Efeito antimicrobiano isolado e sinérgico dos extratos de alcaçuz e guaçatonga contra cepa multirresistente de Klebsiella pneumoniae

Abstract

Avaliar in vitro a atividade antimicrobiana dos extratos glicólicos de alcaçuz (Glycyrrhiza glabra L.) e guaçatonga (Casearia sylvestris) isolados e combinados sobre culturas planctônicas e biofilmes de cepas multirresistente epadrão de Klebsiella pneumoniae. Material e métodos: A análise antimicrobiana dos extratos foi realizada pelo teste de ensaio de microdiluição, preconizado pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), norma M7-A9, e a combinação dos extratos foi analisada pela técnica checkerboard. As concentrações mais efetivas foram aplicadas sobre biofilmes por 5 min e 24 h de tratamento, sendo a viabilidade celular quantificada pelo teste MTT. Os dados foram analisados estatisticamente por ANOVA complementado por Tukey Test (5%). Resultados: Os valores obtidos demonstraram CIM e CMM de 50 mg/mL (alcaçuz) e de 3,1 mg/mL (guaçatonga) frente às cepas de K. pneumoniae. Quando combinados, os extratos apresentaram quatro concentrações aditivas e duas sinérgicas para a cepa clínica. Em biofilmes, o extrato de alcaçuz reduziu a viabilidade em 83,6% e 66,6% após 5 min de contato com a cepa padrão e clínica, respectivamente. Após 24h de tratamento, as reduções chegaram a 84,7% (cepa 820195). Já guaçatonga reduziu 37,5% do biofilme da cepa padrão (5 min de contato). Conclusão: Os extratos de alcaçuz e guaçatonga isolados apresentaram ação antimicrobiana para as cepas de K. pneumoniae e quando combinados apresentaram efeitos aditivos e sinérgicos contra a cepa clínica multirresistente. Alcaçuz possui ação antibiofilme contra as duas cepas nos diferentes tempos de contato, já guaçatonga apresentou ação antibiofilme somente para a cepa padrão após 5 min de tratamento.

To evaluate in vitro the antimicrobial activity of hydroalcoholic extracts of licorice (Glycyrrhiza glabra L.) and guaçatonga (Casearia sylvestris) isolated and combined on planktonic cultures and biofilms of multidrug-resistant and standard strains of Klebsiella pneumoniae. Material and methods: The antimicrobial analysis of the extracts was performed using the microdilution test, recommended by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), M7-A9 standard, and the combination of extracts was analyzed by the checkerboard technique. The most effective concentrations were applied on biofilms for 5 min and 24 h of treatment, and cell viability was quantified by the MTT test. Data were statistically analyzed by ANOVA complemented by Tukey Test (5%). Results: The values obtained showed MIC and MMC of 50 mg/mL (licorice) and 3.1 mg/mL (guaçatonga) against the strains of K. pneumoniae. When combined, the extracts showed four additive andtwo synergistic concentrations for the clinical strain. In biofilms, licorice extract reduced viability by 83.6% and 66.6% after 5 min of contact with the standard and clinical strain, respectively. After 24h of treatment, the reductions reached 84.7% (strain 820195). On the other hand, guaçatonga reduced 37.5% of the biofilm of the standard strain (5 min of contact). Conclusion: The isolated licorice and guaçatonga extracts showed antimicrobial action against the strains of K. pneumoniae and when combined they showed an additive and synergistic effect against the clinical strain. Licorice has antibiofilm action against both strains at different contact times, while guaçatonga showed a significant reduction only for the standard strain after 5 min of treatment.