Relação do cortisol com IL-12, TGF-β e PD-1 na leishmaniose canina

Abstract

A leishmaniose visceral canina (LCan) é uma zoonose tropical causada pelo protozoário Leishmania (L.) infantum no Brasil. Distúrbios no eixo hipotálamo pituitária adrenal (HPA) foram relatados em doenças infecciosas, incluindo leishmaniose visceral humana e experimental, ainda não relatava na LCan. O cortisol é um hormônio esteroide que regulam diversos processos fisiológicos, incluindo as respostas imunológicas. O objetivo deste estudo foi investigar os distúrbios hormonais do eixo HPA em cães com LCan e sua relação com a resposta imunológica do hospedeiro. Para isso, os níveis séricos de cortisol e do hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) foram quantificados em 12 cães saudáveis e 23 cães naturalmente infectados com Leishmania spp. utilizando ensaios imunoenzimáticos (ELISA) competitivo e de captura, respectivamente. A expressão das enzimas óxido nítrico sintase induzível (iNOS) e arginase-1, bem como da proteína de morte celular programada-1 (PD-1), foi avaliada em células mononucleares do sangue periférico (CMSP) isoladas, marcadas com anticorpos conjugados a fluoróforos e analisadas por citometria de fluxo. Além disso, os níveis séricos das citocinas IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12, interferon-gama (IFN-γ), fator de necrose tumoral (TNF-α) e fator de crescimento transformador beta (TGF-β) foram quantificadas no soro por ELISA de captura. A carga parasitária no sangue periférico e swab conjuntival foi quantificada por qPCR. Todos os parâmetros avaliados foram correlacionados com os níveis séricos de cortisol. Foi observado um aumento nos níveis de cortisol sérico, quanto os níveis de ACTH estavam reduzidos em cães com LCan. As expressões de iNOS, arginase-1 e PD-1 também estavam elevadas nas CMSP de e as citocinas sericas IL-10, IL-12 e IFN-γ apresentaram níveis aumentados em cães com LCan. O cortisol demonstrou correlação negativa com globulinas, PD-1 e IL-12, mas correlação positiva com as plaquetas, albumina e TGF-β. Esses achados sugerem que L. infantum pode induzir desregulação do eixo HPA e modular a resposta imunológica nos cães infectados, contribuindo para o entendimento dos mecanismos patogênicos da doença.

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a tropical zoonosis caused by the protozoan Leishmania (L.) infantum in Brazil. Dysregulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis has been reported in infectious diseases, including human and experimental visceral leishmaniasis, but it has not yet been reported in CVL. Cortisol is a steroid hormone that regulates various physiological processes, including immune responses. The aim of this study was to investigate hormonal disturbances in the HPA axis in dogs with CVL and their relationship with the host immune response. For this purpose, serum levels of cortisol and adrenocorticotropic hormone (ACTH) were measured in 12 healthy dogs and 23 naturally infected dogs with Leishmania spp using competitive and sandwich enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA), respectively. The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), arginase-1, and programmed cell death protein-1 (PD-1) was evaluated in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) isolated, labeled with fluorochrome-conjugated antibodies, and analyzed by flow cytometry. Additionally, serum levels of cytokines IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12, interferon-gamma (IFN-γ), tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), and transforming growth factor-beta (TGF-β) were quantified using sandwich ELISA. Parasite load was determined by qPCR. All parameters were correlated with serum cortisol levels. The results showed increased serum cortisol levels in dogs with CVL, while ACTH levels were reduced. The expression of iNOS, arginase-1, and PD-1 was also elevated in dogs with leishmaniasis. The cytokines IL-10, IL-12, and IFNγ were increased. Cortisol demonstrated a negative correlation with globulins, PD-1, and IL-12, but a positive correlation with platelets, albumin, and TGF-β. These findings suggest that L. infantum may induce HPA axis dysregulation and modulate the immune response in infected dogs, contributing to the understanding of the pathogenic mechanisms of the disease.