Análises da expressão de P53, CXCL8 e das mutações de TP53 no tumor venéreo transmissível canino, relacionado ao comportamento biológico

Abstract

Introdução: O tumor venéreo transmissível (TVT) é a neoplasia cuja principal característica reside no fato de que a célula neoplásica não é própria do hospedeiro. Baseia-se na transferência interindividual de clones de células neoplásicas originadas há milhares de anos em um indivíduo canino fundador. Utiliza os mesmos mecanismos envolvidos na metástase, para sua transmissão. Seu comportamento, semelhante às neoplasias malignas, e a capacidade de evasão do sistema imunológico são alvos de pesquisas contínuas. Nesta pesquisa, avaliamos as mutações do gene TP53 relacionadas à expressão de P53. A expressão de CXCL8 e considerada fundamental na capacidade de modulação da imunovigilância, bem como a interação da célula tumoral com células endoteliais na angiogênese. Método: Mutações de TP53 via Sequenciamento Sanger. Imunofenotipagem para P53 e CXCL8 pela Imunohostoquímica para 18 casos da região andina da Colômbia e 17 casos do interior de São Paulo, Brasil. Resultado: A sequência do TP53 exclui mutações não sinônimas. Mesmo assim, o TVT apresentou polimorfismo em nucleotídeos que são aceitos como mutações sinônimas que apresentaram códons de posição diferente nas duas regiões geográficas. A Imunofenotipagem para P53 apresentou baixa expressão nas células tumorais em ambos grupos, sugerindo baixa taxa apoptótica. A pesquisa determinou alta expressão de CXCL8, que gera maior entendimento sobre o perfil de citocinas que esse tumor utiliza para modular sua sobrevivência. Discussão: A descoberta de mutações sinônimas no gene TP53 pode estar relacionada à transcrição e subsequente quantificação de P53. No entanto, o modelo estatístico desta pesquisa não encontrou evidências que vinculem a baixa expressão de P53 à presença ou ausência de mutações. Além disso, o códon de localização das três mutações encontradas, foi diferente de acordo com a região geográfica, e os casos que apresentaram mutação tiveram expressão de P53 no citoplasma. A alta expressão de CXCL8 e outras citocinas avaliadas em estudos paralelos sugere que essa célula aproveita a capacidade pleiotrópica e antagônica própria dessas moléculas para garantir sua sobrevivência. Conclusão: Mutações sinônimas de TP53 em TVT apresentam diferenças regionais, indicando a existência de fatores epigenéticos e ambientais que geraram seleções de subclones em diferentes ambientes geográficos. A elevada expressão de CXCL8, como parte do perfil de citocinas de TVT e sua correlação com o comportamento biológico, suscita interesse especial para a utilização de TVT como modelo de estudo em carcinogênese e desenvolvimento de tratamentos para doenças autoimunes.

Introduction: Transmissible venereal tumor (TVT) is a neoplasia characterized by the neoplastic cell not being host-specific. It relies on the interindividual transfer of clones of neoplastic cells originating thousands of years ago in a canine founder individual. It utilizes mechanisms involved in metastasis for its transmission. Its behavior, similar to malignant neoplasms, and its ability to evade the immune system are subjects of ongoing research. In this study, we evaluated TP53 gene mutations related to P53 expression. CXCL8 expression is considered crucial for immunovigilance modulation and the interaction of tumor cells with endothelial cells in angiogenesis. Methods: TP53 mutation analysis via Sanger Sequencing. P53 and CXCL8 immunophenotyping via Immunohistochemistry for 18 cases from the Andean region of Colombia and 17 cases from São Paulo, Brazil. Results: The TP53 sequence excluded nonsynonymous mutations. Nevertheless, TVT exhibited nucleotide polymorphism accepted as synonymous mutations that presented different codons in the two geographic regions. P53 immunophenotyping showed low expression in tumor cells in both groups, suggesting a low apoptotic rate. The study identified high CXCL8 expression, providing a deeper understanding of the cytokine profile that this tumor employs to modulate its survival. Discussion: The discovery of synonymous mutations in the TP53 gene may be related to the transcription and subsequent quantification of P53. However, the statistical model in this study found no evidence linking low P53 expression to the presence or absence of mutations. Additionally, the codon location of the three mutations found was different according to the geographic region, and cases with mutations had P53 expression in the cytoplasm. The high expression of CXCL8 and other cytokines evaluated in parallel studies suggests that this cell leverages the pleiotropic and antagonistic capacity of these molecules to ensure its survival. Conclusions: Synonymous mutations in TP53 in TVT exhibit regional differences, indicating the existence of epigenetic and environmental factors that have led to the selection of subclones in different geographic environments. Moreover, mutations are associated with P53 expression in the cytoplasm, possibly due to issues in phosphorylation and protein transport. The elevated expression of CXCL8, as part of TVT's cytokine profile and its correlation with biological behavior, sparks special interest in using TVT as a study model in carcinogenesis and the development of treatments for autoimmune diseases.