Publicação: As metaloproteinases MMP-2 e MMP-9 na fisiopatologia da epididimite
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Data
Autores
Orientador
Silva, Erick José Ramo da 
Coorientador
Andrade, Alexandre Dorth de
Pós-graduação
Curso de graduação
Botucatu - IBB - Ciências Biomédicas
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
A epididimite é uma condição inflamatória que afeta o epidídimo, órgão crucial na maturação pós-testicular dos espermatozoides, podendo comprometer a integridade do órgão e resultar em alterações espermáticas e potencialmente levar à infertilidade masculina. As metaloproteinases de matriz (MMPs), como a MMP-2 e MMP-9, desempenham papéis essenciais no processo inflamatório ao ativar e inativar citocinas, recrutar células inflamatórias e regular a fibrogênese. Apesar do intenso remodelamento fibrótico observado no epidídimo de homens com epididimite bacteriana e em modelos experimentais em roedores, o papel da MMP-2 e MMP-9 na fisiopatologia da epididimite
permanece pouco explorado. Neste estudo, investigamos a atividade catalítica de MMP- 2 e MMP-9 na epididimite induzida por lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli em camundongos C57BL/6. A epididimite foi induzida pela injeção de LPS ultrapuro (50 µg) ou solução salina estéril (controle) no interstício do segmento inicial ou da cauda do epidídimo (n=3/grupo, CEUA nº9371270522) sob anestesia geral. Os camundongos foram eutanasiados em diferentes intervalos de tempo e os epidídimos foram processados para ensaios de zimografia. As bandas correspondentes às isoenzimas proMMP-9 (~92 kDa), MMP-9(~84 kDa), proMMP-2 (~72 kDa) e MMP-2 (~62 kDa) foram quantificadas por densitometria, seguida de análise estatística pelo teste t de Student. O padrão das bandas no gel revelou atividade basal de MMP-2 e MMP-9 em todas as regiões do epidídimo. No segmento inicial, o LPS induziu redução da atividade da proMMP-9 após 6h (p=0,049), seguido de aumento após 72h (p=0,003) e 7 dias (p=0,015) em relação ao grupo controle- salina. Já a MMP-9, o LPS induziu aumento de sua atividade após 72 h (p=0,047) no segmento inicial. Na cauda, o LPS induziu redução da atividade da proMMP-9 após 6h (p=0,002), seguido de aumento após 72h (p=0,007). Ademais, o LPS induziu redução da atividade da MMP-9 após 24 h (p=0,048) na cauda
do epidídimo. Em paralelo, o LPS induziu redução da atividade da proMMP-2 após 24h (p=0,008) na cauda do epidídimo, mas aumento da atividade da MMP-2 após 7 dias (p=0,029), sem impacto significativo da atividade dessas isoenzimas no segmento inicial. A modulação temporal da atividade de MMP-2 e MMP-9 em resposta ao LPS, conforme a região do epidídimo, sugere seu envolvimento em diferentes estágios da epididimite e destaca seu papel nas alterações regionais associadas à doença. Esse conhecimento pode abrir novas perspectivas de terapias adjuvantes para mitigar as sequelas da epididimite sobre a fertilidade masculina.
Resumo (inglês)
Epididymitis is an inflammatory condition affecting the epididymis, a crucial organ in the post-testicular maturation of spermatozoa, potentially compromising organ integrity and leading to sperm alterations and male infertility. Matrix metalloproteinases (MMPs), such as MMP-2 and MMP-9, play essential roles in the inflammatory process by activating and inactivating cytokines, recruiting inflammatory cells, and regulating fibrogenesis. Despite intense fibrotic remodeling observed in the epididymis of men with bacterial epididymitis and rodent experimental models, the role of MMP-2 and MMP-9 in the pathophysiology of epididymitis remains poorly understood. In this study, we investigated the catalytic activity of MMP-2 and MMP-9 in lipopolysaccharide (LPS)-induced epididymitis in C57BL/6 mice. Epididymitis was induced by injecting ultrapure LPS (50 µg) or sterile saline solution (control) into the interstitium of the initial segment or cauda epididymidis (n=3/group, CEUA no. 9371270522) under general anesthesia. Mice were euthanized at different time points, and their epididymides were processed for zymography assays. Bands corresponding to proMMP-9 (~92 kDa), MMP-9 (~84 kDa), proMMP-2 (~72 kDa), and MMP-2 (~62 kDa) isoenzymes were quantified by densitometry, followed by statistical analysis using the Student's t-test. The gel band pattern revealed basal activity of MMP-2 and MMP-9 in all epididymal regions. In the initial segment, LPS induced a reduction in proMMP-9 activity after 6h (p=0.049), followed by an increase after 72h (p=0.003) and 7 days (p=0.015) compared to the control-saline group. For MMP-9, LPS increased activity after 72h (p=0.047) in the initial segment. In the cauda epididymidis, LPS reduced proMMP-9 activity after 6h (p=0.002), followed by an increase after 72h (p=0.007). Furthermore, LPS reduced MMP-9 activity after 24h (p=0.048) in the cauda of the epididymidis. Concurrently, LPS reduced proMMP-2 activity after 24h (p=0.008) in the cauda of the epididymidis but increased MMP-2 activity after 7 days (p=0.029), with no significant impact on the activity of these isoenzymes in the initial segment. The region-specific temporal modulation of MMP-2 and MMP-9 activity in the epididymis to LPS challenge suggests their involvement in different stages of epididymitis and highlights their role in the regional changes associated with the disease. This knowledge may open new perspectives for adjuvant therapies to mitigate the sequelae of epididymitis on male fertility.
Descrição
Palavras-chave
Epidídimo, Epididimite, Inflamação, Metaloproteinase de matriz, Saúde reprodutiva masculina
Idioma
Português
Como citar
FERREIRA, Camila Teixeira. As metaloproteinases de matriz MMP-2 e MMP-9 na fisiopatologia da epididimite. Orientador(a): Erick José Ramo da Silva. Coorientador(a): Alexandre Dorth de Andrade. 2023. 23 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Ciências Biomédicas) - Departamento de Biofísica e Farmacologia, Instituto de Biociências de Botucatu, Universidade Estadual Paulista (Unesp), Botucatu, 2023.
