Diversidade genética e pesquisa de Escherichia coli, produtoras de β-lactamase de espectro estendido (ESBL), isolada de leite de vacas com mastite clínica

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dc.contributor.advisorRall, Vera Lúcia Mores [UNESP]
dc.contributor.advisorHernandes, Rodrigo Tavanelli [UNESP]
dc.contributor.authorOrsi, Henrique
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2020-04-23T18:08:43Z
dc.date.available2020-04-23T18:08:43Z
dc.date.issued2020-02-21
dc.description.abstractA mastite bovina é uma inflamação da glândula mamária, geralmente ocasionada por micro-organismos, que causa grandes prejuízos às fazendas leiteiras, devido ao uso de medicamentos, pagamento aos médicos veterinários, descarte de leite e até do animal e a Escherichia coli é o principal agente etiológico causador da forma clínica dessa doença. Neste trabalho, foram pesquisados genes para a classificação de E. coli diarreiogênica (DEC) ou de E. coli patogênica extra-intestinal (ExPEC), dentro dos grupos filogenéticos, além de genes que codificam fatores de virulência e resistência aos antimicrobianos. Também foram realizados testes de quantificação de produção de biofilme e produção de beta-lactamase de espectro estendido (ESBL). Entre os 161 isolados, dois (1,2%) foram classificados como DEC. Considerando-se os genes pesquisados, os mais frequentes foram fimH (160 = 99,3%), traT (126 = 78,3%), ecpA (108 = 67%) e ompT (60 = 37,3%). Em relação aos grupos filogenéticos, a maioria foi classificada nos grupos B1 (52,8%) e A (36,6%). Quanto à produção de biofilme, 68 (42,2%) foram classificadas como não produtoras, 80 (49,7%) como fracas, 11 (6,8%) como moderadas e apenas duas (1,2%) foram fortes produtoras. Apenas dois (1,2%) isolados apresentaram positividade no teste fenotípico de ESBL, com a presença do gene blaCTX-M-15. Considerando-se outros genes de resistência, blaTEM foi encontrado em sete (4,3%) isolados e blaSHV em um (0,6%). Os dois (1,2%) isolados escN+ apresentaram padrão de aderência “localizado-like” em células HeLa e seu potencial de induzir lesão attaching/effacing foi confirmado através de teste de coloração fluorescente da actina (FAS). Em relação ao PFGE, foram encontrados 10 clones, envolvendo tanto animais diferentes quanto o mesmo animal em diferentes períodos de coleta, indicando manejo inadequado. Não foi possível definir um perfil genético característico para as E. coli patogênicas da glândula mamária (MPECs) e, como apenas dois isolados apresentaram genes e padrão de adesão característicos de DEC, parece haver pouco potencial zoonótico para os isolados causadores de mastite bovina clínica.pt
dc.description.abstractBovine mastitis is an inflammation of the mammary gland, usually caused by microorganisms, which causes great damage to dairy farms, due to the use of medicines, payment to veterinarians, disposal of milk and even the animal and Escherichia coli is the main etiologic agent that causes the clinical form of this disease. In this study, genes were searched for the classification of diarrhogenic E. coli (DEC) or extra-intestinal pathogenic E. coli (ExPEC), within the phylogenetic groups, in addition to genes that encode virulence factors and resistance to antimicrobials. Quantification tests of biofilm production and production of extended spectrum beta-lactamase (ESBL) were also performed. Among the 161 isolates, two (1.2%) were classified as DEC. Considering the researched genes, the most frequent were fimH (160 = 99.3%), traT (126 = 78.3%), ecpA (108 = 67%) and ompT (60 = 37.3%). Regarding phylogenetic groups, most were classified in groups B1 (52.8%) and A (36.6%). As for the production of biofilm, 68 (42.2%) were classified as non-producing, 80 (49.7%) as weak, 11 (6.8%) as moderate and only two (1.2%) were strong producers. Only two (1.2%) isolates were positive in the ESBL phenotypic test, with the presence of the blaCTX-M-15 gene. Considering other resistance genes, blaTEM was found in seven (4.3%) isolates and blaSHV in one (0.6%). The two (1.2%) escN+ isolates showed a “localized-like” adhesion pattern in HeLa cells and their potential to induce attaching/effacing lesion was confirmed through fluorescent actin staining (FAS) test. Regarding PFGE, 10 clusters were found, involving both different animals and the same animal in several periods of collection, indicating inadequate handling. It was not possible to define a characteristic genetic profile for mammary pathogenic E. coli (MPECs) and, as only two isolates had genes and adhesion pattern characteristic of DEC, there is little zoonotic potential for isolates that cause clinical bovine mastitis.en
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.description.sponsorshipIdCAPES: 001
dc.identifier.aleph000930167
dc.identifier.capes33004064080P3
dc.identifier.lattes8376974115598584
dc.identifier.orcid0000-0001-6695-6003
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/192305
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.subjectGrupo filogenéticopt
dc.subjectBiofilmespt
dc.subjectKPCpt
dc.subjectPFGEpt
dc.subjectPhylogenetic groupen
dc.subjectBiofilmen
dc.titleDiversidade genética e pesquisa de Escherichia coli, produtoras de β-lactamase de espectro estendido (ESBL), isolada de leite de vacas com mastite clínicapt
dc.title.alternativeGenetic diversity and research of Escherichia coli, extended spectrum β-lactamase (ESBL) producing, isolated from milk of cows with clinical mastitisen
dc.typeDissertação de mestrado
unesp.advisor.lattes8376974115598584[2]
unesp.advisor.orcid0000-0001-6695-6003[2]
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Biociências, Botucatupt
unesp.embargo24 meses após a data da defesapt
unesp.examinationboard.typeBanca públicapt
unesp.graduateProgramBiologia Geral e Aplicada - IBBpt
unesp.knowledgeAreaBiologia de parasitas e microorganismospt
unesp.researchAreaNão constapt

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