Publicação: Estudo fitoquímico e atividades biológicas do extrato etanólico das folhas de Jatropha aethiopica (Euphorbiaceae)
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Data
Autores
Orientador
Santos, Lourdes Campaner dos 
Rinaldo, Daniel
Coorientador
Pós-graduação
Química - IQAR 33004030072P8
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Tese de doutorado
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
A espécie Jatropha aethiopica (Euphorbiaceae) é usada em Cuba como planta ornamental e medicinal, conhecida como "Chaya" ou "mata diabetes". As pessoas garantem que o chá feito das folhas é capaz não só controlar o diabetes, mas também curá-la. Este trabalho teve como objetivo o estudo químico através da identificação, isolamento e elucidação estrutural dos metabólitos presentes no extrato etanólico das folhas de Jatropha aethiopica, assim como avaliar a atividade hipoglicemiante e a citotoxicidade desse extrato. Técnicas cromatográficas de isolamento e purificação (Sephadex LH-20, Cromatografia Líquida de Alta Eficiência acoplada ao Detector de Arranjo de Diosdos (CLAE-DAD), Cromatografia Líquida de Media Pressão (CLMP)), assim como a otimização desses métodos, possibilitaram o isolamento e caracterização química de 12 substâncias utilizando técnicas espectroscópicas e espectrométricas. Foram quantificados por CLAE-DAD tanto no extrato etanólico quanto na fração fenólica, os metabolitos secundários identificados majoritariamente no DAD. A metodologia analítica foi validada segundo as normas da ANVISA. A análise por Cromatografia Líquida acoplada a espectrometria de massas com interface de ionização por electrospray (LC-ESI-MS/MS), foi útil na confirmação da presença de vários isômeros de flavonoides e compostos nitrogenados, bem como, na determinação do possível mecanismo de fragmentação dessas substâncias. A atividade hipoglicemiante foi determinada usando um modelo de camundongo swiss, no entanto a atividade citotóxica foi determinada mediante os testes colorimétricos MTT (Brometo de 3-((4,5-dimetiltiazol)-2, il)-2,5-difeniltetrazólio) e XTT (Hidrato de benzenilsulfito 3’-[1-[(fenilamino]-carbonil-3,4-tetrazólio]-bis-(4-metoxi-6-nitro) de sódio) para linhagens tumorais e células normais, respectivamente. Das 27 substâncias identificadas a partir do extrato etanólico das folhas de J. aethiopica, foram isoladas e caracterizadas duas substâncias nitrogenadas, três ácidos fenólicos e sete flavonoides: 3-carboxiamida-1-metilpiridinium (1); N-(2-aminobutilamil)-N-(1-hidroxi-1-isopropil)-N-2-oxo-5-amino-5-pentanol (2); ácido protocatecuico (3); quercetina 3-O-β-D-galactopiranosídeo [α-L-ramnopiranosil-(1'''→2'')]-[α-L-ramnopiranosil-(1''''→6'')] (4); quercetina 3-O-β-D-glicopiranosídeo [α-L-ramnopiranosil-(1'''→2'')]-[α-L-ramnopiranosil-(1''''→6'')] (5); canferol 3-O-β-D-galactopiranosídeo [α-L-ramnopiranosil-(1'''→4'')]-[α-L-ramnopiranosil-(1''''→6'')], descrita pela primeira vez nesse trabalho (6); canferol 3-O- β-D-glicopiranosídeo [α-L-ramnopiranosil-(1'''→2'')]-[α-L-ramnopiranosil-(1''''→6'')] (7); rutina (8); canferol-3-O-rutinosídeo (9); ácido cafeico (10); ácido p-cumárico (11) e quercetina (12). Na quantificação demonstrou-se os altos conteúdos de flavonoides que apresenta o extrato etanólico (62,5 mg g-1) e a fração fenólica (61,7 mg g-1). As demais estruturas das substâncias identificadas por análises de LC-ESI-MS, correspondem aos isômeros dos flavonoides isolados e outras estruturas ainda não identificadas. O estudo de atividade hipoglicemiante monstrou a potencialidade das folhas de J. aethiopica. Tanto os testes antitumorais quanto os de viabilidade celular mostraram a baixa citotoxicidade dessa espécie pelo qual pode-se sugerir que a mesma possa ser utilizada em formulações de tintura. Portanto, os dados desse trabalho podem auxiliar no potencial uso de J. aethiopica pela população.
Resumo (inglês)
Jatropha aethiopica (Euphorbiaceae) leaves are used in Cuba both as ornamental and medicinal plant . This species is known as "C haya" or " mata diabetes". People ha ve hypothesized that consumption of the tea made from fresh leaves is capable of not only control ling diabetes but also curing it. The main of this work was to study the chemical composition through the identification, is olation and structural elucidation of the metabolites present in the ethanolic extract of the leaves of J. aethiopica , as well as to evaluate the antihyperglycemic activity and cytotoxicity of this extract. Isolation and purification chromatography techniq ues (Sephadex LH - 20, High Performance Liquid Chromatography coupled to the Photodiode Array Detector ( HPLC - PA D), Medium Pressure Liquid Chromatography (MP LC )), as well as the optimization of these methods, allowed the isolation and chemical characterizatio n of 12 substances using spectroscopic and spectro metric techniques. T he secondary metabolites identified by DAD detection at the ethanolic extract and the phenolic fraction, were quantified. The analytical methodology was validated according to ANVISA sta ndards. Liquid Chromatography coupled to mass spectrometry with electrospray io nization interface (HPLC - ESI - MS/ MS) analysis , was useful in confirming the presence of several isomers of flavonoids and nitrogen compounds, in addition to determin ate the p r o ba ble fragmentation mec hanism of these substances. H ypoglycemic activity was determined using a swiss mouse model; nevertheless , cytotoxic activity was determined by the MTT ( 3 - (4,5 - dimethylthiazol - 2 - yl) - 2,5 - diphenyltetrazolium bromide ) and XTT ( (sodium 2,3, - bis(2 - methoxy - 4 - nitro - 5 - sulfophenyl) - 5 - [(phenylamino) - carbonyl] - 2H - tetrazolium ) colorimetric assays for tumor and normal cell lines, respectively. Of the 2 7 substances identified from the ethanolic extract of the J. aethiopica leaves, two nitrogenous subs tances, three phenolic acids and seven flavonoids were isolated and characterized: 3 - carbamoyl - 1 - methylpyridin ium ( 1 ); 3 - amino - 4 - ((5 - amino - 5 - hydroxy - 2 - oxopentyl) (1 - hydroxy - 2 - methylpropyl) amino) butanamide ( 2 ); protocatec h uic acid ( 3 ); quercetin 3 - O - α - L - r h amnop y ranos y l - (1 ''' →2 '' ) - [ α - L - r h amnop y ranos y l - (1 '''' →6 '' )] - β - D - galactop y ranoside ( 4 ); quercetin 3 - O - α - L - r h amnop y ranos y l - (1 ''' →2 '' ) - [ α - L - r h amnop y ranos y l - (1 '''' →6 '' )] - β - D - gl u cop y ranoside ( 5 ); kaemp ferol 3 - O - α - L - r h amnop y ranos y l - (1 ''' →4 '' ) - [ α - L - r h amnop y r anos y l - (1 '''' →6 '' )] - β - D - galactop y ranoside, descrita pela primeira vez nesse trabalho ( 6 ); kaemp ferol 3 - O - α - L - r h amnop y ranos y l - (1 ''' →2 '' ) - [ α - L - r h amnop y ranos yl - (1 '''' →6 '' )] - β - D - glu cop y ranoside ( 7 ); rutin ( 8 ); kaemp ferol - 3 - O - rutinoside ( 9 ); caffeic acid ( 1 0 ); p - cumaric acid ( 1 1 ) e quercetin ( 1 2 ). H igh content of the quantifi ed flavonoids in the ethanolic extract (62.5 mg g - 1 ) and in the phenolic fraction (61.7 mg g - 1 ) were demonstrated. The remaining structures of the identified substances by the LC - ESI - MS analysis correspond to isomers of the isolated flavonoids and other struc tur es not identified. The hypoglycemic activity study showed the potentiality of J. aethiopica leaves. Both antitumor and cell viability tests showed the low cytotoxicity of this spec ies by which suggest it the use in tincture formulations. Therefore, the data of this work can help in the potential use of J. aethiopica by the population.
Descrição
Palavras-chave
Jatropha aethiopica, Atividade hipoglicemiante, Quantificação, Flavonoides triglicosídeos, Substâncias nitrogenada
Idioma
Português
