Efeito citotóxico transdentinário, grau de conversão e resistência de união à dentina de cimentos resinosos fotoativados

Abstract

O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade transdentinária (CT), o grau de conversão (GC) e a resistência de união (RU) à dentina de cimentos resinosos fotoativados diretamente ou através de facetas cerâmicas (FC) com 1 mm de espessura. Células odontoblastóides MDPC-23 foram cultivadas sobre a superfície pulpar de discos de dentina adaptados em câmaras pulpares artificiais e em compartimentos de placas de acrílico. Os seguintes procedimentos foram realizados na superfície oclusal dos discos: CN- controle negativo (sem tratamento); SB- Single Bond Universal; TN- Tetric N-Bond Universal; AU- Ambar Universal APS; RV- RelyX Veneer; VE- Variolink Esthetic LC; AV- Allcem Veneer APS; RV+FC; VE+FC; AV+FC. Todos os materiais foram usados de acordo com as recomendações de seus fabricantes. A viabilidade (AlamarBlue assay) e morfologia (MEV) das células aderidas aos discos foi avaliada, e os extratos (meio de cultura + componentes dos materiais que se difundiram pela dentina) foram coletados e imediatamente aplicados sobre as células previamente cultivadas nas placas de 96 compartimentos. As células foram avaliadas quanto a viabilidade (Live-Dead assay), adesão e espalhamento (AE; F-actina), atividade de fosfatase alcalina (ALP, Timolftaleína) e formação de nódulos de mineralização (NM; Alizarin Red). O pH dos extratos obtidos de cada material foi determinado ao longo de 24 horas. O GC do topo e base de cada amostra fotoativada diretamente ou através da faceta foi avaliado por Espectroscopia de Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR). Para o teste de RU, a dentina condicionada com ácido fosfórico foi hibridizada com os sistemas adesivos relacionados com os respectivos cimentos resinosos, os quais foram fotopolimerizados diretamente ou através da FC. Os dados de CT, GC e RU foram submetidos ao teste ANOVA, complementado pelo pós-teste de Tukey (α=5%). De maneira geral, em todos os grupos onde os materiais resinosos foram usados, com exceção do grupo RV, foi observado redução da viabilidade, AE, bem como menor atividade de ALP e formação de NM em comparação ao CN (p<0,05). Os grupos onde o sistema adesivo AU foi usado isoladamente ou em associação com o cimento AV, apresentaram os maiores efeitos deletérios para as células MDPC-23. O pH dos materiais não influenciou a citotoxicidade. A interposição da FC entre a fonte de luz e os materiais resultou em menor GC. Não foi determinada diferença de RU à dentina para todos os cimentos resinosos avaliados, independente da interposição ou não da FC (p>0,05). De acordo com a metodologia empregada neste estudo, foi possível concluir que o cimento RV, associado ao sistema adesivo SB causou o menor efeito tóxico transdentinário sobre as células pulpares MDPC-23. A interposição de FC entre a fonte de luz e os cimentos resinosos não aumentou a CT ou interferiu na RU destes materiais à dentina, porém reduziu o GC.

The aim of this study was to assess the transdentinal cytotoxicity (TC), degree of conversion (DC), and bond strength (μSBS) to dentin of light-cured resin cements, which were photoactivated or not through 1 mm thick ceramic veneer (CV). MDPC-23 odontoblast-like cells were seeded on the pulpal surface of dentin discs adapted to artificial pulp chambers and in acrylic plate compartments. The following procedures were performed on the occlusal surface of the discs: NC- negative control (no treatment); SB- Single Bond Universal; TN- Tetric N-Bond Universal; AU- Ambar Universal APS; RV- RelyX Veneer; VE- Variolink Esthetic LC; AV- Allcem Veneer APS; RV+CV; VE+CV; AV+CV. All dental materials were used according to manufacturer’s recommendations. The viability (AlamarBlue assay) and morphology (SEM) of the cells adhered to the discs was assessed and the extracts (culture medium + components that diffused through the dentin discs) were collected and immediately applied on previously seed cells in 96-well plates. The cells were evaluated concerning their viability (Live-Dead assay), adhesion and spreading (AS; F-actin), alkaline phosphatase activity (ALP; Timolphthalein) and mineralized nodules formation (MN; Alizarin Red). The pH of the extracts obtained from each material was determined over 24 hours. The DC of the top and bottom of each light-cured sample photoactivated directly or through the CV was evaluated by Fourier Transformed Infrared Spectroscopy (FTIR). For the microshear bond strength testing, acid-conditioned dentin was hybridized with the adhesive systems related to their respective resin cements, which were light-cured directly or through CV. The TC, DC and μSBS data were analyzed by ANOVA, complemented by the Tukey post-test (α=5%). Overall, in those groups in which the resinous materials were used, except the RV group, reduced the viability, adhesion and spreading of cells, as well as lower ALP activity and MN formation was observed in comparison with NC (p<0.05). The use of AU adhesive system associated or not with AV cement produced the greatest adverse effects for MDPC-23 cells. The pH from the materials did not influence the cytotoxicity. The interposition of CV between the light source and the resin cements resulted in lower DC. Concerning the μSBS to dentin, no statistical difference was observed for all resin cements, regardless the interposition or not of the CV (p>0.05). According to the methodology used in this in vitro study, one can conclude that the RV cement, associated with the SB adhesive system, caused the least transdentinal toxic effect to the odontoblast-like MDPC-23 cells. The interposition of the CV between the light source and the resin luting cements did not interfere with the TC and μSBS of these materials to dentin, however it reduced the DC.