São Vicente - IBCLP - Instituto de Biociências

URI Permanente para esta coleçãohttps://hdl.handle.net/11449/254506

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Efeitos das nanopartículas de prata micogênicas e da combinação de nanopartículas de grafeno e cádmio sobre o metabolismo e a atividade de natação de Geophagus brasiliensis.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-11-21) Hanamulamba, Pinto Leonidio ; Barbieri, Edison ; INAGBE Angola ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A nanotecnologia tem desempenhado um papel crucial na modernização e, em alguns casos, na transformação de diversos setores tecnológicos e industriais. Contudo, o avanço dessas aplicações acarreta riscos ambientais, especialmente relacionados às etapas de produção e descarte de nanomateriais. Isso sublinha a urgência de desenvolver diretrizes específicas, protocolos experimentais rigorosos e projetos de estudo voltados para a pesquisa ambiental desses materiais, dado que as propriedades únicas dos materiais em nanoescala representam desafios significativos na avaliação toxicológica. A complexidade dos ambientes aquáticos e a coexposição de poluentes, considerando suas características físicas e químicas, indicam que as misturas de contaminantes podem causar impactos mais severos do que os metais isolados. Por esse motivo, ainda existem lacunas significativas no conhecimento sobre as interações e os mecanismos de toxicidade combinada de GO e Cd em organismos aquáticos. Investigar os efeitos toxicológicos da exposição única e da coexposição aguda de nanomateriais à base de grafeno e cádmio no metabolismo de rotina da espécie neotropical Geophagus brasiliensis, com foco no consumo de oxigênio e na excreção de amônia foi o objetivo central do estudo. A avaliação foi realizada após a exposição única dos peixes a diferentes concentrações de GO (1, 2,5, 5 e 10 mg/L) e de Cd (0,1, 0,5, 1 e 2 mg/L) e após exposição combinada de Cd + GO nas concentrações (0,1, 0,5, 1 e 2 mg/L de Cd + 1 mg/L de GO), durante quatro distintos períodos, 24, 48, 72 e 96 horas. Experimentos conduzidos em doze (12) grupos, cada um com N=5 indivíduos, incluindo três (3) grupos controle. Os peixes foram mantidos a umatemperatura de 22,5 (±0,5) °C, com comprimento e peso médios de 4,1 (±0,24) cm e 1,24 (±0,32) g. Mediu-se o metabolismo de rotina por meio do consumo de oxigênio utilizando o método de Winkler e a excreção de amônia (NH3) pelo método de Nessler. Os dados foram submetidos à análise estatística com teste paramétrico One-way-ANOVA, seguido pelo teste de comparações de Tukey, com intervalo de confiança p < 0,05 e teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e pelo teste de Dunn para detalhar as diferenças entre o grupo controle e asconcentrações estudadas. Não houve morte de nenhum dos espécimes. Para os grupos exposto em GO, em relação ao consumo específico de oxigénio, registou-se uma ligeira diminuição em todas as concentrações após 24 e 48 horas de exposição, mas sem diferenças em relação ao controle, após 72h houve um aumento, exceto na concentração de 2,5 mg/L e para os indivíduos exposto por 96h, houve uma tendência de diminuição das duas concentrações mais baixas e um aumento nas demais concentrações, com destaque na mais alta, 10 mg/L que foi de 83% em relação controle. Em relação a excreção específica da amônia, houve uma ligeira diminuição dos indivíduos expostos na concentração mais baixa e um aumento para os indivíduos expostos nas três maiores concentrações, isso no período de 24h, e para os espécimes expostos por 48, 72 e 96h, se registou uma diminuição de excreção muito acentuada em todas as concentrações, atingindo os 78% e com diferença em relação controle, para todos os grupos exceto o da concentração mais baixo exposto por 48h. Para os espécimes expostos ao Cd, referente ao consumo de oxigênio, houve uma tendência de aumento de consumo em todas as concentrações nas exposições de 24, 48 e 72h, exceto na mais baixa por 24 e 72h e uma diminuição acentuada na exposição de 96h em todas as concentrações e com diferenças em relação ao controle. Para excreção da amônia, houve uma diminuição clara e muito acentuada em todos os grupos expostos à todas as concentrações e períodos, tendo atingido os 96%, todos com diferenças em relação ao controle. Os grupos da exposição combinada de Cd + GO, em relação ao consumo de oxigênio, houve uma tendência de aumento acentuado do consumo nas primeiras 24h para todos os grupos e com realce aos das maiores concentrações (1 e 2 mg/L), que atingiram os 135% e 217%, e uma diminuição de consumo com diferenças em todos os grupos expostos nos períodos de 48, 72 e 96h em comparação ao controle. Para a excreção da amônia na coexposição, os resultados mostraram claramente a tendência de diminuição de excreção para todos os grupos expostos e em todas as concentrações estudadas e tempo de exposição, chagando aos 98% e todas com diferenças significativas em relação ao controle. Concluiu-se que, para a espécie G. brasiliensis, o GO, o Cd e a exposição combinada do Cd + GO causam alterações no metabolismo de rotina, está última demostrou ter efeito mais tóxico. No entanto a exposição combinada entre o metal pesado Cd e o nanomaterial GO, afetou claramente o metabolismo de rotina dos peixes, onde ao fator dependente do aumento das concentrações do metal e tempo de exposição foram registadas baixas muito acentuadas em relação ao consumo oxigênio e da excreção amônia. G. brasiliensis, pode de certa forma ser um excelente bioindicador de contaminantes aquáticos. Esses dados ressaltam a necessidade de mais, estudos, conhecimento e sobre potenciais interações de nanomateriais com contaminantes existentes nos ecossistemas aquáticos e ao mesmo tempo oferece insights valiosos para uma análise crítica, definição dos padrões e avaliação criteriosa dos efeitos isolados e combinados dos NMs e MPs para uma melhor gestão preservação de ecossistemas aquáticos.
Relação da salinidade com as densidades de bactérias indicadoras de contaminação fecal e de bactérias autótones do Rio Itanhaém - SP
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-10) Ballesteros, Eliete Rodrigues ; Fernandes, Ana Julia ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os estuários marinhos urbanos são frequentemente impactados por contaminação microbiológica de diversas origens como esgotos doméstico, industriais, compostos orgânicos e inorgânicos. Este estudo utilizou o estuário marinho urbano tropical do rio Itanhaém para comparar às densidades das Bactérias Indicadoras Fecais (FIB) em diferentes gradientes de salinidade. A Escherichia coli exibiu densidades acima da legislação (CONAMA 274/00) em 89% dos pontos de coleta, enquanto que Enterococcus sp exibiu densidades restritivas em 69% dos pontos de coleta indicando elevado grau de contaminação e potenciais riscos à saúde pública associados à utilização do rio para fins recreacionais entre outros. As densidades de Escherichia coli foram superiores às densidades de Enterococcus sp mesmo em águas salobras e salinas durante todas as campanhas. Os resultados obtidos indicam a possibilidade de que a Escherichia coli seja melhor indicadora de contaminação por esgotos domésticos, inclusive para águas salobras e salinas. As análises da comunidade bacteriana autóctone foram realizadas usando o Gene 16S rRNA do (eDNA) DNA ambiental com a técnica (NGS) Next Generation Sequencing nos 3 diferentes gradientes de salinidade Doce, Salobra e Salgada, gerando 34.977sequências com dominância do Filo Proteobactéria. Na água doce além da Proteobacteriatambém foram identificados os Filos Actinobactéria e Bacteroidete. As análises comparativas em nível de espécie demonstraram diferenças entre as espécies provenientes de águas salobras e salgadas e as espécies de água continentais, sendo as maiores diversidades obtidas em águas salobras e salinas. Os resultados obtidos nesse estudo demonstrou que a Escherichia coli é a melhor Indicadora Fecal tanto em água doce como em água salobra e os métodos moleculares são poderosas ferramentas para analisar a diversidade das comunidades bacterianas em nível de espécie nos diferentes gradientes de salinidades.
Contaminação ambiental por poluentes emergentes no sistema estuarino de São Vicente – SP e os efeitos da acidificação oceânica em ostras Crassostrea brasiliana expostas a benzoilecgonina
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-09-23) Ortega, Andressa dos Santos Barbosa ; Pereira, Camilo Dias Seabra ; Maranho, Luciane Alves ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A presença intensa e contínua de contaminantes emergentes no ambiente pode representar um risco para organismos não-alvo. Isso pode ser agravado pela acidificação oceânica, resultante da diminuição do pH dos oceanos devido à absorção aumentada de CO2. A cocaína e seu principal metabolito humano, a benzoylecgonina (BE), são relevantes para estudos de ecotoxicologia devido à sua detecção em várias matrizes ambientais, particularmente em ecossistemas aquáticos. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo identificar e quantificar poluentes emergentes no Sistema Estuarino Santos – São Vicente (SSVES), um ambiente costeiro impactado por assentamentos desordenados e pelo lançamento de efluentes domésticos não tratados no sistema aquático. Além disso, o estudo visou avaliar os efeitos subletais da benzoylecgonina na ostra Crassostrea brasiliana e avaliar os impactos adversos da exposição multigeracional ao principal metabolito da cocaína no microcrustáceo Daphnia magna. Amostras de água superficial, sedimentos e ostras foram coletadas no SSVES e na Baía de São Vicente, e analisadas por LC/MS-MS. Um total de 33 substâncias foram investigadas. C. brasiliana foi exposta à benzoylecgonina (0,02, 0,2 e 2 μg.L-1) sob diferentes cenários de pH (7,7, 7,3 e 6,9), e análises de biomarcadores foram realizadas, incluindo TRCVN, atividade de GST, concentração de GSH, atividade de ChE, danos em DNA e LPO. D. magna foi exposta a BE (0,05 e 0,5 μg.L-1) ao longo de quatro gerações. Cafeína, carbamazepina, orfenadrina, losartana, valsartana, cocaína e benzoylecgonina foram detectadas em amostras de água superficial. A cocaína foi detectada em sedimentos e ostras. Mudanças biológicas significativas em C. brasiliana foram observadas tanto em cenários naturais quanto acidificados. Respostas integradas de biomarcadores (Integrated Biomarker Responses – IBRv2i) revelaram que organismos expostos a BE em cenários de acidificação são mais vulneráveis do que aqueles expostos à benzoylecgonina sob pH natural. A exposição multigeracional a BE em D. magna levou a alterações no conteúdo calórico, padrões de natação, taxas de crescimento e sucesso reprodutivo. Nossos achados indicaram que a exposição em estágios iniciais de desenvolvimento, ao longo de várias gerações, pode causar desequilíbrios nas gerações futuras, impactando a estabilidade populacional. Com isso, concluímos que há a necessidade de monitorar contaminantes emergentes no ambiente e seus potenciais efeitos em organismos aquáticos. A vulnerabilidade aumentada em cenários de acidificação oceânica evidencia a relevância de ações mitigadoras para a proteção da biodiversidade e da saúde dos ecossistemas costeiros. A exposição multigeracional à benzoilecgonina levou a alterações significativas no desenvolvimento de D. magna, ressaltando a importância de considerar os impactos a longo prazo a partir de fases iniciais do desenvolvimento.
Metagenoma e avaliação da expressão de proteínas do intestino de Poecillia reticulata em resposta a contaminação ambiental por antibióticos.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-06) Marinsek, Gabriela Pustiglione ; Oliveira, Marcos Antônio de ; Mari, Renata de Britto
A crescente descarga de xenobióticos em ambientes aquáticos tem levantado preocupações significativas devido aos potenciais efeitos adversos que esses compostos podem causar nos ecossistemas. Entre eles, os antibióticos são particularmente preocupantes, pois interrompem inúmeras vias fisiológicas em organismos aquáticos, potencialmente levando a danos celulares, teciduais e em órgãos. O monitoramento da qualidade dos ecossistemas e o estudo dos efeitos desses compostos em organismos geralmente se concentram em órgãos-alvo, como brânquias e fígado, que respondem direta ou indiretamente aos contaminantes. No entanto, a microbiota intestinal, que interage diretamente com contaminantes através da camada mucosa do trato gastrointestinal, também é um alvo crítico nesses processos. Estudos metagenômicos recentes mostraram que a exposição a antibióticos pode causar açterações na composição desta comunidade, impactando em sua interação com o hospedeiro via sistemas nervoso entérico e central. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos tóxicos da azitromicina em espécies de peixes não-alvo, Poecilia reticulata. Avaliamos o impacto em órgãos-alvo ecotoxicológicos, como fígado e brânquias, bem como os efeitos na microbiota intestinal e na homeostase intestinal geral. Nossas descobertas indicam que a azitromicina pode induzir dano histopatológico significativo em órgãos-alvo e prejudicar mecanismos de defesa antioxidante. Mais notavelmente, ela altera a composição da microbiota, levando a problemas de absorção e inflamação no do trato gastrointestinal.
Impactos da educação ambiental marinha e costeira nas políticas educacionais do Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-05-22) Sampaio, Cristiane Ramon ; Ottoni, Cristiane Angélica ; Abessa, Denis Moledo de Souza
A consciência ecológica está associada ao conceito de responsabilidade social frente à natureza. Incorporada a esta temática, a Educação Ambiental (EA) promove o processo de formação de cidadãos justos, críticos que integram conhecimentos teóricos e ressignificam suas ações sociais, dentre elas, a prática ambiental. Muito embora sejam descritas aquisições, construções e reconstruções de conhecimentos associados a EA em ambientes não formais e informais, o ambiente formal é majoritariamente o local no qual a maioria dos alunos do Ensino Básico adquirem conhecimentos que integram o conhecimento teórico e prático. Diante deste fato, a Base Nacional Comum Curricular (BNCC) tem como um dos objetivos nortear um conjunto de ações pedagógicas que viabilizem a incorporação de diferentes temas contemporâneos transversais, incluindo o Meio Ambiente e, consequentemente a EA, nos livros didáticos (LD). Ao que se refere EA associada ao ambiente marinho e costeiro (EAMC), os LD brasileiros possuem uma abordagem mais ampla em comparação a outros países, contudo, são ainda insuficientes. Diante deste contexto, foi selecionada e avaliada a presença de conteúdos associados a EAMC por meio de uma abordagem quali-quantitativa uma coleção de LD pertencente ao Programa Nacional do Livro e do Material Didáticos (PNLD) de 2022, utilizada no Fundamental II (EFII) de uma Escola Estadual da cidade de São Vicente. A análise quantitativa do LD foi desenvolvida identificando a frequência dos temas associados à EAMC, enquanto a análise qualitativa focou na forma como o tema foi abordado. De acordo com os resultados obtidos, o único tema presente nos LD de todos os anos que compõem o EFII foi o plástico. De modo geral, os temas são apresentados em sua maioria na forma de texto com imagens ilustrativas.
Diagnóstico da atividade pesqueira do Arquipélago de Fernando de Noronha/PE: sugestões para o manejo
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2024-06-14) Zeineddine, Gabriela Campos ; Vaske Júnior, Teodoro
Artisanal fishing exerts significant influence in several locations in Brazil, including the Northeast and the Archipelago of Fernando de Noronha-PE. Despite the worldwide social and economic importance of fishing being imminent, this activity is also a major source of disturbances in the marine environment, making fisheries management and planning actions essential for resource conservation and activity sustainability. Due to the lack of existing data regarding fishing categories developed in Fernando de Noronha, as well as current fishing statistics that support its planning, this work aims to diagnose current fishing practices and suggest management alternatives based on the local fishing reality, with ways to make conservation and local fisheries management compatible. The data for this research were collected within the scope of fishing management carried out by ICMBio Noronha through fishing monitoring, fishing monitoring plans, and participatory fishing diagnosis meetings held with the management body and the local community. Currently, there are 94 fishermen in Fernando de Noronha, of which 35 carry out fishing activities on the beaches and 59 on boats. The fishing fleet is composed of 46 vessels, of which 27 carry out fishing activities, fishing tourism, and tours, and 19 are exclusively for fishing. Local fishing activity falls into three fishing categories: professional fishing, subsistence fishing, and amateur fishing. There is also fishing tourism, a tourist activity that interfaces between professional and amateur fishing. Despite the fishing fleet being small and fishing being restrictive in terms of richness, it was possible to observe seasonal patterns in catches, with autumn being the most productive season due to climatic factors. The geographical issues of fishing spots also have a direct influence on the composition and abundance of fishing production, demonstrating different behaviors for small and medium-sized vessels, which occupy spaces more or less distant from the island of Fernando de Noronha. The main current social need is the valorization of traditional fishing and the reestablishment of its pillars, such as strengthening the fishing class, unity among fishermen, and incentives for awareness programs and appreciation of fish and traditional culture, as well as active participation of the fishing community in management decision making. This study is expected to support decision-making for island fisheries management, as well as new research related to the topic.
Paleoecologia da megafauna terrestre e marinha pleistocênica do sul do Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-09-12) Carrasco, Thayara Silveira ; Buchmann, Francisco Sekiguchi de Carvalho e
O Pleistoceno foi uma época geológica caracterizada pela sucessão de ciclos glaciais e interglaciais. Esses ciclos ocasionavam o recuo e avanço do nível do mar, respectivamente, ora expondo a plataforma continental e ora submergindo-a. Em consequência do avanço/retração do ambiente terrestre/marinho, a Planície Costeira do Rio Grande do Sul abriga depósitos fossilíferos submersos, que datam do Pleistoceno Médio-Superior, associados à ambos os ambientes. Atualmente, fósseis de mamíferos terrestres e marinhos, objetos de estudo da presente tese, são transportados pela ação das ondas e podem ser encontrados ex situ na zona de varrido das praias da região, principalmente da Praia dos Concheiros. Fósseis de mamíferos terrestres estão associados aos períodos glaciais e análises isotópicas de carbono (δ13C) e oxigênio (δ18O) de tais espécimes revelaram que estes habitavam campos, corroborando com reconstruções ambientais baseadas em palinologia. O clima, que provavelmente era frio e sazonal, favorecia o desenvolvimento de plantas C3, especialmente gramíneas. Diante disso, a transição do Pleistoceno-Holoceno pode ter sido prejudicial à sobrevivência dos grandes herbívoros, devido ao estabelecimento de um clima mais quente e úmido que, associado a outros fatores, culminou na extinção da megafauna terrestre. A fauna de mamíferos marinhos do Pleistoceno, por outro lado, parece ter sido similar à atual. Com o desenvolvimento da presente tese, foram identificados fósseis de rorquais (Balaenoptera sp.), baleias-francas (Eubalaenasp.), delfinídeos (Delphinidae) e toninhas (Pontoporia blainvillei). Porém, a diversidade reportada para o Pleistoceno é subestimada e mais esforços devem ser realizados para a identificação da fauna passada. Entre os táxons de baleias e golfinhos presentes no registro fóssil da Planície Costeira do Rio Grande do Sul, a toninha é a mais abundante, fornecendo uma oportunidade única de estudar a ecologia dessa espécie ao longo do tempo geológico. A comparação entre espécimes atuais e fósseis evidenciou que o nicho isotópico da toninha (δ13C vs. δ18O) era maior durante o Pleistoceno, devido aos valores de δ13C mais amplos em fósseis. Os valores de δ18O, em contrapartida, foram mais amplos em toninhas atuais. Essas diferenças podem ser atribuídas a mudanças nas comunidades de peixes, com uma maior diversidade de presas pelágicas no passado, além de um maior fluxo de água doce e mudanças de salinidade na costa atual. Resultados que podem refletir também o impacto antrópico sobre os ecossistemas costeiros – empobrecimento das comunidades devido à sobrepesca.
Biogeografia das espécies invasoras da herpetofauna: influência de dispersores artificiais e fatores ambientais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-24) Parreira, Caroline Nunes ; Nunes, Ivan Sergio ; Vasconcelos, Tiago da Silveira ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
The colonization of invasive species can impact biodiversity, human well-being, health and the economy. For a species to become invasive, it must overcome biogeographical, physiological and biotic filters, therefore, the understanding of distribution patterns of introduced species is essential to support studies and preventive measures regarding the advance of bioinvasions. The present study aimed to estimate the areas of climatic suitability in Brazil, of the introduced herpetofauna species with high expansion potential, the anuran Eleutherodactylus johnstonei (Amphibia, Eleutherodactylidae) and the lizard Anolis porcatus (Reptilia, Dactyloidae), to evaluate the possible niche overlap with phylogenetically related species that are native to Brazil, and to verify which Brazilian ports are more susceptible to the introduction of Anolis porcatus, a species introduced due maritime trade. The species disitribution models (SDMs) showed that the bioclimatic variables related to temperature had the highest contributions in the model of Anolis porcatus and precipitation had the highest contributions in the model of Eleutherodactylus johnstonei, demonstrating the relationship between the distribution and the habits and characteristics of each of their respective groups. The areas where the exotic populations of these two species occur in Brazil are located in areas of minimum and low climatic suitability, according to the results of SDM. However, Anolis porcatus is rapidly expanding its distribution under these conditions, and its colonization may be more effective and accelerated when that species finds areas of higher climatic suitability. The area of endemicity results identified endemism areas of native species that overlap the areas of climatic suitability of Anolis porcatus and Eleutherodactylus johnstonei obtained with the SDM, suggesting possible future niche overlaps. The present study also found that ports of Salvador, Rio de Janeiro, Santos and Itapoá are more susceptible to new introductions of Anolis porcatus due maritime trades. Both introduced species can expand their distribution to areas where there are phylogenetically close native species and species with similar habits, and there may occur impacts on native species, which demonstrates the importance of studies about the biological interactions of these species, in addition to efforts to obtain a higher knowledge of its areas of occurrence. For Anolis porcatus, the importance of studies in port areas and its surroundings is highlighted, besides the implementation of measures within the scope of port management to prevent new introductions.
Além das medições convencionais: avaliação de efeitos tóxicos em danio rerio e corbicula fluminea associados a águas e sedimentos contaminados por rejeitos de mineração liberados após o acidente com a barragem de fundão no rio doce (ES-MG)
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-31) Pauly, Guacira de Figueiredo Eufrasio ; Abessa, Denis Moledo de Souza ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O rompimento da barragem do Fundão, de responsabilidade da Samarco/BHP, na tarde do dia 5 de novembro de 2015, liberou mais de 50 milhões de m³ de rejeitos de mineração de ferro, tendo sido considerado o maior desastre ambiental da história do Brasil até então. Dados iniciais obtidos por diversos estudos indicaram aumento imediato nos níveis de metais em águas e sedimentos na Bacia do Rio Doce, mas contraditórios, no que diz respeito aos efeitos de toxicidade aguda e crônica para alguns modelos clássicos, sendo então necessário avaliar os efeitos a partir de níveis biológicos menores, capazes de responder a exposições mais sutis. O presente estudo teve como objetivo geral avaliar efeitos biológicos associados à contaminação da água e dos sedimentos da Bacia do Rio Doce na área afetada pelo rompimento da barragem do Fundão (MG), a fim de gerar dados sobre os efeitos agudos, crônicos e subcrônicos decorrentes da contaminação por metais, estimando assim potenciais riscos ecológicos. Para isso, amostras de água e sedimentos foram coletadas em diferentes períodos após o desastre, e analisadas quimicamente, bem como os índices geoquímicos e de enriquecimento foram calculados. Concomitantemente, foram realizados ensaios com neonatos de Daphnia similis ou D. magna, em amostras de água e sedimento (interface sedimento-água), onde 5 organismos foram colocados em 4 réplicas de cada amostra, e expostos por 48h, sob condições controladas, sendo então contados os sobreviventes. Na segunda etapa do estudo, organismos adultos de Corbicula fluminea, foram coletados no Rio Ribeira de Iguape (SP), aclimatados em laboratório, e expostos aos sedimentos. Em cada réplica, contendo cerca de 4 cm de sedimento e cerca de 1 L de água de diluição, foram introduzidos 10 organismos. O sistema-teste foi mantido a 25°C e fotoperíodo de 12:12 (claro-escuro), sob aeração. Após 14 dias, os organismos foram sacrificados e as partes moles foram removidas. Foram realizadas análises de bioacumulação de metais, com cálculo do fator de bioacumulação (BAF), bem como analisados os biomarcadores glutationa reduzida (GSH), glutationa-S-transferase (GST), glutationa peroxidase (GPx), lipoperoxidação (LPO), danos em DNA, atividade de acetilcolinesterase (AChE) e metalotioneína (MT). Por fim, foram realizados ensaios de toxicidade crônica com embriões da espécie Danio rerio, expostos às amostras de água. Após a obtenção dos ovos fecundados, estes foram transferidos para microplacas de 24 poços com capacidade de 2 ml contendo as amostras de água, e observados a cada 24 horas em microscópio eletrônico, verificando-se a coagulação, pigmentação do corpo e dos olhos, formação de somitos, desprendimento da 17 cauda, eclosão e letalidade. Os resultados obtidos revelaram altos níveis de metais em água e sedimentos em amostras coletadas imediatamente ao colapso da barragem, com redução das concentrações ao longo do tempo. Os índices geoquímicos demonstraram ausência de contaminação ou contaminação moderada, com altos índices de enriquecimento de Mn no alto rio Doce, de acordo com os valores de EF. Foi observada toxicidade ocasional em Daphnia ssp., porém não correlacionada com os metais medidos. Foi observada bioacumulação importante (BAF>1) para Zn em C. fluminea, porém os efeitos causados na biota quanto ao estudo de biomarcadores não foram relacionados diretamente pela contaminação do rejeito de mineração sobre os ecossistemas. Apesar das concentrações de metais acima da legislação, não foi observada diferença estatística significativa com relação ao controle para a sobrevivência ou outros efeitos negativos nos embriões de D. rerio expostos às amostras de água coletadas ao longo da BRD. Os resultados obtidos sugerem, portanto, baixa biodisponibilidade dos metais liberados pelos rejeitos, ao menos nos ambientes dulciaquícolas.
Caracterização do perfil e atividade biológica de peptídeos de cavalo marinho Hippocampus reidi
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-03-17) Correa, Claudia Neves ; Castro, Leandro Mantovani de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A biodiversidade encontrada no ambiente marinho e a sua diversidade química é uma fonte ilimitada para a bioprospecção de substâncias com potencial para o desenvolvimento de novos fármacos. O cavalo marinho é um peixe teleósteo, reconhecido na Medicina Tradicional Chinesa por possuir propriedades medicinais. Nos últimos anos, o uso de metodologias específicas em modelos experimentais e linhagens celulares revelaram a presença de um conjunto de peptídeos provenientes do metabolismo intracelular e que podem atuar na comunicação celular. Neste contexto o objetivo deste trabalho foi caracterizar o perfil de peptídeos naturais encontrados em tecidos de cavalo marinho Hippocampus reidi, através de um protocolo de rápida inativação da proteólise pelo calor e espectrometria de massas, além de uma investigação inicial da atividade biológica de algumas sequências identificadas através de um ensaio para verificar um efeito antioxidante. Os resultados obtidos durante o desenvolvimento deste estudo são apresentados em três capítulos. No capítulo 1, a análise do peptidoma de brânquias permitiu a identificação de 1080 peptídeos em brânquias. Os fragmentos variaram de 5 a 38 aminoácidos e a principal localização subcelular da proteína precursora foi o citoplasma (58%) seguido pelo núcleo (22%) e mitocôndria (5%). Fragmentos N e C-terminal foram 18% e 15% respectivamente, resultados semelhantes a outros estudos de peptidoma. O mais frequente resíduo de aminoácido na posição N-terminal foi alanina, seguido por serina, na posição P1 o resíduo de aminoácido mais encontrado foi arginina, seguido por lisina. Entre as proteínas precursoras com maior número de peptídeos identificados estão proteínas ribossomais, histona e hemoglobina cadeia alfa. Fragmentos de Moronecidin-like, descrito como peptídeo antimicrobiano, também foram identificados em todas as amostras de brânquias analisadas. Análises de predição revelaram peptídeos com características importantes de peptídeos antimicrobianos. No capítulo 2, um ensaio de atividade antioxidante foi realizado para dois peptídeos identificados. Os peptídeos CNC1 e CNC2 não atingiram 50% de inibição de radicais com 30 minutos de reação no ensaio de DPPH, com 24 horas de reação o peptideos CNC1 atingiu 69,61% de inibição de radicais na concentração de 100 µM. No capítulo 3 é apresentado um protocolo de marcação isotópica para realização de peptidômica quantitativa. A caracterização realizada neste estudo abre novas perspectivas para investigação do potencial terapêutico de peptídeos naturais.
Avaliação do potencial de biorremediação de diesel S10 e de espuma para controle de incêndio (AFFF) por bactérias heterotróficas isoladas de sedimentos do Estuário de Santos - SP
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2023-02-01) Chinellato, Roberta Alves Merguizo ; Oliveira, Ana Julia Fernandes de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A utilização de petróleo como principal recurso energético é um dos fatores que contribuem para o aumento de acidentes com produtos petroquímicos, incluindo incêndios de grandes proporções, causando graves danos ambientais. A dificuldade no combate a incêndios envolvendo hidrocarbonetos com compostos comuns levou ao uso de espumas especiais para o controle de incêndio, as AFFF (Aqueous Film-Forming Foam), sendo entretanto, também prejudiciais ao ambiente e seus organismos. A biorremediação emerge como um processo simples e de baixo custo quando comparado a outras alternativas, além se ser menos agressiva e a mais adequada para manutenção do equilíbrio ecológico. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial de cepas ambientais das espécies Bacillus subtilis e Bacillus licheniformis em biodegradar diesel S10 e substâncias presentes na espuma para combate a incêndios (AFFF), em sedimento de áreas costeiras. A avaliação de biodegradação dos contaminantes, foi realizada por meio de teste com 2,6 diclorofenol-indofenol (DCPIP), respirometria de Bartha e Pramer e da análise química do contaminante por Cromatografia Gasosa Acoplada à Espectrometria de Massas (CG/MS). Os resultados obtidos mostraram a capacidade das cepas bacterianas em biodegradar substâncias presentes no diesel e na AFFF, tanto de forma isolada quanto em consórcio bacteriano. A concentração de carbonos (C) biodegradados (µmol) de AFF (6%) com o consórcio foi de 7,32E±03, enquanto que, para o diesel S10 (2,5%) a concentração de C biodegradados (µmol) foi de 1,55E±04. Após a biodegradação de Bartha e Pramer, os resultados apresentam uma degradação de até 6x da concentração inicial, a análise de CG/MS apresentou mudanças no perfil cromatográfico do diesel, demonstrando uma degradação dos compostos, principalmente do perfil cromatográficos dos BTEX (Benzeno, Tolueno, Etilbenzeno e O-Xileno), na [2,5%] nota-se que o benzeno foi totalmente degradado. Os resultados destacaram a importância da utilização de cepas ambientais na biorremediação, propiciando a diminuição do período adaptativo e uma rápida ação de biorremediação dos ambientes contaminados. O presente trabalho demonstrou que as cepas selecionadas são eficientes em remediar a contaminação por estes tipos de compostos, tendo grande potencial para estudos futuros que permitam sua utilização em outros compostos comerciais.
Avaliação e aprimoramento dos dados pesqueiros de elasmobrânquios no litoral sul de São Paulo, sudeste do Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-10-19) Santos, Paulo Roberto Santos dos ; Garrone-Neto, Domingos ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A baixa qualidade dos boletins de pesca, ausência completa de dados para alguns anos ou áreas e o distanciamento entre aqueles que monitoram a pesca com aqueles que vivem dela, são dois dos principais desafios a serem superados no aprimoramento da gestão de pesca de elasmobrânquios no Brasil. A utilização do conhecimento ecológico local (CEL) dos integrantes das comunidades pesqueiras e o conhecimento científico (CC) de pesquisadores no monitoramento da pesca, é uma boa estratégia para auxiliar nessa questão. No presente trabalho, com base em ações desenvolvidas em uma área considerada hotspot de biodiversidade e que apresenta um dos monitoramentos pesqueiros mais antigos do Brasil, foi estruturada uma sequência de capítulos para testar a hipótese que um monitoramento integrado, unindo o CEL e CC pode gerar dados mais adequados para a gestão pesqueira. Os três primeiros capítulos foram produzidos para se estabelecer um panorama real entre as três vertentes de dados utilizados, o CC histórico e contemporâneo, CEL e o monitoramento pesqueiro clássico (MPC). No capítulo 1, já publicado, verificou-se que a área de estudo, mesmo com uma lacuna de 40 anos na produção de estudos direcionados à biodiversidade de elasmobrânquios, apresenta o registro de 62 espécies (36 tubarões e 26 raias). No capítulo 2, identificou-se um rico histórico pesqueiro revelado pelo CEL dos pescadores, com boa capacidade de identificação de alguns grupos de espécies e descrição dos eventos relacionados a pesca de tubarões e raias, incluindo mais uma espécie de tubarão registrada. No capítulo 3, após uma avaliação da qualidade taxonômica e a participação de categorias de pesca de diferentes níveis taxonômicos, identificou-se que as informações obtidas para a elaboração dos capítulos 1 e 2 não estão refletidas nos boletins de pesca oficiais, onde menos de 20% das espécies que são consideradas recursos pesqueiros estão representadas e mais de 90% das informações coletadas fazem referência a uma categoria de pesca, com resolução taxonômica muito baixa (e.g. “cações-agrupados”). As informações dos três primeiros capítulos formaram a base do quarto, onde foi construído um monitoramento pesqueiro participativo (MPP), baseado no auto-reporte de pescadores, guias de pesca e comerciantes, a fim de testar uma estratégia de aprimoramento dos dados pesqueiros de tubarões e raias. Neste capítulo, foi registrado uma grande participação popular, resultando no monitoramento de 1061 viagens, com reportes de alta qualidade taxonômica e identificação de 55 espécies, com a adição de uma nova espécie de tubarão e outra de raia, em relação à riqueza encontrada nos três primeiros capítulos. A vara de mão e o emalhe de fundo foram os aparelhos de pesca mais representativos na pesca amadora e comercial, respectivamente. Concentrações de áreas de pesca foram observadas nas entradas dos estuários, próximo a ilhas costeiras, fundos de cascalho e parcéis. Valores de captura por unidade de esforço (CPUE) por kg e por número de indivíduos mostraram um declínio anual, mas sem diferenças sazonais. Entretanto, houve uma marcada mudança sazonal na composição de espécies. Espécies de extinção, proibidas de retenção a bordo/comercialização (Sphyrna spp., Squatina spp. e Atlantoraja spp.) e permitidas (Rhizoprionodon spp., Carcharhinus brevipinna, C. limbatus, C. falciformis e Galeocerdo cuvier) foram presentes nos desembarques e descartes (reportados espontaneamente). Informações morfométricas (comprimento total, furcal, eviscerado, entre dorsais etc.) também foram obtidas em todas as amostragens presenciais, assim como peso e sexo. Desta forma, a grande quantidade de informações refinadas obtidas de modo participativo neste capítulo (que também incluiu o registro após o fim das coletas, de mais duas novas espécies de tubarões e outra de raia e a redescoberta de uma população de um tubarão após 50 anos), permite aceitar a hipótese de estudo, indicando a metodologia participativa como de grande importância para o avanço da gestão de pesca de elasmobrânquios no Brasil.
O licenciamento ambiental e a recuperação da Mata Atlântica em áreas de preservação permanente de cursos d’água na Baixada Santista
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-09-12) Moschetto, Fernanda Augusto ; Freitas, Débora Martins de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O presente estudo apresenta informações a respeito de como as ações de recuperação florestal são conduzidas por indústrias e empreendimentos privados em Áreas de Preservação Permanente – APPs de cursos d’água na região da Baixada Santista, litoral do estado de São Paulo. A Baixada Santista apresenta um dos maiores índices de cobertura da Mata Atlântica do estado e está inserida em um dos maiores centros de endemismo desse hotspot. Ao mesmo tempo, está suscetível à expansão urbana devido principalmente ao seu polo industrial e à presença do Porto de Santos, fato que ocasionou a degradação de rios e córrregos por empresas na região. Para o desenvolvimento da pesquisa, processos de licenciamento foram consultados nas agências da Companhia Ambiental do Estado de São Paulo – Cetesb visando à identificação das APPs de cursos d’água impactadas na Baixada Santista e que foram recuperadas através do plantio de mudas. Dentre os processos, destacam-se autorizações emitidas pela Cetesb para supressão e demais intervenções nas margens dos recursos hídricos, Termos de Compromisso de Recuperação Ambiental - TCRAs, projetos de recuperação florestal elaborados pelos empreendedores, Autos de Infração Ambiental etc. Através de visitas de campo, as espécies plantadas nas APPs foram identificadas para avaliação da efetividade das ações de recuperação florestal e para a análise das incoerências constantes nos projetos apresentados pelos empreendimentos à Cetesb. Posteriormente, foi avaliado o cumprimento às resoluções vigentes que orientam as ações de recuperação no estado de São Paulo. Buscou-se também avaliar se alguma APP de curso d’água na região deixou de ser recuperada através da conservação ex situ ocasionada pela compensação ambiental. Análises de sensoriamento remoto foram realizadas de modo complementar para identificação da perda de cobertura vegetal na região de estudo ao longo dos anos. Os dados apresentados podem contribuir para a tomada de decisões sobre o procedimento licenciamento ambiental, para ações efetivas de recuperação florestal em áreas de Mata Atlântica e para a recuperação e conservação da biodiversidade desse hotspot.
Morfo-anatomia floral e biologia reprodutiva de Selenicereus setaceus (Salm-Dyck) Berger (Cactaceae) em São Thomé das Letras, Minas Gerais, Brasil
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-08-24) Sampaio, Paulo de Salles Penteado ; Almeida, Odair Jose Garcia de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Cactos epífitos, hemiepífitos e escandentes compreendem cerca de 10% do total de espécies de Cactaceae e são o grupo menos estudado nesta família, sendo que a flor das cactáceas apresenta características estruturais importantes para compreender a taxonomia e filogenia da família. A evolução de um hipanto de origem receptacular levou a possibilidade do desenvolvimento de um tubo floral longo nos grupos mais derivados, uma inovação chave que permitiu uma maior diversidade de polinizadores. Estudos sobre a biologia reprodutiva, morfologia, anatomia e ontogenia floral de Selenicereus são escassos e a maioria deles tem um viés agrícola, com foco nas pitaias comerciais, nenhum deles abordando o Selenicereus setaceus, o que limita o entendimento da diversidade morfológica das estruturas florais, bem como a evolução destas não somente no gênero Selenicereus como em Cactaceae. Assim, o objetivo desta tese foi descrever a morfologia, ontogenia e anatomia floral do cacto epífito/escandente Selenicereus setaceus, utilizando técnicas tradicionais de histologia vegetal e compreender, também, a biologia reprodutiva desta espécie estudando seu ciclo floral, fenologia reprodutiva, produção de néctar, visitantes florais, polinizadores potenciais e seu sistema reprodutivo. Experimentos com métodos de exclusão foram realizados para monitorar o sucesso reprodutivo e determinar quais visitantes florais eram polinizadores potenciais e tratamentos de polinização foram realizados para determinar seu sistema reprodutivo. A morfologia floral do S. setaceus segue o padrão da Tribo Hylocereeae, gênero Selenicereus e também está de acordo com o padrão morfológico para flores de Cactaceae esfingófilas. O ovário é sincárpico unilocular, apresenta uma epiderme interna com tricomas, os funículos são ramificados com um tronco central ligado a placenta portando óvulos circinótropos, bitegumentados, em número médio de 2.763 óvulos. O androceu apresenta cerca de 390 estames com anteras bitecas, basifixas com quatro sacos polínicos apresentando muitos grãos de pólen por flor com uma média de 521.690 grãos apresentados em mônades, grandes (86-96,3 µm), 3 colpados com exina espinulosa e perfurada. O néctar floral é produzido em uma câmara nectarífera onde o néctar é produzido e acumulado em uma região localizada acima do ovário, expandida e alongada ocupando grande extensão no tubo floral, sendo do tipo difusa. A ontogenia mostrou que os primórdios de androceu e gineceu surgem já nos primeiros estágios do desenvolvimento do botão floral; em um mesmo eixo num plano horizontal, sendo que o androceu possui um padrão centrífugo de desenvolvimento e o gineceu apresentando somente uma cavidade e primórdios de carpelos já unidas neste estágio de desenvolvimento inicial; comprovando então uma fusão congenital e não ontogenética. A formação do tubo floral com a cavidade nectarífera em seu interior e o crescimento em extensão destas estruturas só ocorre faltando metade do tempo para a antese; os tricomas da epiderme nectarífera se apresentam desenvolvidos somente na pre-antese faltando dois dias para a antese; já os tricomas do canal estilar e lobos do estigma estão bem desenvolvidos faltando 10 dias para a antese. O botão floral leva 41 dias para atingir a antese e a maturação dos frutos 63 dias. Os horários de início da antese ocorrem por volta das 16h, 2h antes do pôr do sol, e a flor está totalmente aberta por volta das 20h30, com 30 cm de comprimento e 29 cm de diâmetro e o término da antese ocorre por volta das 11h. O néctar apresentou uma concentração média de soluto de 28,3% e volume médio de 133 µL. As abelhas Apis mellifera foram os visitantes mais frequentes e os principais polinizadores das flores de S. setaceus, principalmente no período entre 05h00-06h00 quando foi observada a maior frequência e número de visitas; sendo que os visitantes noturnos foram muito escassos, com apenas uma visita registrada para a mariposa Manduca rustica, outro polinizador potencial. A polinização natural teve alta taxa de frutificação (89,8%); a população estudada é autocompatível; e frutifica através de autopolinização manual e espontânea que ocorre através do contato físico entre as anteras e os lobos do estigma durante o fechamento das flores. Este estudo comprovou que o Selenicereus setaceus apesar de se enquadrar na síndrome da esfingofilia com uma flor fenotipicamente especializada, possui uma polinização natural ocorrendo, principalmente, pela extensão da antese floral até às 11h do dia seguinte e visitação diurna realizada por Apis mellifera, além da autopolinização espontânea. A população do S. setaceus está mudando seu sistema de polinização devido à escassez do polinizador noturno e apresentando um sistema de polinização generalista com diferentes mecanismos de transporte de pólen, ou seja, a autopolinização e a polinização cruzada realizada pelas abelhas, a autopolinização e a polinização cruzada por mariposas e a autopolinização espontânea estão garantindo a produção de frutos e sementes no S. setaceus em São Thomé das Letras. A autopolinização espontânea ou realizada pelas Apis mellifera é uma garantia para a segurança reprodutiva e manutenção da espécie no local de estudo, como indicado pela baixa taxa de fertilização dos óvulos disponíveis nas flores fenotipicamente especializadas, devido à raridade local da mariposa esfingídea.
Avaliação dos efeitos biológicos da interação microplástico, triclosan e 17α etinil-estradiol em espécies estuarinas tropicais: Uma abordagem ecotoxicológica.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-03-31) Nobre, Caio Rodrigues ; Pereira, Camilo Dias Seabra ; Gusso-Choueri, Paloma Kachel ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os efluentes domésticos são uma mistura complexa de diferentes substâncias, incluindo microplásticos e fármacos e produtos para cuidados pessoais (FPCPs). Microplásticos apresentam afinidade com substâncias hidrofóbicas tais como o hormônio sintético 17α etinil-estradiol o bactericida triclosan, e podem interagir em ambientes aquáticos atuando como vetores de dispersão dessas substâncias, com potenciais efeitos a biota. Nesse contexto, o presente estudo tem como objetivo avaliar efeitos tóxicos de microplásticos contaminados com FPCPs através de uma abordagem ecotoxicológica empregando organismos estuarinos. Os organismos ostra do mangue (Crassostrea brasiliana), caranguejo-uçá (Ucides cordatus) e robalo (Centropomus undecimalis) foram expostos a tratamentos: controle (C); microplásticos sem contaminação (MP); e microplástico contaminado com 17α etinil-estradiol (MPE); microplástico contaminado com triclosan (MPT). Os organismos foram expostos por 3 e 7 dias. Para as ostras e os caranguejos, a posteriori à exposição, 10 organismos/ tratamento/ tempo tiveram sua saúde celular avaliada mediante ao ensaio de estabilidade da membrana lisossômica na hemolinfa. Após o encerramento dos ensaios também foram separados tecidos de 7 organismos para as análises de biomarcadores bioquímicos (EROD, DBF, GST, GPx, GSH, LPO, danos em DNA e ChE) nas ostras (brânquias, glândulas digestivas e músculos adutores), caranguejos (brânquias, hepatopâncreas e músculos) e GST, GPx, GSH, LPO, danos em DNA e ChE em peixes (brânquias, fígado, intestino, músculo e cérebro). Os 3 organismos restantes de cada espécie foram separados para determinações analíticas nos níveis de 17α etinil-estradiol e triclosan. Ambas as substâncias avaliadas EE2 e TCS tiveram sua presença detectada na água e nos organismos expostos. Ao serem inseridas no meio experimental as partículas de polietileno sem contaminação e contaminadas com EE2 e TCS foram capazes de promover efeitos bioquímicos nas enzimas de fase I, fase II, sistema anti-oxidante, levar ao estresse oxidativo e desencadear danos em DNA e efeitos neurotóxicos e citotóxicos nas três espécies modelos C. brasiliana, U. cordatus e C. undecimalis nos diferentes tecidos avaliados. Ao compararmos os efeitos das substâncias adsorvidas pelos MPs, o TCS mesmo em menor concentração se mostrou mais tóxico que o EE2 para as espécies modelos. Quando os organismos foram comparados entre si o fator espécie se mostrou o mais relevante para ocorrência de efeitos dos MPs de uma maneira geral. A partir dos dados obtidos é possível inferir que os microplásticos de polietino associados aos FPCPs 17α etinil-estradiol e triclosan conferem risco aos ecossistemas estuarinos tropicais e as espécies Crassostrea brasiliana, Ucides cordatus e Centropomus undecimalis podendo gerar perturbações ecológicas à cadeia alimentar estuarina.
Estudo ecotoxicológico do biocida antiincrustante DCOIT (SEA-NINE™) em invertebrados marinhos neotropicais
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-03-11) Campos, Bruno Galvão de ; Abessa, Denis Moledo de Souza ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Após a proibição das tintas anti-incrustantes à base de tributilestanho, o DCOIT (4,5-Dicloro-2- octilisotiazol-3(2H)-ona) tornou-se um dos biocidas anti-incrustantes mais utilizados. Além de ser considerado um contaminante pseudopersistente em áreas com alto tráfego de embarcações e tóxico para espécies não-alvo, a bioacumulação e a transferência trófica de DCOIT em organismos marinhos permanece desconhecido. O presente estudo está dividido em três capítulos que: I) apresentam, como revisão crítica, uma compilação de dados toxicológicos e ambientais dos biocidas mais comuns, e usa essas informações para uma avaliação de risco ecológico (ERA) dos 11 biocidas anti-incrustantes aprovados pela UE (PT21), que indicaram que DCOIT, diuron, diclofluanida, clorotalonil, CuSCN, Cu2O, medetomidina e zineb representam risco para ecossistemas costeiros. II) avaliou a degradação de DCOIT, Irgarol, Diuron e Diclofluanida durante uma fase de equilíbrio de sedimentos de 24 horas em três tempos e concentrações através de modelos de degradação cinética, resultando nas seguintes meias-vidas: DCOIT e Diuron: < 5 h; diclofluanida < 2 h; e Irgarol < 6h. Os resultados também indicaram que exceto diclofluanida, os biocidas anti-incrustantes mostraram que em 6 horas de equilíbrio a taxa de degradação é reduzida drasticamente. III) Investigou os efeitos subletais (bioquímicos, celular e histopatológico) de concentrações ambientalmente relevantes de DCOIT na ostra neotropical Crassostrea brasiliana exposta a concentrações crescentes de DCOIT. este estudo mostrou que o DCOIT causa efeitos negativos sobre C. brasiliana em todos os níveis de organização biológica. IV) Avaliou a toxicidade da água e do sedimento total do DCOIT no seguintes espécies: Perna perna (bivalve), Echinometra lucunter (ouriço-do-mar) Artemia sp (crustáceo), Nitrocra sp (copépode) e Tiburonella viscanna (anfípode). Os dados de toxicidade foram usados para calcular os pontos finais de perigo e risco ambiental que foram comparados com valores obtidos para as espécies temperadas, revelando que os organismos pelágicos tropicais estavam em média 1,7 vezes mais sensível ao DCOIT em comparação com espécies não tropicais. Para sedimentos DCOIT possivelmente apresenta risco na Coréia, Japão, Espanha, Malásia, Indonésia, Vietnã e Brasil. V) Investigou a bioacumulação, biomagnificação e transferência trófica de DCOIT e SiNC-DCOIT (um alternativa de nanoengenharia e menos toxica comaprado com o DCOIT) da microalga Tetraselmis chuii ao mexilhão Mytilus galloprovincialis durante a uptake de 24h e depuração de 72h, o que mostrou que os mexilhões internalizaram e metabolizaram rapidamente tanto DCOIT e SiNC-DCOIT, sendo considerados não bioacumuláveis. No entanto, a exposição via alimentar indicou que DCOIT e SiNC-DCOIT tem capacidade de biomagnificação. VI) avaliou os efeitos subletais de curto e longo prazo de formas nanoestruturadas de biocidas (DCOIT; Ag; SiNC-DCOIT; SiNC-DCOIT Ag) e a nanocápsula “vazia” (SiNC) em juvenis de Crassostrea gigas após 96 h e 14 dias de exposição, indicando que o SiNC-DCOIT apresentou um perfil de toxicidade inferior ao biocida livre. No geral, nossos resultados geraram dados ecotoxicológicos importantes para um contexto que permitirá previsões mais precisas de risco para o ambiente marinho. Os resultados também indicou que as áreas costeiras próximas a portos e marinas são hotspots de contaminação de antiincrustantes sendo considerados os locais mais ameaçados, exigindo, portanto, um controle rigoroso das taxas de liberação e regulamentação rigorosa sobre essas áreas
Estudo ecotoxicológico e avaliação do risco ambiental da cocaína em ecossistemas marinhos
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-01-31) Fontes, Mayana Karoline ; Pereira, Camilo Dias Seabra ; Maranho, Luciane Alves ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Os esgotos urbanos representam uma importante fonte de poluição em ecossistemas marinhos, devido, principalmente, ao aumento populacional em regiões metropolitanas costeiras e à ineficiência dos processos de coleta, tratamento e disposição de efluentes domésticos. Entre as principais substâncias que podem ser encontradas nos efluentes estão os produtos farmacêuticos, de cuidados pessoais e drogas ilícitas, tais como a cocaína, que é considerada como um sério problema de saúde pública. Os emissários submarinos representam o principal mecanismo de liberação de contaminantes de preocupação emergente (como as drogas ilícitas) no ambiente marinho. Estudos anteriores identificaram a presença de cocaína (COC) em água superficial continental e costeira, bem como efeitos biológicos em concentrações ambientalmente relevantes. Dessa forma, o presente trabalho tem como objetivo a realização de uma avaliação do risco ambiental de cocaína em ambientes costeiros através de uma metodologia escalonada que contemple a quantificação em matrizes ambientais na Baía de Santos (água superficial, sedimento e mexilhões) e ensaios ecotoxicológicos empregando como modelos o mexilhão Perna perna e o peixe Anguilla anguilla. Os mexilhões foram expostos a duas diferentes concentrações de cocaína (200 ng.l-1 e 2000 ng.l-1), a um controle de água do mar e um controle de solvente, por 168h. Ao todo, foram 21 mexilhões divididos em 2 aquários por tratamento. Após os períodos de exposição (48h, 96h e 168h), 7 mexilhões eram aleatoriamente retirados dos aquários e submetidos à avaliação de citotoxicidade (pelo ensaio do Tempo de Retenção do Vermelho Neutro) e posteriormente eram excisados para retirada de tecidos (músculo adutor, glândula digestiva, brânquia e gônadas) para análise de biomarcadores (dopamina- DOPA; 5-hydroxytryptamine- 5-HT – serotonina; acetilcholinesterase- AChE; monoamina oxidase- MAO; ciclooxigenase- COX; transporte mitocrondrial de elétrons- MET; lipidios totais- TLP; 7-ethoxiresorufin O-deetilase – EROD; dibenzilfluoresceina dealkilase – DBF; glutationa S-transferase – GST; glutationa peroxidase – GPX; DNA danos em DNA; e peroxidação lipídica – LPO). A capacidade da cocaína bioacumular nos mexilhões também foi verificada. Além disso, peixes (Anguilla anguilla) também foram expostos à cocaína (20 ng.l−1) para investigar potenciais danos histopatológicos, imunohistoquímicos (3β-hidroxisteroide dehidrogenase- 3β-HSD; 17β- hidroxisteroid dehidrogenase- 17β-HSD type 3; e P450 aromatase) e endócrinos (hormonônio folículo estimulante- FHS; hormônio luteinizante- LH and cortisol) da cocaína em vertebrados. Os resultados demonstram que a cocaína foi encontrada na Baía de Santos em concentrações variando de 1.91 – 203.6 ng.l−1, sendo as maiores concentrações detectadas na primavera/verão, período que coincide com o aumento populacional na Baixada Santista devido ao início da alta temporada. No sedimento, as concentrações quantificadas variaram de 0.94 – 46.85 ng.g−1. A cocaína também foi detectada no tecido de mexilhões coletados na Baía em concentrações variando de 0.914-4.58 μg·kg−1 (peso úmido). O fator de bioacumulação calculado variou de 163 – 1454 l·kg−1. Quanto às vias metabólicas investigadas, foram observadas alterações nas atividades de EROD e DBF, além de GST e GPx, indicando comprometimento na metabolização e resposta antioxidante. A exposição à cocaína provocou citotoxicidade nos mexilhões, que foi observada pela reduzida estabilidade da membrana lisossomica dos hemócitos, além do aumento significativo de peroxidação lipídica e danos em DNA. A cocaína aumentou os níveis de neurotransmissores (dopamine e serotonina) nos mexilhões em todas as concentrações testadas. Já após 168h foi observada uma redução nos níveis de AChE e COX. Além disso, foi observada um aumento nos níveis de MET e TLP em ambas as concentrações. Os peixes expostos à cocaína apresentaram um atraso no desenvolvimento e maturação dos folículos ovarianos, fato que pode comprometer a reprodução desses organismos. Isso também foi demonstrado pela menor expressão de 3β-HSD, e P450 aromatase, bem como menores níveis de FHS e LH. Os resultados indicam que concentrações ambientalmente relevantes de cocaína, mesmo na ordem de ng.l-1 são capazes de afetar negativamente a saúde dos animais marinhos a partir de perturbações no sistema reprodutivo e citogenotoxicidade. A avaliação de risco realizada apontou para quocientes situados entre os níveis moderado e alto para Baía de Santos. É preciso melhorar a estrutura de coleta e tratamento de esgoto em regiões costeiras a fim de minimizar o descarte de efluentes contaminados com drogas ilícitas em ambientes marinhos. Além disso, é importante que essas substâncias sejam incluídas em programas de monitoramento da qualidade de água, a fim de se estabelecerem parâmetros de segurança que permitam a preservação dos recursos naturais e da saúde humana.
Infecção experimental por Leishmania (Leishmania) infantum em hamsters: alterações morfofuncionais do cólon.
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2022-01-10) Chucri, Thaís Martins ; Mari, Renata de Britto ; Passero, Luiz Felipe Domingues ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
A degradação ambiental e as mudanças climáticas são alguns dos fatores que contribuem para uma maior ocorrência de doenças. Dentre elas, a leishmaniose visceral (LV), uma importante zoonose com letalidade de aproximadamente 95%. É uma infecção sistêmica crônica e quando o parasito atinge o trato gastrointestinal pode provocar alterações morfofisiológicas significativas. No entanto, pouco se sabe sobre o impacto causado por Leishmania no sistema nervoso entérico (SNE). Os neurônios desse plexo desempenham importante papel em manter o peristaltismo e auxiliar na resposta imune do órgão. Diante do exposto e dada a importância do SNE para manter a homeostase do organismo, o objetivo desse estudo foi investigar o comprometimento morfofisiológico das subpopulações de neurônios NADH-dp e NADPH-dp e histopatológico do intestino grosso de hamsters infectados experimentalmente.
Influência de Fatores Físicos na Ecologia e Dinâmica Populacional de Epialtus brasiliensis Dana, 1852 (Brachyura: Majoidea: Epialtidae), em Associação ao Sargassum C. Agardh, 1820 (Fucales: Phaeophyceae) no Litoral Norte do Estado de São Paulo
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-12-10) Vilano, Wagner Ferreira ; Souza, Marcelo Ricardo de ; Pinheiro, Marcelo Antônio Amaro ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Costões rochosos, são ecossistemas complexos que sofrem influência de diversas variáveis e processos, sendo extremamente relevantes ao estabelecimento de diversas espécies. Neste sentido, o presente estudo avalia aspectos da geologia, geomorfologia e energia hídrica em quatro costões rochosos de Ubatuba (SP), Litoral Norte do Estado de São Paulo (Brasil), verificando sua influência sobre parâmetros bióticos, representados por Sargassum. e caranguejo do fital, E. brasiliensis. Neste contexto, os costões rochosos foram caracterizados em sua extensão quanto a geologia, geomorfologia, declividade, complexidade e sombreamento, além da energia hídrica, neste caso empregando um modelo computacional SWAN. Além disso, foi avaliada a biometria (tamanho) e densidade de E. brasiliensis, em relação às algas pardas do gênero Sargassum. Para realização do trabalho, as amostras de Sargassum, foram obtidas mensalmente durante um ano (agosto/2011 a julho/2012), em dois períodos (diurno e noturno), em quatro costões rochosos do litoral de Ubatuba, SP. No contexto geológico geral, os costões estudados são formados por granitos compostos basicamente por quartzo, feldspato, moscovita e biotita, sendo amplamente diversificado quanto ao foliamento e fratura, variando sua forma, compreendendo desde paredões verticais a pequenos blocos encaixados. Os costões da Fortaleza e Lamberto foram similares quanto a declividade (p=0,856), com médias variando de 15 a 31º. Fortaleza e Domingas Dias foram os costões mais próximos quanto à complexidade (p=0,476), diferindo do costão do Lamberto, que foi o mais distinto em complexidade (p=0,013). A intensidade luminosa diferiu entre os costões (p=0,000), com similaridade entre Fortaleza e Domingas Dias (p=0,802). A energia das ondas diferiu de intensidade entre os costões (p=0,045). Durante o estudo, um total de 7.889 indivíduos de E. brasiliensis foram capturados (3.570 machos e 4.319 fêmeas), O tamanho dos exemplares (largura da carapaça) variou de 1,4 a 11,9 mm (5,1±1,5 mm) e a abundância total de E. brasiliensis apresentou assimetria positiva em todos os costões analisados. A densidade total dos caranguejos (ind./kg) não diferiu entre Baías (F=2,71; p=0,106) ou entre os costões (F=0,99; p=0,400), enquanto para LC houve diferenças entre os costões (F=91,96; p=0,000). O comprimento da alga (CA), indicou diferença significativa entre os costões (F=51,33; p=0,000). Os animais maiores (LC) foram encontrados no costão rochoso do Lamberto com o inverso ocorrendo no Perequê-Mirim, já para as algas, a maior média foi registrada no costão do Lamberto (38,7±8,7cm), sendo menor para o costão da Domingas Dias (12,7±2,5cm). As diferenças registradas entre os parâmetros analisados em E. brasiliensis, sugerem a influência do tamanho das frondes de Sargassum. em seu desenvolvimento e estabelecimento no habitat, uma vez que a complexidade do substrato (alga substrato) proporciona diferentes situações no assentamento e permanência em suas frondes. Os resultados obtidos neste estudo evidenciam uma proximidade dos costões tanto por fatores abióticos como pelos bióticos, com maior similaridade entre os costões de uma mesma baía (Baía da Fortaleza: Fortaleza e Domingas Dias; e Baía do Flamengo: Perequê-Mirim e Lamberto), bem como entre os dois embaiamentos.
Avaliação de moléculas bioativas como inibidores do sistema antioxidante de peroxirredoxinas 2-Cys típicas (AhpC) em bactérias
(Universidade Estadual Paulista (Unesp), 2021-03-03) Santos, Melina Cardoso dos ; Oliveira, Marcos Antonio de ; Universidade Estadual Paulista (Unesp)
O aumento da resistência aos antibióticos por microrganismos tem crescido vertiginosamente e especialistas têm alertado quanto à rápida ineficácia dos medicamentos frente a linhagens de bactérias super-resistentes. A resistência de bactérias aos antibióticos pode estar diretamente relacionada ao estresse oxidativo, pois antibióticos distintos possuem a capacidade convergente de produzir espécies reativas de oxigênio, que causam danos às macromoléculas, em especial ao DNA, acentuando as taxas de mutação o que pode contribuir para o aparecimento de linhagens super-resistentes. Espécies reativas de oxigênio e nitrogênio também são produzidas pelo sistema imunológico de hospedeiros para combater patógenos e estudos indicam que a inibição da expressão de enzimas antioxidantes de patógenos é capaz de gerar um aumento intracelular significativo dessas espécies, o que interfere de forma substancial na sua sobrevivência. Recentemente foi demonstrado que um composto natural denominado adenantina (Adn) é capaz de inibir a atividade peroxidásica de peroxirredoxinas (Prx) 2-Cys típicas de humanos (PrxI e PrxII), resultando na mortalidade de células tumorais, mas apresentando baixa toxicidade para células normais. As Prx 2-Cys são capazes de decompor hidroperóxidos utilizando um resíduo de cisteína (CysP) e sua a alta reatividade sobre diferentes tipos de hidroperóxido é alcançada por interações com os resíduos de Thr/Ser e Arg, absolutamente conservados entre as Prx 2-Cys. Em conjunto, CysP, Thr/Ser e Arg, recebem o nome de tríade catalítica (TC). As Prx 2-Cys típicas também estão presentes em bactérias e são denominadas de AhpCs, sendo consideradas como uma das frentes de defesa oxidativas fundamentais para o patógeno. Em projeto anterior, avaliamos os efeitos da presença do resíduo de Thr ou Ser na TC de duas Prx-2 Cys típicas de levedura sobre a atividade inibitória de Adn. Demonstramos então que Adn possui maior afinidade por enzimas contendo Ser na TC e que a presença da Ser nesta posição existe essencialmente em procariotos, sobretudo em bactérias. No presente estudo, dando continuidade a este trabalho, verificamos que AhpCs contendo uma Ser na TC são mais resistentes à superoxidação e apresentariam ainda uma atividade de holdase em situações de estresse térmico mais acentuada do que AhpCs contendo uma Thr nessa posição. Uma vez que o estresse oxidativo e térmico são barreiras impostas à infecção por bactérias pelo organismo hospedeiro, a inibição desse sistema de defesa poderia constituir uma estratégia de importância no combate a esses patógenos. Nesse sentido, avaliamos a capacidade inibitória de Adn sobre AhpCs e verificamos que Adn apresenta maior afinidade por AhpC de Escherichia coli (EcAhpC), independente da presença de Thr ou Ser na TC (EcAhpCWT e EcAhpCT44S) do que para as isoformas de humanos, apresentando um valor de IC50 ≈ 5 e 50 vezes inferior do que para PrxI e PrxII, respectivamente. Adicionalmente, observamos que Adn também inibiu a atividade de Trx de E. coli (EcTrx1) com maior eficiência que a Trx de humanos. Verificamos ainda que Adn mostrou-se tóxica para bactérias Gram-positivas, apresentando valores de IC50 na faixa de 110-140µM, e para Gram-negativa (E. coli) quando tratadas com polimixina B nonapeptídeo (PMBN). Uma vez que PMBN também apresenta atividade antibiótica, sua utilização em associação com Adn pode representar uma potencial nova terapia antimicrobiana. Adicionalmente, realizamos uma triagem de compostos naturais oriundos da biota florística do Estado de São Paulo e identificamos uma molécula capaz de inibir a atividade peroxidásica de EcAhpC com eficiência semelhante à Adn, além de inibir também EcTrx1 com menor eficiência. Este composto representa o primeiro inibidor de Prx da classe das lactonas sesquiterpênicas, além de ser também o primeiro inibidor proveniente da biodiversidade brasileira. Por fim caracterizamos uma nova tiól proteína de X. fastidiosa e demonstramos que ela é capaz de proteger as células bacterianas contra o cianeto e o estresse oxidativo gerado por H2O2. Coletivamente os resultados obtidos neste trabalho contribuem para a descoberta de novas abordagens de combate a bactérias patogênicas.

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