Avaliação do imiquimode associado ao itraconazol como alternativa terapêutica na esporotricose experimental em camundongos imunossuprimidos e imunocompetentes

Abstract

A esporotricose é uma importante micose com distribuição mundial que acomete seres humanos e animais. A infecção é causada geralmente por inoculação traumática de fungos do complexo Sporothrix schenckii (integrado por: S. brasiliensis, S. globosa, S. luriei, S. schenckii stricto sensu e S. chilensis), podendo apresentar-se sob as formas cutânea, linfocutânea e sistêmica, esta última sendo mais comumente observada em pacientes imunodeprimidos. As ferramentas terapêuticas atuais contra esporotricose requerem longos períodos de tratamento e estão associados a efeitos adversos frequentes, às vezes graves. O itraconazol é o medicamento de escolha para a esporotricose, porém as doses elevadas e longo período de tratamento podem causar efeitos colaterais. Por isso, há uma grande necessidade de desenvolver métodos mais efetivos e seguros para a terapia antifúngica, principalmente em pacientes imunodeprimidos. O imiquimode é um composto imunoestimulante que tem demonstrado ser efetivo na terapia contra tumores e infecções crônicas na pele. Além disso, tem mostrado atividade microbicida, incluindo antifúngica, porém não existem estudos avaliando seu efeito terapêutico na esporotricose. Nossos resultados apontam que foi possível observar que o imiquimode apresenta ação antifúngica direta e capacidade de inibir e desestruturar o biofilme de S. schenckii, porém quando associado com o itraconazol não houve um efeito sinérgico. Além disso, o imiquimode é capaz de induzir a produção de NO em macrófagos peritoneais e potencializar a atividade fungicida dessas células. No modelo utilizado, a carga fúngica se concentrou mais no linfonodo drenante e atingiu nível sistêmico em menor escala. Quando os animais foram imunossuprimidos com ciclofosfamida, houve redução da frequência de células T helper e citotóxicas e células B no baço, favorecendo a infecção localizada e sistêmica. Quando testado em um modelo de infecção subcutânea, em camundongos imunocompetentes e imunossuprimidos, o tratamento com imiquimode associado ao itraconazol foi efetivo para o tratamento da doença apenas nos animais imunossuprimidos. Portanto, nossos resultados demonstram que o imiquimode associado ao itraconazol pode ser uma possível alternativa para o tratamento da esporotricose em pacientes imunossuprimidos.

Sporotrichosis is an important mycosis with a global distribution that affects humans and animals. The infection is usually caused by traumatic inoculation of fungi from the Sporothrix schenckii complex (composed of S. brasiliensis, S. globosa, S. luriei, S. schenckii stricto sensu and S. chilensis) and can manifest as a cutaneous, lymphatic or systemic disease, the latter being more commonly observed in immunocompromised patients. Current therapeutic tools against sporotrichosis require long periods of treatment and are associated with frequent, sometimes severe side effects. Itraconazol is the drug of choice for sporotrichosis, but the high doses and long treatment period can lead to side effects. Therefore, there is a strong need for the development of more effective and safer methods for antifungal therapy, especially in immunocompromised patients. Imiquimod is an immunostimulating compound that has been shown to be effective in therapy against tumors and chronic skin infections. In addition, it has shown microbicidal activity, including against fungi, but there are no studies evaluating its therapeutic effect on sporotrichosis. Our results indicate that imiquimod exhibits direct antifungal activity and the ability to inhibit and destructure the S. schenckii biofilm, but when imiquimod is used in combination with itraconazole there is no synergistic effect. In addition, imiquimod is able to induce NO production in peritoneal macrophages and potentiate the fungicidal activity of macrophages. In the model used, the fungal burden was higher in the draining lymph node, reaching systemic level at a lower degree. When animals were immunosuppressed with cyclophosphamide, there was a reduction in the frequency of helper and cytotoxic T cells and B cells in the spleen, favoring both local and systemic infection. When tested in a subcutaneous infection model in immunocompetent and cyclophosphamide-immunosuppressed mice, treatment with imiquimod associated with itraconazole was effective in treating the disease only in immunosuppressed animals. Therefore, our results demonstrate that imiquimod associated with intraconazole may be a possible alternative for the treatment of sporotrichosis in immunosuppressed patients.