Publicação: Efeitos da suplementação com diferentes ácidos graxos sobre a síntese de prostaglandina F2α e E2 em células trofoblásticas bovinas cultivadas in vitro
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Data
Autores
Orientador
Membrive, Claudia Maria Bertan 
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Dracena - FCAT - Zootecnia
Título da Revista
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Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
As prostaglandinas E2 e F2α são sintetizadas pelo endométrio materno e células trofoblásticas do embrião. A PGE2 exerce efeitos luteotróficos que favorecem o reconhecimento materno-fetal (RMF) enquanto a PGF2α exerce ações luteolíticas. Ácidos graxos (AG) específicos alteram a biossíntese das prostaglandinas. Modificações que resultem no aumento síntese de PGE2, diminuição na síntese de PGF2α e/ou aumento da razão PGE2/PGF2α, podem beneficiar o embrião no RMF. A hipótese é que a suplementação com CLA, AL, AO ou EPA + DHA no meio de cultivo de células trofoblásticas bovinas (CT-1) reduz a síntese de PGF2α, aumenta síntese de PGE2 e aumenta a razão PGE2/PGF2α. Objetivou-se avaliar os efeitos da suplementação com AG específicos no meio de cultivo das células trofoblásticas bovinas (CT-1) na síntese de PGE2, PGF2α e na razão PGE2/PGF2α. As CT-1 foram cultivadas por 24 dias em garrafas de cultivo, a 38,5°C em atmosfera umidificada com 5% de CO2. Após, foram transferidas para placas de 6 poços contendo meio acrescido com 10% de soro fetal bovino (SFB), onde foram cultivadas por 5 dias. As CT-1 receberam meio de cultivo isento de SFB por 24 horas. Em seguida, os poços receberam meio sem SFB contendo 100 µM de ácido linoleico conjugado (CLA), 100 µM de ácido linoleico (AL), 100 µM de ácido oleico (AO) ou 50 µM de ácido eicosapentaenoico (EPA) + 50 µM de ácido docosahexaenoico (DHA) durante 5 minutos, 24, 48 e 72 horas; em um total de 5 replicatas. As concentrações de PGE2 e PGF2α foram determinadas por ELISA. A análise estatística foi realizada pelo PROC MIXED do SAS, considerando o poço como unidade experimental. Não houve diferença estatística para a síntese de PGE2 e PGF2α no tempo de 5 minutos entre os diferentes grupos. No grupo tratado com AL, comparado ao controle, observou-se uma maior síntese de PGE2 após 24, 48 e 72 horas. A síntese PGF2α foi maior no grupo AL e AO quando comparado ao controle nos tempos 24, 48 e 72 horas. A síntese de PGF2α foi menor no grupo EPA+DHA comparado ao grupo controle em 48 e 72 horas. A razão PGE2/PGF2α foram maiores nos grupos CLA, AL, EPA+DHA comparados ao grupo controle para 24, 48 e se manteve por 72 horas apenas no grupo EPA+DHA comparado ao controle. Em conclusão, o AL aumenta síntese de PGE2 e PGF2α com 24, 48 e 72 horas de cultivo, contudo a razão PGE2/PGF2α foi aumentada em 24 e 48 horas de tratamento. O EPA+DHA diminui a síntese de PGF2α e aumentou a razão PGE2/PGF2α em 48 e 72 horas de tratamento.
Resumo (inglês)
Prostaglandins E2 e F2α are synthesized by the maternal endometrium and embryo trophoblastic cells. PGE2 exerts luteotrophic effects favoring maternal pregnancy recognition (MPR), while PGF2α exerts luteolytic actions. Specific fatty acids (FA) alter the biosynthesis of prostaglandins. Modifications that result in increased PGE2 synthesis, decreased PGF2α synthesis, and/or increased PGE2/PGF2α ratio; may benefit the embryo in the MPR. The hypothesis is that supplementation with CLA, AL, AO or EPA + DHA in the culture medium of bovine trophoblastic cells (CT-1) reduces PGF2α synthesis, increases PGE2 synthesis and increases the PGE2/PGF2α ratio. This study aimed to evaluate the effects of supplementation with specific FAs in the culture medium of bovine trophoblastic cells (TC-1) on the synthesis of PGE2, PGF2α, and the PGE2/PGF2α ratio. TC-1 was cultivated in culture bottles at 38.5°C in a humidified atmosphere with 5% CO2. Afterward, they were transferred to 6-well cell culture dishes containing medium added with 10% fetal bovine serum (FBS) and were cultured for 5 days. TC-1 received an FBS-free culture medium for 24 hours. Then, the wells received FBS-free medium containing 100 µM conjugated linoleic acid (CLA), 100 µM linoleic acid (LA), 100 µM oleic acid (OA), or 50 µM eicosapentaenoic acid (EPA) + 50 µM docosahexaenoic acid (DHA) for 5 minutes, 24, 48 and 72 hours; in a total of 5 replicates. PGE2 and PGF2α concentrations were determined by ELISA. Statistical analysis was performed by SAS PROC MIXED, considering the well as the experimental unit. There was no difference in the synthesis of PGE2 and PGF2α within 5 minutes between the different groups. In the group treated with LA compared to the Control, a greater synthesis of PGE2 was observed after 24, 48 and 72 hours. PGF2α synthesis was higher in the AL and OA groups when compared to the Control at times 24, 48 and 72 hours. PGF2α synthesis was lower in the EPA+DHA group compared to the Control group at 48 and 72 hours. The PGE2/PGF2α ratio was higher in the CLA, LA, EPA+DHA groups compared to the Control group for 24, 48, and was maintained for 72 hours only in the EPA+DHA group compared to the Control. In conclusion, LA increases the synthesis of PGE2 and PGF2α at 24, 48, and 72 hours of culture, however, the PGE2/PGF2α ratio was increased at 24 and 48 hours of treatment. EPA+DHA decreased PGF2α synthesis and increased the PGE2/PGF2α ratio at 48 and 72 hours of treatment.
Descrição
Palavras-chave
Ácidos graxos, Prostaglandina, Células trofoblásticas, Bovino, Fatty acids, Prostaglandin, Trophoblastic cells, Bovine
Idioma
Português
Como citar
CASAGRANDE, Mariana Berlato. Efeitos da suplementação com diferentes ácidos graxos sobre a síntese de prostaglandina F2α e E2 em células trofoblásticas bovinas cultivadas in vitro. Orientador: Claudia Maria Bertan Membrive. 2024. 50 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Zootecnia) - Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Ciências Agrárias e Tecnológicas, Dracena, 2024.
