo de Siqueira ; Rahal, Sheila Canevese ; Souza, Marina Trevelin de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do estudo foi avaliar a capacidade do Biovidro F18, como um substituto do cimento ósseo no desenvolvimento da membrana induzida pela técnica de Masquelet em defeito ósseo segmentar do rádio, tendo o coelho como modelo experimental. Foram empregados 10 coelhos adultos, fêmeas, da raça Norfolk, com massa corporal média de 4 kg. Os animais foram divididos por ensaio randomizado em dois grupos de cinco indivíduos, conforme os momentos de observação no período pós-operatório (Grupo 1 = 21 dias, Grupo 2 = 42 dias). Promoveu-se falha óssea segmentar (1,0 cm de comprimento) no rádio, direito e esquerdo, a qual foi preenchida com “putty” de biovidro F18. Pelo exame radiográfico, o biomaterial mostrou-se no pós-operatório imediato como uma estrutura radiopaca bem delimitada, com densidade próxima ao tecido ósseo. Aos 21 e 42 dias de pós-operatório notou-se redução da radiopacidade e do volume visibilizado do biomaterial, com dispersão de partículas na região de falha segmentar. Pela análise histológica, a membrana induzida foi verificada em todos os animais, sendo composta predominantemente de tecido fibrocolagenoso; matrizes condroides e osteoide em processo de regeneração; densamente vascularizada; e com presença de reação tipo corpo estranho, composta por macrófagos e células gigantes multinucleadas. Conclui-se que o biovidro F18 mostrou resposta inflamatória do tipo corpo estranho, com desenvolvimento de membrana induzida sem capacidade de expansão para realização do segundo estágio da técnica de Masquelet.
  • ItemTese de doutorado
    Influência das fontes e inclusões de cobre, zinco e manganês no desempenho, rendimento de carcaça e perfil de metaloproteínas em frangos de corte
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-08-18) Contin Neto, Armando Carlos ; Pezzato, Antonio Celso ; Padilha, Pedro de Magalhães ; Stringhini, José Henrique ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A suplementação de microminerais é indispensável para atender as exigências de frangos de corte. Cobre, Zinco e Manganês desempenham uma série de funções bioquímicas que permitem o bom funcionamento do organismo animal, garantindo suporte estrutural, fisiológico, regulatório e catalítico. Porém nem todas as fontes de microminerais disponíveis comercialmente apresentam características que favoreçam sua absorção. Os hidroximenerais (HCM) representam a terceira geração da suplementação mineral devido suas características químicas diferenciadas das fontes usuais que trazem benefícios sobre os parâmetros de desempenho e saúde das aves. Diversas pesquisas já foram conduzidas a fim de elucidar o efeito das fontes e níveis de microminerais sobre os parâmetros zootécnicos, status de saúde e bem-estar de frangos de corte. No entanto, nenhum estudo avaliou os efeitos das diferentes fontes e níveis de Cu, Zn e Mn sobre o metabolismo de metaloproteínas em frangos de corte. Esta pesquisa corresponde ao estudo de desempenho zootécnico e estudo proteômico de tecido hepático e plasmático de frangos de corte, divididos em três capítulos principais, respectivamente. Capítulo II – O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o efeito de diferentes fontes (hidroxicloreto e sulfato) e diferentes níveis de Cobre, Zinco e Manganês sobre o desempenho de frangos de corte, rendimento de partes de carcaça, bem como avaliar o potencial antimicrobiano do Cobre. Foram utilizados 1080 pintos de um dia de idade (COBB 500), distribuídos em quatro tratamentos experimentais: Controle + (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma sulfato + 50 ppm de avilamicina), Controle – (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma sulfato), Baixo HCM (15 ppm Cu, 40 ppm Zn e 40 ppm Mn na forma hidroxicloretos), Alto HCM (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma hidroxicloreto). As avaliações de desempenho foram feitas semanalmente e no 42º dia de criação três aves foram escolhidas ao acaso para avaliação do rendimento de partes. A avaliação de desempenho e rendimento de partes demonstrou que os hidroxicloretos apresentam o mesmo resultado que a fonte sulfato mesmo com adição de aditivo promotor. A suplementação de minerais na forma hidroxicloretos podem ser feitas em 50% do nível recomendado pelos guias nutricionais. Desse modo, é possível dispensar o uso de promotor de crescimento e suplementar Cu, Zn e Mn em 50% abaixo do recomendado quando usado as fontes hidroxicloretos. Capítulo III – O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o proteoma plasmático de frangos de corte suplementados com diferentes fontes e níveis de Cobre, Zinco e Manganês, utilizando ferramentas metaloproteômicas. Foram considerados três tratamentos: Sulf Controle (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma sulfato), Baixo HCM (15 ppm Cu, 40 ppm Zn e 40 ppm Mn na forma hidroxicloretos) e HCM Controle (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma hidroxicloreto). Para a pesquisa, foram feitos três pools de plasma de 9 aves/tratamento no 42º dia de idade. Os pools foram submetidos aos procedimentos de extração proteica para obtenção do proteoma e posterior caracterização, identificação dos níveis funcionais, via metabólicas e interações das proteínas associadas com os minerais estudados. A análise proteômica demonstrou indução de proteínas associadas com sistema imune e o crescimento celular (IGLL1 – imunoglobulina lambda cadeia leve e cadeia pesada e RC3H1 – Ring finger and CCCH-type domains 1), proteínas envolvidas no metabolismo do oxigênio (HBE e HBG2 – hemoglobina subunidade alfa e hemoglobina subunidade beta) e transporte de nutrientes (RBP4 – retinol binding protein 4), sugerindo envolvimento dessas proteínas com os minerais estudados e a chance de serem possíveis biomarcadores. Capítulo IV – O objetivo dessa pesquisa foi avaliar o proteoma hepático de frangos de corte suplementados com diferentes fontes e níveis de Cobre, Zinco e Manganês utilizando ferramentas metaloproteômicas. Foram considerados três tratamentos (Sulf Controle (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma sulfato), Baixo HCM (15 ppm Cu, 40 ppm Zn e 40 ppm Mn na forma hidroxicloretos) e HCM Controle (15 ppm Cu, 80 ppm Zn e 80 ppm Mn na forma hidroxicloreto). Para a pesquisa foram feitos três pools de fígado de 9 aves/tratamento, no 42º dia de idade. Os pools foram submetidos aos procedimentos de extração proteica para obtenção do proteoma e posteriormente caracterização, identificação dos níveis funcionais, via metabólicas e interações das proteínas associadas com os minerais estudados. A análise proteômica demonstrou indução de proteínas associadas os processos biológicos e componente celular, com funções de transporte de nutrientes e produção de energia como a ALDOB (frusctose biphosfate aldolase B) e ATP Sintetase Subunidade β (ATP5b), respectivamente, sugerindo envolvimento dessas proteínas com os minerais estudados e a chance de serem possíveis biomarcadores.
  • ItemTese de doutorado
    Tumor do estroma gastrintestinal canino: perfil gênico e alvos preditivos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-30) Nóbrega, Juliano ; Amorim, Renée Laufer ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    Os tumores do estroma gastrintestinal representam 1% das neoplasias que acometem o trato gastrintestinal dos seres humanos. Apesar de raros, são os tumores de origem mesenquimal mais frequentes em cães também, sendo o diagnóstico baseado na marcação imuno-histoquímica das proteínas CD117 (KIT) e DOG1. As terapias convencionais não são totalmente eficazes para alguns subtipos tumorais. Portanto, o reposicionamento de drogas é uma abordagem promissora que maximiza o potencial terapêutico de medicamentos existentes e que pode acelerar o processo de desenvolvimento de novos tratamentos para o câncer. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil global de expressão gênica do GIST canino, informações inéditas na literatura, e a partir desses dados, identificar novos compostos terapêuticos para estes tumores. Para tal, foram utilizadas sete amostras de GIST intestinal canino FFPE (formalin-fixed, parafin-embedded), comparadas com cinco amostras de intestino normal de cães. Utilizaram-se o GeneChip® Canine Gene 1.0 ST Arrays (Thermo Fisher Scientific, CA, EUA) e o software Transcriptome Analysis Console 4.0.2.15 (Thermo Fisher Scientific). Foram encontrados 109 genes up regulated e 252 down regulated envolvidos em vias como regulação da migração celular e da proliferação da população celular. A partir da plataforma LINCS L1000FWD obtivemos os agonistas dos receptores de glicocorticóides como um dos potenciais grupos de fármacos de reversão da assinatura gênica dos GISTs caninos. Este estudo contribui para o desenvolvimento de novas terapias e para uma melhor compreensão dessa neoplasia nos cães, um bom modelo natural para estudos em oncologia comparada.
  • ItemTese de doutorado
    Estudo dos genes RAD51 e BRCA2 como alvos preditivos em carcinoma inflamatório mamário de cadelas, análise da expressão do RAD51 e quantificação molecular em linhagens celulares neoplásicas de cães
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-02) Teodoro, Tamires Goneli Wichert ; Amorim, Renée Laufer ; Alves, Carlos Eduardo Fonseca ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    As neoplasias de glândula mamária estão entre as neoplasias mais comuns em humanos e cães sendo que, nas cadelas, aproximadamente 53,3% são malignas. Variantes de tumores mamários malignos em cadelas, assim como em humanos, podem ter origem em mutações genéticas. Em humanos é estimado que 45 a 65% das mulheres com mutações no gene BRCA2 podem desenvolver algum tipo de neoplasia maligna de mama aos 70-80 anos. Em cães, diversas variações nas repetições de BRC já foram identificadas em tumores mamários. Dentre os diversos tipos de carcinoma mamário em cães o carcinoma inflamatório mamário se caracteriza como entidade clinicopatológica com curso clínico fulminante e manifestação repentina. Em humanos e em cães o carcinoma inflamatório mamário é também considerado uma forma agressiva de câncer de mama. Baseado nas semelhanças clínicas e histológicas tem sido proposto que o carcinoma mamário inflamatório de cadelas seja utilizado como modelo de estudo para humanos. Este trabalho visa caracterizar, pela técnica de imuno-histoquímica, a expressão das proteínas BRCA2 e RAD51 em amostras de carcinomas inflamatórios mamários caninos, comparando-as com glândulas mamárias caninas sem lesão e com adenomas mamários, a fim de estabelecer essas proteínas como alvos preditivos. Também foram realizados a técnica da PCR e o sequenciamento do gene BRCA2 para a identificação de possíveis mutações nestas amostras e assim associar os dados das imunoexpressões com possíveis mutações encontradas. Abundância da expressão de moléculas RAD51 foi observada por Western-Blotting em diferentes linhagens celulares tumorais caninas, auxiliando no entendimento desta proteína em cães
  • ItemTese de doutorado
    Citocinas pró-inflamatórias em cães com doença renal crônica em síndrome urêmica submetidos à hemodiálise intermitente com e sem bypass
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-08-16) Maia, Suellen Rodrigues ; Okamoto, Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    A hemodiálise intermitente (HDI) tornou-se uma terapia viável e acessível no manejo de cães que apresentam nefropatias agudas e crônicas. No entanto, a avaliação de citocinas pró-inflamatórias, potencialmente derivadas dessa terapia, permanece pouco elucidada. Objetivou-se avaliar a dinâmica das citocinas pró-inflamatórias (IL-1β, IL-6 e TFN-α) em cães doentes renais crônicos em síndrome urêmica submetidos a abordagens distintas de HDI (com e sem bypass). Oito cães com doença renal crônica (DRC) em síndrome urêmica foram selecionados e alocados em dois grupos: HDI sem bypass (GHSB) e HDI com bypass (GHCB). Quatro cães saudáveis compuseram o grupo controle (GC). Avaliações laboratoriais foram realizadas previamente, durante e após a primeira sessão de HDI. Análises comparativas entre cada grupo e momento de avaliação foram aplicadas, assim como, comparação global das citocinas (mediana de todos os resultados obtidos) entre os grupos. Não houve alterações significativas das citocinas estudadas entre os momentos de avaliação dos grupos de cães submetidos à HDI. A concentração de IL-1β foi maior após a sessão no GHSB em comparação com o GC. A comparação da concentração global revelou concentração mais alta de IL-1β e do TNF-α nos grupos com DRC quando comparado com o GC, sendo que o GHSB também apresentou valor mais alto da IL-6. Concentrações mais altas de IL-1β e IL-6 também foram observadas no GHSB em comparação com o GHCB. Os animais submetidos à HDI, independente do grupo, apresentaram menor valor de ureia e creatinina após o procedimento, assim como, melhora da condição de acidemia. Os dados relacionados à sessão demonstraram que ambas as abordagens foram eficazes e seguras. Em conclusão, uma única sessão de HDI, sem ou com bypass, não incrementou as concentrações de citocinas pró-inflamatórias em cães com doença renal crônica, no entanto, contribuiu para a manutenção do estado inflamatório, além disso, cães submetidos à HDI sem bypass demostraram concentrações maiores das citocinas estudadas.
  • ItemTese de doutorado
    Gradiente de densidade coloidal equipure™ utilizado pré e pós criopreservação de sêmen equino
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-06-26) Pereira, Raiza Rocha ; Dell'Aqua Junior, José Antonio ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O objetivo do trabalho foi verificar a qualidade espermática após utilização de um protocolo modificado de EquiPureTM antes e depois da criopreservação do sêmen equino. Experimento 1, foram utilizadas coletas de 15 garanhões (n=26). Quatro grupos experimentais foram formados: Controle (centrifugação convencional); EG (centrifugação com EquiPureTM antes do congelamento); CT+EG (centrifugação com EquiPureTM após o sêmen ser descongelado); EG+EG (centrifugação com EquiPureTM antes e depois do sêmen ser congelado). No experimento 2 foram realizados testes de fertilidade com os grupos experimentais: controle (centrifugação convencional); EG (centrifugação com EquiPureTM antes do congelamento); CT+EG (centrifugação com EquiPureTM após o sêmen ser descongelado); EG+EG (centrifugação com EquiPureTM antes e depois do sêmen ser congelado) utilizando quatro ciclos de 8 éguas (n=32) e um garanhão considerado “Bad freezing”. As inseminações foram feitas após a ovulação, mediante deposição profunda do sêmen no corno uterino ipsilateral ao lado da ovulação. Para as inseminações oito palhetas foram descongeladas em banho maria a 37°C por 30 segundos com uma concentração de 100 milhões de espermatozoides por palhetas. Os grupos CT e EG tiveram uma dose fixa de 800 milhões de espermatozoides. A dose inseminante dos grupos CT+EG e EG+EG foram dependentes da recuperação espermática pós-centrifugação (v:v) pós descongelamento com EquiPureTM. Os parâmetros espermáticos analisados foram a cinética espermática (motilidade total, progressiva e espermatozoides rápidos) pela análise computadorizada do movimento espermático e estabilidade da membrana plasmática, geração de O2- mitocondrial, potencial mitocondrial e peroxidação lipídica por citometria de fluxo. As análises espermáticas dos grupos Controle e EG foram analisadas imediatamente após descongelação 37ºC por 30 segundos (M0). Os grupos CT+EG e EG+EG foram analisados logo após o procedimento de centrifugação (M0). Todos os grupos foram analisados pós-incubação a 37ºC por 60 minutos (M60). No M0 (P<0,05) o grupo EG+EG aumentou a motilidade total, motilidade progressiva, rápidos, potencial de membrana mitocondrial e estabilidade da membrana plasmática comparada com os outros grupos avaliados; O grupo CT+EG aumentou os parâmetros de rápidos, estabilidade da membrana plasmática, potencial de membrana mitocondrial e diminuiu a produção de ânion superóxido, em relação aos grupos controle e EG. Pós-incubação a 37ºC por 60 minutos(M60) o grupo EG+EG aumentou os parâmetros de motilidade total e motilidade progressiva, rápidos, alto potencial de membrana mitocondrial, e diminui a produção de O 2- comparado com outros grupos. O grupo EG teve diferença do grupo controle na motilidade progressiva e espermatozoides rápidos. O grupo CT+EG diferiu do controle na motilidade total e progressiva, rápidos e peroxidação lipídica. O grupo CT+EG diferiu do EG na motilidade progressiva e espermatozoides rápidos. Controle, EG e CT+EG não diferiram com relação ao alto potencial de membrana mitocondrial e produção de O2- . Os grupos não diferiram na estabilidade da membrana plasmática. As taxas de recuperação dos espermatozoides foram menores nos grupos CT+EG e EG+EG (34,9±2,2; 30,1±1,5, respectivamente). A taxa de fertilidade por ciclo foi maior no grupo EG+EG (62,5%, 5/8) quando comparada aos demais grupos CT, EG, CT+EG (25% 2/8; 25% 2/8; 25% 2/8, respectivamente) os outros grupos testados não tiveram diferença. Concluiu-se, que a utilização de EquiPureTM aumenta a cinética espermática pós-descongelamento do sêmen equino, e que selecionar os espermatozoides antes da criopreservação e pós descongelamento pode aumentar a taxa de prenhez de garanhão considerado “bad freezing”.
  • ItemTese de doutorado
    Nutrição e etologia de macacos-prego (Sapajus sp.) mantidos sob cuidados humanos
    (Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-07-03) Silva, Maira Beatriz Gandolfi ; Melchert, Alessandra ; Testa, Carolyne Assis Eigenheer Pinke ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
    O estudo teve como objetivo determinar a composição nutricional, digestibilidade aparente e aproveitamento das dietas oferecidas a um grupo de 13 macacos-prego (Sapajus sp.), bem como, analisar a condição corporal e comportamento desses animais mantidos sob cuidados humanos. O primeiro estudo foi realizado com 4 machos e 7 fêmeas de Sapajus sp., determinando-se o Escore de Condição Corporal (ECC) e Escore de Massa Muscular (EMM). Amostras de sangue foram colhidas para perfil hepático, lipídico e renal, além da avaliação de albumina, cálcio e fósforo. Foram realizados ensaios de digestibilidade aparente (DA), avaliando matéria seca (MS), proteína bruta (PB), matéria mineral (MM), fibra bruta (FB), extrato etéreo (EE) e energia bruta (EB), utilizando amostras da dieta e o método de coleta total de fezes. Foi observado altos coeficientes de DA de PB e EE, entretanto com baixa DA para MM e FB. O ECC apresentou correlação positiva com EMM e triglicérides séricos, e o EMM com a albumina, cálcio e triglicérides. No segundo estudo foi feita uma análise comportamental, utilizando registros pelo método Animal Focal e Varredura (Scan sampling) para identificar a existência de uma hierarquia de dominância no grupo e sua influência na alimentação dos mesmos. Diferentes tipos de enriquecimento ambiental foram realizados e avaliados por meio da frequência de ocorrência de comportamentos relacionados à alimentação, interações agonísticas, afiliativas e possíveis indicativos de estresse. No terceiro estudo foi elaborada uma escala de condição corporal específica para macacos-prego (Sapajus sp.) avaliando 24 animais oriundos do atendimento. O último estudo determinou as preferências alimentares do grupo de 13 macacos-prego mantidos no CEMPAS, a partir de uma dieta mista de ingredientes a qual demonstraram maior interesse por alimentos calóricos. Em conclusão, a digestibilidade da dieta ofertada ao grupo apresentou valores que demonstraram um eficiente aproveitamento, com maior dificuldade na digestão de fibras. Também, foi possível identificar a existência de hierarquia, que influenciava na alimentação e na participação dos subordinados nos enriquecimentos ambientais. O manejo com diversos tipos de enriquecimentos do tipo alimentar promoveu diminuição dos comportamentos indicativos de estresse e agonísticos, além de incentivar o forrageio e interação entre os membros do grupo. O ECC elaborado para a espécie se tornou útil para determinar o estado nutricional dos indivíduos. Quanto às preferências alimentares, a banana foi a principal escolha dos animais.