Construção de uma plataforma para avaliação da resposta imunológica à vacinação contra SARS-CoV-2 em indivíduos HIV positivos: uma abordagem ex vivo para a liberação de citocinas

Abstract

Este projeto de pesquisa teve como objetivo o desenvolvimento de uma plataforma para avaliar a expressão ex vivo das citocinas produzidas pelas células T desenvolvidas na imuni-zação contra SARS-CoV-2 em indivíduos infectados pelo HIV. Para isso, os participantes foram divididos em três grupos conforme os níveis de linfócitos T CD4+ no sangue periféri-co, e o plasma e células sanguíneas dos doadores foram utilizados em diferentes testes imu-nológicos. Para isso, os níveis de anticorpos neutralizantes para SARS-CoV-2 foram detec-tados no plasma, e a quantificação de imunoglobulinas IgG e IgM totais não apresentou vari-ações significativas entre os grupos. Além disso, a expressão relativa dos transcritos de cito-cinas expressos por células mononucleares do sangue periférico (CMSP ou a sigla em inglês PBMC) foi determinada após estímulo com o replicon viral ccSARS-CoV-2 e peptídeos sin-téticos da região RBD da proteína Spike, visando avaliar a resposta celular específica à va-cinação. A estimulação viral mostrou-se mais efetiva no período de exposição de 24 horas, comparado ao período de 12 horas, como demonstrado pela expressão relativa de citocinas quantificada por RT-qPCR seguida pela análise de correlação de PERSON (r) que apresentou com índice muito forte (0,97) entre IFN-ɣ / IP-10 e (0,95) com IL-1β / IL-17A e nula (-0,19 a -0,85) entre TNF-α e as demais citocinas estudadas. Esses dados sugerem que a plataforma pode ser uma ferramenta valiosa para avaliar a eficácia das vacinas contra SARS-CoV-2, indicando o timing ideal para doses de reforço e potencialmente contribuindo para o desen-volvimento de novas vacinas.

The aim of this research project was to develop a platform to assess the ex vivo expression of cytokines produced by T cells developed during immunization against SARS-CoV-2 in HIVinfected individuals. To do this, the participants were divided into three groups according to the levels of CD4+ T lymphocytes in the peripheral blood, and the donors' plasma and blood cells were used in different immunological tests. For this, the levels of neutralizing antibodies to SARS-CoV-2 were detected in the plasma, and the quantification of total IgG and IgM immunoglobulins showed no significant variations between the groups. In addition, the relative expression of cytokine transcripts expressed by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) was determined after stimulation with the ccSARS-CoV-2 viral replicon and synthetic peptides from the RBD region of the Spike protein, in order to assess the specific cellular response to vaccination. Viral stimulation proved to be more effective in the 24-hour exposure period compared to the 12-hour period, as demonstrated by the relative expression of cytokines quantified by RT-qPCR followed by PERSON R correlation analysis which showed a very strong index (0.97) between IFN-ɣ / IP-10 and (0.95) with IL-1β / IL-17A and null (-0.19 to -0.85) between TNF-α and the other cytokines studied. These data suggest that the platform can be a valuable tool for assessing the efficacy of SARS-CoV-2 vaccines, indicating the optimal timing for booster doses and potentially contributing to the development of new vaccines.