Isolamento de Cryptococcus spp. em amostras ambientais de Penápolis, SP

Abstract

As espécies de Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii são os agentes etiológicos da criptococose, que se caracteriza por ser uma infecção sistêmica de caráter crônico e com potencial zoonótico. São micro-organismos oportunistas, encontrados em substratos de origem animal e vegetal amplamente distribuídos. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença de microfocos de C. neoformans e C. gattii, a partir de amostras ambientais da cidade de Penápolis – SP. Foram coletadas 100 amostras provenientes de praças e locais públicos, escolhidos de forma aleatória, de cobertura abrangente à área da cidade. Após a coleta as amostras foram devidamente acondicionadas e encaminhadas ao laboratório de microbiologia da Faculdade de Medicina Veterinária (Unesp/FMVA), onde foram processadas e semeadas em meios de ágares semente de Níger e Sabouraud dextrose acrescido de cloranfenicol e incubadas a 30ºC em estufa microbiológica por um período não inferior a cinco dias e monitoradas diariamente. As colônias que apresentaram crescimento macromorfológico sugestivo para Cryptococcus spp. foram coradas com tinta nanquim e lactofenol azul de algodão para análise micromorfológica e posteriormente submetidas aos testes bioquímicos: Hidrólise da ureia, Termotolerância e Ágar CGB (L-canavanina-glicina-azul de bromotimol). Os resultados demonstraram a presença de 14% (14/100) de C. gattii sendo negativo para cultivo e isolamento de C. neoformans. As amostras que apresentaram crescimento positivo foram provenientes das espécies Ficus benjamina, Syzygium cumini, Caesalpinia pluviosa, Licania tomentosa, Bauhinia forficata, Pachira aquática, Artocarpus heterophyllus, Lagerstroemia speciosa e Samanea tubulosa. O local de maior isolamento para o fungo ocorreu em amostras oriundas da estrada municipal Boa Esperança com incidência de 28,57% (4/14). Conclui-se que o C. gattii encontra-se presente em amostras ambientais constituindo-se em microfocos, provenientes de árvores de locais Públicos da cidade de Penápolis.

The species of Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii are the etiological agents of cryptococcosis, which is characterized as a chronic systemic infection with zoonotic potential. They are opportunistic microorganisms, found in widely distributed substrates of animal and vegetal origin. The objective of this work was to identify the presence of microfocus of C. neoformans and C. gattii, from environmental samples in the city of Penápolis - SP. We collected 100 samples from public squares and public places, randomly chosen to cover the city area. After collection, the samples were duly conditioned and sent to the microbiology laboratory of the Faculty of Veterinary Medicine (Unesp / FMVA), where they were processed and seeded in media of Niger seed agar and Sabouraud dextrose agar plus, chloramphenicol and incubated at 30ºC in a microbiological oven for a period of not less than 5 days and monitored daily. The colonies that presented macromorphological growth suggestive of Cryptococcus spp. were stained with nanquim ink and blue cotton lactophenol for micromorphological analysis and subsequently submitted to biochemical tests: Urea hydrolysis, Thermotolerance and Agar CGB (L-canavanine-glycine-bromothymol blue). The results demonstrated the presence of 14% (14/100) of C. gattii being negative for cultivation and isolation of C. neoformans. The samples that showed positive growth were from the species Ficus benjamina, Syzygium cumini, Caesalpinia pluviosa, Licania tomentosa, Bauhinia forficata, Pachira aquatica, Artocarpus heterophyllus, Lagerstroemia speciosa and Samanea tubulosa. The site of greatest isolation for the fungus occurred in samples from the Boa Esperança municipal road with incidence of 28.57% (4/14). It was concluded that C. gattii is present in environmental samples constituting in microfocus, coming from trees of public places of the city of Penápolis.