Diversidade bacteriana ruminal de novilhos Nelore em pasto, suplementados com diferentes fontes proteicas no período seco

Abstract

Uma importante estratégia para suprir as deficiências nutricionais da forragem no período da seca, para animais na fase de recria, é suplementá-los com fontes proteicas, uma vez que este nutriente é escasso em forrageiras tropicais neste período. Com o presente estudo objetivou-se caracterizar a diversidade bacteriana de novilhos Nelore suplementados com proteína não degradável no rúmen (PNDR - glúten de milho) ou proteína degradável no rúmen (PDR -ureia), em pastagens, durante o período das secas. Foram utilizados 8 novilhos da raça Nelore, castrados, canulados no rúmen e duodeno, dispostos em quatro quadrado latino (2x2, 2 tratamentos e 2 períodos) simultâneos, mantidos um animal em cada piquete experimental. O experimento consistiu em dois tratamentos, e dois períodos experimentais de 27 dias cada (26 dias de adaptação do animal ao tratamento e 1 dias de coleta), sendo SMU (PDR): animais em pastagem que receberam ureia e sal mineral; GLU (PNDR): animais suplementados com 0,3% do peso vivo com glúten de milho 60 e sal mineral. As coletas para diversidade bacteriana do ambiente ruminal ocorreram antes da suplementação dos animais, através da cânula ruminal, no sétimo dia de cada período de coleta (27º dia de cada período experimental). A extração do DNA foi realizada utilizando 200 mg do pellet microbiano e o Kit de extração Quick DNA™ Fecal/Soil Microbe Miniprep Kit. O método utilizado para a identificação e quantificação da diversidade bacteriana ruminal foi o sequenciamento da região V4/V5 do gene 16S rRNA bacteriano, os dados obtidos foram processados por meio do QIIME software package. Os resultados foram analisados em delineamento quadrado latino (2x2) quadruplicado. O modelo para análise estatística incluiu o efeito fixo de tratamento, e como efeitos aleatórios corrigir como anterior. A PNDR não influenciou a riqueza e diversidade e composição bacteriana no rúmen. O filo Firmicutes foi mais abundante no rúmen dos animais quando receberam SMU (p=0,018). A suplementação proteica com PNDR (glútem de milho) ou PDR (ureia) modificou o ambiente ruminal a nível de filo.

Important strategy to overcome nutritional deficiencies of forage in the dry period, for animals in the rearing phase, is supplement with protein sources, because this nutrient is scarce in tropical forages in this period. The present study aimed to characterize the bacterial diversity of Nelore steers supplemented with rumen undegradable protein (RUP - corn gluten) or rumen degradable protein (RDP -urea), in pastures, during the dry period. Eight castrated Nelore steers, cannulated in the rumen and duodenum, were used, arranged in four simultaneous latin squares (2x2, 2 treatments and 2 periods), with one animal in each experimental plot. The experiment consisted of two treatments, and two experimental periods of 27 days each (26 days of animal adaptation to treatment and 1 day of collection), being SMU (RDP): animals in pasture that received urea and mineral salt; GLU (RUP): animals supplemented with 0.3% of live weight with corn gluten 60 and mineral salt. The collections for bacterial diversity of the ruminal environment occurred before supplementation of the animals, through the ruminal cannula, on the seventh day of each collection period (27th day of each experimental period). DNA extraction was performed using 200 mg of the microbial pellet and the Quick-DNA™ Fecal/Soil Microbe Miniprep Extraction Kit. The method used for the identification and quantification of rumen bacterial diversity was sequencing of the V4/V5 region of the bacterial 16S rRNA gene, the data obtained were processed using the QIIME software package. The results were analyzed in a quadruplicate (2x2) Latin square design. The model for statistical analysis included the fixed effect of treatment, and as random effects the effect of animal, and period. RUP PNDR did not influence bacterial richness, diversity and composition in the rumen. The phylum Firmicutes showed significant difference between treatments (p=0.018), being more abundant in the rumen of animals when receiving SMU. Protein supplementation with RUP (corn gluten) or RDP (urea) modified the rumen environment at the phylum level.