Publicação: Avaliação da deleção de MTAP no desenvolvimento e resposta a terapia e imunoterapia em glioblastomas
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Data
Autores
Orientador
Bidinotto, Lucas Tadeu
Coorientador
Pós-graduação
Patologia - FMB
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Tese de doutorado
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
Glioblastoma (GBM) é um tumor cerebral altamente agressivo e letal, caracterizado por crescimento rápido, resistência à terapia e prognóstico ruim. Estudos recentes enfatizaram o papel central da metiltioadenosina fosforilase (MTAP), uma enzima no metabolismo de purina e metionina, em vários tipos de câncer. Entretanto, o impacto do silenciamento do MTAP no GBM ainda não está claro. Neste estudo, investigamos os efeitos do silenciamento de MTAP no crescimento de GBM usando linhagens de células de glioblastoma e um modelo de xenoenxerto. O knockout de MTAP mediado por CRISPR-Cas9 em células de glioblastoma, implantadas em camundongos imuno deficientes, demonstrou que o silenciamento de MTAP atrasou significativamente o crescimento do tumor (p<0,001) e alterou a celularidade (p<0,009), fibrose (p<0,006) e necrose (p<0,0003) em xenoenxertos em camundongos imuno deficientes. Mecanicamente, a perda de MTAP interrompeu a proliferação (p<0,001), a migração (p<0,001) e a formação de colônias (p<0,001) em estudos in vitro. Além disso, o acúmulo de metiltioadenosina (MTA) no microambiente tumoral (TME) promoveu um ambiente imunossupressor e aumentou a angiogênese (p<0,0001), o que facilitaria a progressão do tumor. Também exploramos o potencial terapêutico da síntese de purina e dos inibidores de MAT2A no GBM deficiente em MTAP, sugerindo que a 2-Fluoroadenina (2-FA) inibiu a migração celular (p<0,0001), a formação de colônias (p<0,0001) e a viabilidade do tumor, particularmente em células com MTAP deletado. Além disso, na presença de MTA houve letalidade sintética apenas em células MTAP-/-, revertendo a citotoxicidade da droga nas células MTAP+/+. Entretanto, nenhuma letalidade sintética foi observada com pemetrexede ou AG-270. Essas descobertas destacam o silenciamento de MTAP como um potencial alvo terapêutico no GBM e sugerem que direcionar o metabolismo da purina pode oferecer uma estratégia promissora para tumores deficientes em MTAP. Mais estudos são necessários para validar esses resultados in vivo e avaliar a eficácia dos inibidores da via relacionada ao MTA no tratamento do GBM.
Resumo (inglês)
Glioblastoma (GBM) is a highly aggressive and lethal brain tumor, characterized by rapid growth, resistance to therapy, and poor prognosis. Recent studies have emphasized the role of methylthioadenosine phosphorylase (MTAP), an enzyme in purine and methionine metabolism, in various cancers. However, the impact of MTAP silencing in GBM remains unclear. In this study, we investigated the effects of MTAP silencing on GBM growth using glioblastoma cell lines and a xenograft model. CRISPR-Cas9-mediated MTAP knockout in glioblastoma cells, implanted into immunodeficient mice, demonstrated that MTAP silencing significantly delayed tumor growth (p<0.001) and altered cellularity (p<0.009), fibrosis (p<0.006), and necrosis (p<0.0003) in immunodeficient mouse xenografts. Mechanistically, MTAP loss disrupted proliferation (p<0.001), migration (p<0.001), and colony formation (p<0.001) in in vitro studies. Furthermore, Methylthioadenosine (MTA) accumulation within the tumor microenvironment (TME) promoted an immunosuppressive environment and enhanced angiogenesis (p<0.0001), which could, in turn, facilitate tumor progression. We also explored the therapeutic potential of purine synthesis and MAT2A inhibitors in MTAP-deficient GBM, finding that 2-FA inhibited cell migration (p<0.0001), colony formation (p<0.0001), and tumor viability, particularly in MTAP-deleted cells. Furthermore, in the presence of MTA there was synthetic lethality only in MTAP-/- cells, reversing the cytotoxicity of the drug in MTAP+/+ cells. However, no synthetic lethality was observed with PRMT5 inhibitors or AG-270. These findings highlight MTAP silencing as a potential therapeutic target in GBM and suggest that targeting purine metabolism may offer a promising strategy for MTAP-deficient tumors. Further studies are needed to validate these results in vivo and assess the efficacy of MTA-related pathway inhibitors in GBM treatment.
Descrição
Palavras-chave
Glioblastoma, MTAP, MTA, 2-FA, deleção, Pemetrexed, AG-270
Idioma
Inglês
Como citar
GONÇALVES, Paola Gyuliane. Avaliação da deleção de MTAP no desenvolvimento e resposta a terapia e imunoterapia em glioblastomas. 85 p. 2025. Tese (Doutorado em patologia). Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Medicina, Botucatu, 2025.
