Análise metagenômica da microbiota intestinal de pacientes com tireoidite de Hashimoto e correlaçao com citocinas inflamatorias séricas
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Data
2021-07-02
Autores
Orientador
Oliveira, Gislane Lelis Vilela de 
Gomes, Eleni
Coorientador
Pós-graduação
Microbiologia - IBILCE
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
A disbiose, associada ao aumentoda permeabilidade intestinal e desregulação do sistema imune, podem contribuir parao desenvolvimento de doenças autoimunes. O objetivo deste trabalho foi avaliar adisbiose intestinal em pacientes com tireoidite de Hashimoto (TH) e correlacionar aos dados clínicos, dieta, e concentrações séricas de citocinas e zonulina. A frequência de consumo alimentar foi avaliada por questionário estruturado desenvolvido por nutricionistas. Amostras de fezes foram utilizadas para avaliar a microbiota por PCR em tempo real e sequenciamento 16S, e o soro para a dosagem decitocinas e zonulina, por citometria de fluxo e ELISA, respectivamente. Os resultadosforam analisados utilizando teste Qui-quadrado de Pearson, Mann-Whitney ecorrelação de Spearman. Foram incluídos 40 pacientes com TH (48,9 ± 13,2anos) e 53 indivíduos controles (45,6 ± 16,7 anos). Observamos diferençassignificativas entre pacientes e controles quanto ao consumo de carboidratos, proteínas, gorduras saturadas, verduras/legumes e laticínios. Foi detectada disbiose intestinal nos pacientes, com diferenças na riqueza e diversidade microbianas (P<0,05). A abundância dos gêneros Suterella, Intestinimonas, Acidaminococcus e Bacteroides estava aumentada nas fezes do grupo TH, enquanto Ruthenibacterium, Escherichia, Erysipelatoclostridium, Blautia, Anaerostipes e Bifidobacterium estavam reduzidos. O gênero Lactobacillus estava aumentado em pacientes que não tomavam levotiroxina. Bacteroides, Anaerostipes, Eubacterium hallii e Dorea longicatena correlacionaram de maneira inversa ao consumo de proteínas de origem animal. A ingestão de carboidratos correlacionou positivamente com Faecalibacterium prausnitzii, e o consumo de gorduras saturadas com Bacteroides cellulosilyticus, e negativamente com Eubacterium e Sutterella wadswortheusis. Catenibacterium, Bacteroides plebeius e Holdemanella biformis correlacionaram inversamente aos níveis de IL-6. Ruminococcus gnavus correlacionou diretamente às concentrações de TNF, Eubacterium rectale aos de IFN-, e Bacteroides stercoris e Blautia obeum aos de IL-17A. Além disso, observamos aumento significativo dos níveis séricos de zonulina nos pacientes, sugerindo maior permeabilidade da barreira intestinal. Concluímos que pacientes com TH apresentam disbiose e aumento da permeabilidade intestinal e que os hábitos alimentares desempenham papel importante na determinação da composição da microbiota intestinal.
Resumo (inglês)
Dysbiosis, associated with increased intestinal permeability and dysregulation of the immune system, can contribute to the development of autoimmune diseases. The aim of this study was to evaluate intestinal dysbiosis in patients with Hashimoto's thyroiditis (HT) and correlate with clinical data, diet, and serum concentrations of cytokines and zonulin. The frequency of food consumption was assessed using a structured questionnaire developed by nutritionists. Stool samples were used to evaluate dysbiosis by Real-time PCR and 16S sequencing, and the serum was used for cytokine and zonulin quantification, by flow cytometry and ELISA, respectively. Results were analyzed by using Pearson's chi-square test, Mann-Whitney and Spearmans correlation. Forty HT patients (48.9 ± 13.2 years) and 53 controls (45.6 ± 16.7 years) were included. We observed significant differences between patients and controls regarding the consumption of carbohydrates, proteins, saturated fats, vegetables and dairy products. Intestinal dysbiosis was detected in HT patients, with differences in microbial richness and diversity (P<0.05). The abundance of Suterella, Intestinimonas, Acidaminococcus and Bacteroides genera were increased in HT patients, while Ruthenibacterium, Escherichia, Erysipelatoclostridium, Blautia, Anaerostipes and Bifidobacterium were decreased. Lactobacillus genus was increased in non-treated patients, when compared with levotyroxin-treated one. Bacteroides, Anaerostipes, Eubacterium hallii and Dorea longicatena inversely correlated with animal derived proteins. Carbohydrate intake correlated positively with Faecalibacterium prausnitzii and the saturated fats consumption with Bacteroides cellulosilyticus, and negatively with Eubacterium and Sutterella wadswortheusis. Catenibacterium, Bacteroides plebeius andHoldemanella biformis inversely correlated with serum IL-6 levels. Ruminococcus gnavus positively correlated with TNF, Eubacterium rectal with IFN-, and Bacteroides stercoris and Blautia obeum with IL-17A concentrations. Besides that, we observed a significant increase in serum zonulin in HT patients, suggesting altered permeability of the intestinal barrier. We concluded that HT patients have dysbiosis and increased intestinal permeability. In addition, dietary habits play an important role in determining the composition of the microbial community in the human gut.
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Palavras-chave
Idioma
Português