Publicação: Ocorrência do Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV 5) em amostras sanguíneas de tartarugas verdes (Chelonia mydas) de cinco estados brasileiros
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Data
Autores
Orientador
Teixeira, Rodrigo Hidalgo Friciello
Coorientador
Mota, Ligia Souza Lima Silveira da 
Pós-graduação
Animais Selvagens - FMVZ 33004064090P9
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
A fibropapilomatose (FP) é uma enfermidade neoplásica de caráter benigno e ocorrência circuntropical que afeta tartarugas marinhas em todos os oceanos. A doença tem alta relevância no meio científico, por ser considerada uma notável ameaça a sobrevivência destes animais, principalmente da tartaruga-verde (Chelonia mydas). Estudos moleculares têm detectado a presença do Chelonid alphaherpesvirus 5 associado a tecidos tumorais, sugerindo o ChHV 5 como agente etiológico da fibropapilomatose, embora exista um consenso na literatura de que a FP tem caráter multifatorial. A presença do ChHV 5 em ambientes marinhos contaminados por ação antrópica, associada a resposta do sistema imune individual e genética de cada organismo, são fatores que desempenham papel importante na manifestação dos tumores e evolução da doença. Particularidades envolvendo infecção e disseminação do ChHV 5 em tartarugas marinhas ainda não foram elucidados. Porém, testes moleculares de amplificação gênica por reação em cadeia polimerase (PCR) demonstraram a ocorrência do Chelonid alphaherpesvirus 5 não somente em neoformações cutâneas, como também em pele, sangue, secreções e órgãos parenquimatosos ou intra-cavitários de tartarugas marinhas com tumores característicos da FP e aparentemente saudáveis, sugerindo infecções subclínicas ou latentes. Desta maneira, supõe-se que tartarugas marinhas sintomáticas e assintomáticas, possam atuar como reservatórios do vírus. O presente estudo teve como objetivo investigar a ocorrência do ChHV 5 em amostras sanguíneas de tartarugas verdes (C. mydas) juvenis de vida livre acometidas ou não pela FP, por meio da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). Os animais envolvidos neste estudo foram capturados em diferentes regiões costeiras abrangendo cinco estados brasileiros: BA, ES, RJ, SC e RS. No total, 157 tartarugas marinhas da espécie Chelonia mydas foram capturadas, e 43 apresentavam tumores cutâneos característicos de FP, indicando uma prevalência geral da doença de 27% (43/157). Individualmente a prevalência da FP entre os animais capturados foi de 8,8% (4/45) na Bahia, 53,3% (24/45) no Espírito Santo, 35% (7/20) no Rio de Janeiro, 35,7% (5/14) em Santa Catarina e 9% (3/33) no Rio Grande do Sul. Todos os animais tiverem amostras sanguíneas coletadas, dados biométricos registrados e passaram por exame físico geral. Em tartarugas marinhas que apresentavam tumores cutâneos, foram registrados quantidade, local e tamanho dos mesmos. Para investigar a presença do DNA viral nas amostras sanguíneas coletadas por meio da técnica de PCR foram utilizados os conjuntos de primers UL-18 e UL-30, que possuem diferentes genes alvos e tamanhos (pb). UL-18 que tem como gene-alvo a proteína do capsídeo do ChHV 5 detectou o vírus em 13/157 amostras sanguíneas. Em contrapartida não foram detectadas sequências do gene da DNA polimerase, referente ao primer UL-30, em nenhuma das amostras sanguíneas analisadas. A partir dos resultados obtidos, conclui-se que o conjunto de primers UL-18 foi mais sensível para detecção do ChHV 5. E que, apesar da presença do vírus no sangue não ter sido abundante, foi demonstrada a circulação do ChHV 5 na corrente sanguínea de animais juvenis de vida livre com tumores sugestivos de FP e assintomáticos, evidenciando disseminação hematógena do patógeno.
Resumo (inglês)
Fibropapillomatosis is a neoplasic disease that affects sea turtles worldwide in panzootic proportions. FP has cincuntropical distribution and is characterized by a single or multiple cutaneous growths with occasional appearance in visceral organs. FP is a major concern to the scientific community, as it is considered a serious threat to the survival of sea turtles. Although tumors are histologically benign, depending on their size, location and degree of invasiveness, they can often cause affected animals to become debilitated. Tumours may compromise natural behaviour by hampering feeding, vision, swimming ability and in case of visceral tumors, leading to organ failure or physiological imbalances. Fibropapillomatosis has been reported in all sea turtle species, but it mainly affects green turtles (Chelonia mydas). Most evidence points to a herpesviral etiology for FP, with the majority of molecular data suggesting that Chelonid alphaherpesvirus 5 (ChHV 5) is the main causative agent of the disease. Even though FP pathogenesis is not yet fully elucidated, it is known that multiple factors play a role in tumour development and disease progression, including ChHV 5 infection as well as, environmental and immune-related cofactors. Several studies have detected the presence of ChHV 5 through molecular technologies such as polymerase chain reaction (PCR) not only in epithelial cells of FP tumours but also in skin, blood, secretions and organs of tumoured and nontumoured sea, suggesting latent and subclinical. Thus, symptomatic and asymptomatic sea turtles may be considered ChHV 5 reservoirs and serve as potential source of viral transmission. Thereby, this study aimed to investigate the occurrence of ChHV 5 on blood samples of juvenile wild caught tumoured and nontumoured green sea turtles through PCR. The specimens were captured along five states off the coast of Brazil: Bahia, Espírito Santo, Rio de Janeiro, São Paulo, Santa Catarina e Rio Grande do Sul. A total of 157 Chelonia mydas were captured and 43 of them had FP-like tumours, indicating a prevalence of 27% (43/157). All sea turtles went through physical examination and biometry was registered. 157 blood samples were collected for molecular analysis. On FP-afflicted turtles tumour count, location and size were registered. ChHV 5 was detected on 13/157 DNA extracts of blood samples by standard PCR essays, using primer set UL-18 that bind to ChHV 5 capsid protein gene. On the other hand, primer set UL-30 that bind to ChHV 5 DNA polymerase gene, did not detect the presence of the virus in any blood samples. The results indicate that detection sensitivity for primer set UL-18 is superior. Even though virus detection on blood samples were not abundant, the circulation of ChHV 5 on bloodstream of symptomatic and asymptomatic juvenile wild caught green sea turtles was demonstrated, confirming hematogenous dissemination.
Descrição
Palavras-chave
Tartarugas marinhas, Sangue, PCR, Herpesvirus, Neoplasia
Idioma
Português
