Potencial ação antitumorigênica e anti-inflamatória do óleo da Cannabis sativa em células de câncer de colo de útero

Abstract

O câncer de colo de útero é o terceiro tipo de câncer com maior prevalência no Brasil, segundo dados do Instituto Nacional de Câncer (INCA, 2024). Grande parte dos casos estão associados a sucessivas infecções por HPV de alto risco, especificamente os subtipos HPV16 e HPV18. A inflamação desempenha papel central na progressão do câncer, contribuindo para um microambiente tumoral favorável. O presente estudo buscou investigar a potencial ação antitumorigênica e anti-inflamatória do óleo de Cannabis sativa (OCS) sobre linhagens celulares de câncer de colo de útero (CaSki e SiHa). O tratamento com o fitoterápico induziu alterações morfológicas em ambas as linhagens, tanto no período de 24h, como de 48h a partir da concentração de 5µM. Na linhagem SiHa, houve condensação e diminuição dos prolongamentos citoplasmáticos, além de diminuição do tamanho celular. Em Caski, foi observada intensa vacuolização e formação de bolhas na membrana (blebs). Ao analisar a curva de crescimento, foi observada redução significativa da proliferação celular a partir de 5µM em Caski no tempo de 24h, e à partir de 1µM em 48 horas. Em SiHa, tanto no período de 24h, como de 48 horas, houve redução a partir de 1µM. Quanto à viabilidade celular, ao realizar os ensaios colorimétricos MTS e Azul de Resazurina, o tratamento reduziu a viabilidade de ambas as linhagens em 24h e 48h, a partir da concentração de 1µM. O fitoterápico não apresentou característica citotóxica em ambas as linhagens, pois não houve morte celular superior a 50%. No experimento de formação de colônias, houve redução significativa na capacidade de clonogenicidade das linhagens após 14 dias de tratamento com OCS na concentração de 20 µM. No âmbito molecular, foi observado aumento na expressão do receptor canabinoide CNR1, indicando influência sobre o sistema endocanabinóide e seus mediadores. Adicionalmente, o fitoterápico diminuiu a expressão de MMPs e TIMPs, indicando a diminuição dos processos invasivos, que foram comprovados pelo ensaio de migração celular. Em relação ao HPV, o tratamento reduziu a expressão das oncoproteínas virais E6 e E7, associadas aos subtipos HPV16 e HPV18, demonstrando a redução da presença de HPV nas células tumorais através da diminuição da transcrição viral. Os resultados obtidos sustentam a hipótese que o OCS apresenta ação antitumorigênica sem efeitos citotóxicos.

Cervical cancer is the third most prevalent type of cancer in Brazil, according to data from the National Cancer Institute (INCA, 2024). Most cases are associated with persistent infections by high-risk HPV, specifically HPV16 and HPV18 subtypes. Inflammation plays a central role in cancer progression, contributing to a favorable tumor microenvironment. This study aimed to investigate the potential antitumor and anti-inflammatory effects of Cannabis sativa oil (CSO) on cervical cancer cell lines (CaSki and SiHa). Treatment with the phytotherapeutic agent induced morphological changes in both cell lines at 24 and 48 hours, starting from a concentration of 5 µM. In SiHa cells, cytoplasmic process condensation and reduction, along with decreased cell size, were observed. In CaSki cells, intense vacuolization and membrane blebbing were noted. Growth curve analysis revealed a significant reduction in cell proliferation starting at 5 µM in CaSki at 24 hours and at 1 µM at 48 hours. In SiHa, a reduction was observed from 1 µM at both time points. Regarding cell viability, MTS and Resazurin Blue assays showed a decrease in viability in both cell lines at 24 and 48 hours, starting from 1 µM. The phytotherapeutic agent did not exhibit cytotoxic characteristics, as cell death did not exceed 50%. In the colony formation assay, a significant reduction in clonogenic capacity was observed after 14 days of treatment with 20 µM CSO. At the molecular level, an increase in cannabinoid receptor CNR1 expression was detected, suggesting an influence on the endocannabinoid system and its mediators. Additionally, CSO reduced MMP and TIMP expression, indicating decreased invasive processes, as confirmed by the cell migration assay. Regarding HPV, the treatment reduced the expression of viral oncoproteins E6 and E7, associated with HPV16 and HPV18 subtypes, demonstrating a decrease in HPV presence in tumor cells through reduced viral transcription. The results support the hypothesis that CSO exhibits antitumor activity without cytotoxic effects.