Periodontite e diabetes mellitus tipo 2 como comorbidade: seria o gene CLECL1P (C-type Lectin Like 1, pseudogene) um novo biomarcador?
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Data
2024-10-25
Autores
Orientador
Caminaga, Raquel Mantuaneli Scarel 
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Araraquara - FOAR - Odontologia
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
Nos últimos anos, tem havido um crescimento contingente de pesquisadores, tanto no Brasil quanto no exterior, que pesquisam a relação entre Periodontite (P) e Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2), impulsionado pelo aumento significativo de pacientes que apresentam ambas as condições. Recentemente, observou-se um artigo publicado que utilizou uma ferramenta computacional (Association Rule Mining - ARM) que associou várias características periodontais e exames bioquímicos de pacientes com Periodontite, DM2 e Dislipidemia, o qual identificou alguns genes como marcadores dos diferentes quadros clínicos estudados. O gene CLECL1P (CType Lectin Like 1, Pseudogene) foi significantemente mais expresso em pacientes com Periodontite do que nos saudáveis. O propósito deste estudo foi avaliar em uma amostra independente formada por novos pacientes que procuram atendimento na Clínica de Periodontia da Faculdade de Odontologia de Araraquara - UNESP, a ocorrência da expressão diferencial do gene CLECL1P como um biomarcador da Periodontite em comorbidade ao DM2. Foram avaliados 60 novos voluntários divididos em três grupos: DM2+P = indivíduos com DM2 + Periodontite (n=20); Periodontite = indivíduos apenas com Periodontite (n=20); e Controle = indivíduos sem DM2 e sem Periodontite (n=20). Estes receberam avaliação periodontal completa e exames de sangue para avaliação do metabolismo glicêmico e lipídico. Uma alíquota de sangue foi utilizada para separação de leucócitos para extração do RNA. A expressão do gene CLECL1P foi investigada por RT-qPCR (TranscriptaseReversa seguida de Reação em Cadeia da Polimerase quantitativo em Tempo Real) pelo sistema TaqMan, utilizando o termociclador StepOne Plus (ThermoFisher Scientific) e normalizado pelo controle endógeno GAPDH. Os dados demográficos, físicos, bioquímicos, periodontais e a quantificação do gene CLECL1P foram tabulados, a normalidade dos dados verificada por meio do teste de Shapiro-Wilk. Para dados paramétricos foi aplicado o teste estatístico One-way ANOVA seguido de pós-teste de Tukey e para dados não paramétricos o teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo pós-teste de Dunn’s utilizando o software GraphPad Prism 8.4.3. A quantificação da expressão do gene CLECL1P foi comparada entre os grupos (teste Kruskal-Wallis) e analisada sua correlação com o perfil glicêmico, lipídico e periodontal dos indivíduos pela correlação de Spearman (software GraphPad Prism 8.4.3). Observamos que houve uma tendência de maior expressão do gene CLECL1P no grupo DM2+P, mas devido à grande variância intragrupos não houve diferença estatística significativa entre os grupos estudados. Verificamos no grupo Periodontite que conforme há um aumento da porcentagem de sítios com Profundidade de Sondagem ≥ 5mm há diminuição da expressão sistêmica do gene CLECL1P (correlação de Spearman (r = -0,472; p=0,036). No grupo DM2+P conforme aumenta a porcentagem do índice de sangramento marginal (inflamação do periodonto), diminuem os níveis de HDL (colesterol “bom”) (r = -0,47; p = 0,042). Concluímos que devido à alta variabilidade intra-grupo da expressão do gene CLECL1P, e o número limitado de participantes investigados neste momento, este gene não pode ser considerado biomarcador da periodontite em comorbidade ao DM2; mas verificamos a tendência deste gene ser um biomarcador da periodontite isoladamente.
Resumo (inglês)
In recent years, there has been a growing number of researchers, both in Brazil and abroad, investigating the relationship between Periodontitis (P) and Type 2 Diabetes Mellitus (DM2), driven by the significant increase in patients presenting both conditions. Recently, a published article utilized a computational tool (Association Rule Mining - ARM) that associated various periodontal characteristics and biochemical tests of patients with Periodontitis, DM2, and Dyslipidemia, identifying some genes as markers for the different clinical conditions studied. The gene CLECL1P (C-Type Lectin Like 1, Pseudogene) was significantly more expressed in patients with Periodontitis compared to healthy individuals. The purpose of this study was to assess in an independent sample of new patients seeking care at the Periodontics Clinic of the School of Dentistry at Araraquara - UNESP, the occurrence of differential expression of the CLECL1P gene as a biomarker of Periodontitis in comorbidity with DM2. Sixty new volunteers were evaluated and divided into three groups: DM2+P = individuals with DM2 + Periodontitis (n=20); Periodontitis = individuals with Periodontitis only (n=20); and Control = individuals without DM2 and without Periodontitis (n=20). They underwent a complete periodontal evaluation and blood tests to assess glycemic and lipid metabolism. A blood sample was used to separate leukocytes for RNA extraction. The expression of the CLECL1P gene was investigated by RT-qPCR (Reverse Transcriptase quantitative Polymerase Chain Reaction) using the TaqMan system, with the StepOne Plus thermal cycler (ThermoFisher Scientific), and normalized by the endogenous control GAPDH. Demographic, physical, biochemical, periodontal data, and CLECL1P gene quantification were tabulated; data normality was checked using the Shapiro-Wilk test. For parametric data, the One-way ANOVA test followed by Tukey's post-test was applied, and for non-parametric data, the Kruskal-Wallis test, followed by Dunn’s post-test, was used with GraphPad Prism 8.4.3 software. CLECL1P gene expression quantification was compared among groups (Kruskal-Wallis test) and its correlation with glycemic, lipid, and periodontal profiles was analyzed using Spearman's correlation (GraphPad Prism 8.4.3 software). We observed a trend towards higher expression of the CLECL1P gene in the DM2+P group, but due to high intra-group variability, no statistically significant difference was found between the studied groups. In the Periodontitis group, as the percentage of sites with Probing Depth ≥ 5mm increased, systemic expression of the CLECL1P gene decreased (Spearman correlation (r = -0.472; p=0.036)). In the DM2+P group, as the percentage of the marginal bleeding index (periodontal inflammation) increased, HDL (good cholesterol) levels decreased (r = -0.47; p = 0.042). We conclude that due to the high intra-group variability in CLECL1P gene expression and the limited number of participants investigated at this time, this gene cannot be considered a biomarker of periodontitis in comorbidity with DM2; however, there is a trend for this gene to be a biomarker of periodontitis alone.
Descrição
Idioma
Português
Como citar
Quil LCC. Periodontite e diabetes mellitus tipo 2 como comorbidade: seria o gene CLECL1P (C-type Lectin Like 1, pseudogene) um novo biomarcador? [Trabalho de Conclusão de Curso – Graduação em Odontologia]. Araraquara: Faculdade de Odontologia da UNESP; 2024.