Terapia fotodinâmica antimicrobiana com utilização da Clorina e6 em biofilmes monoespécie de Fusobacterium nucleatum e Porphyromonas gingivalis
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Data
2023-02-28
Autores
Orientador
Zandim-Barcelos, Daniela Leal 
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Odontologia - FOAR
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
A Raspagem e Alisamento Radicular (RAR) é considerada a terapia não-cirúrgica de
escolha para tratamento da doença periodontal. No entanto, esta terapia pode
apresentar limitações e insucessos quando utilizada isoladamente em determinados
casos clínicos. Assim, terapias alternativas têm sido investigadas para suprir
deficiências da RAR que podem estar relacionadas ao limitado acesso à superfície
radicular, a presença persistente de periodontopatógenos nas bolsas mais profundas
e a habilidade de algumas bactérias em invadir tecidos adjacentes. Dentre estas
terapias, destaca-se a terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT). O objetivo deste
estudo foi avaliar o efeito da aPDT com utilização da clorina-e6 (Ce6) em diferentes
concentrações e comprimentos de onda em biofilme monoespécie de Fusobacterium
nucleatum e Porphyromonas gingivalis. Foi realizada a padronização da formação do
biofilme seguindo parâmetros de densidade óptica e contagem de colônias conforme
curva de crescimento estabelecida previamente. Os biofilmes monoespécie de F.
nucleatum e de P. gingivalis foram formados em condições de atmosfera e meio de
crescimento adequadas por 5 dias. Posteriormente, estes biofilmes foram tratados
com diferentes protocolos, incluindo controle positivo (clorexidina – CHX 0,2%) e
negativo (água destilada + DMSO 1%), grupos tratados apenas com
fotossensibilizador (FS), grupos tratados apenas com luz e grupos tratados com aPDT
(FS + luz). Foram testadas duas concentrações da Ce6 (100 e 200 μM), dois
comprimentos de onda (emitidos em azul e vermelho) e uma intensidade de luz (30
J/cm2). A análise quantitativa foi realizada por contagem de colônias e transformadas
em UFC/mL. A distribuição dos dados foi verificada por meio de teste de Shapiro Wilk,
com posterior análise de variância (ANOVA) de um fator com correção de Welch e
pós teste de Games-Howell, considerando um nível de significância de 5%. A aPDT
com irradiação da Ce6 nos dois espectros de luz promoveu a eliminação total de P.
gingivalis em ambas as concentrações de FS testadas. Por outro lado, a irradiação
com luz vermelha foi mais eficaz na eliminação de F. nucleatum, provocando redução
microbiana de 3,44 e 3,46 log10 para a menor e maior concentração de Ce6,
respectivamente, quando comparadas ao controle negativo. Tendo em vista o
significativo efeito antimicrobiano sobre biofilme de bactérias periodontopatogênicas
como a P. gingivalis e F. nucleatum, a aPDT com utilização da Ce6 pode ser
considerada uma alternativa promissora de terapia coadjuvante à RAR no tratamento
da doença periodontal.
Resumo (inglês)
Root scaling and planing (RAR) is considered the non-surgical therapy of choice for
the treatment of periodontal disease. However, this therapy may present limitations
and failures when used alone in certain clinical cases. Thus, alternative therapies have
been investigated to overcome RAR deficiencies that may be related to limited access
to the root surface, the persistent presence of periodontopathogens in deeper pockets
and the ability of some bacteria to invade adjacent tissues. Among these therapies,
antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) stands out. The aim of this study was to
evaluate the effect of aPDT with the use of chlorin-e6 (Ce6) at different concentrations
and wavelengths on a single species biofilm of Fusobacterium nucleatum and
Porphyromonas gingivalis. The standardization of biofilm formation was carried out
following parameters of optical density and colony count according to the previously
established growth curve. The monospecies biofilms of F. nucleatum and P. gingivalis
were formed under appropriate conditions of atmosphere and growth medium for 5
days. Subsequently, these biofilms were treated with different protocols, including
positive control (chlorhexidine - CHX 0.2%) and negative control (distilled water +
DMSO 1%), groups treated only with photosensitizer (PS), groups treated only with
light and groups treated with aPDT (FS + light). Two concentrations of Ce6 (100 and
200 μM), two wavelengths (emitted in blue and red) and one light intensity (30 J/cm2)
were tested. Quantitative analysis was performed by counting colonies and
transforming them into CFU/mL. Data distribution was verified using the Shapiro Wilk
test, with subsequent one-way analysis of variance (ANOVA) with Welch correction
and post Games-Howell test, considering a significance level of 5%. aPDT with Ce6
irradiation in both light spectra promoted the total elimination of P. gingivalis in both
PS concentrations tested. On the other hand, irradiation with red light was more
effective in eliminating F. nucleatum, causing a microbial reduction of 3.44 and 3.46
log10 for the lowest and highest concentration of Ce6, respectively, when compared
to the negative control. In view of the significant antimicrobial effect on the biofilm of
periodontopathogenic bacteria such as P. gingivalis and F. nucleatum, aPDT using
Ce6 can be considered a promising alternative for adjuvant therapy to RAR in the
treatment of periodontal disease.
Descrição
Palavras-chave
Idioma
Português
