Efeito imunomodulador da vitamina D sobre a ativação de inflamassomas em tecido placentário de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia
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Data
2021-05-28
Autores
Orientador
Peraçoli, Maria Terezinha Serrão 
Coorientador
Pós-graduação
Ginecologia, Obstetrícia e Mastologia - FMB
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Tese de doutorado
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Gestações complicadas por pré-eclâmpsia (PE) estão associadas com isquemia/hipóxia placentária, estresse oxidativo e níveis elevados de citocinas pró-inflamatórias. A ativação do inflamassoma NLRP3, representada por maior expressão gênica e proteica dos componentes desse complexo relacionado à inflamação, como caspase-1, interleucina-1 beta (IL-1β) e high-mobility group box-1 (HMGB1), foi descrita em placenta de gestantes pré-eclâmpticas, quando comparadas às gestantes normotensas (NT). A hiperativação do inflamassoma NLRP3 nos tecidos placentários pode estar envolvida no estado inflamatório sistêmico exacerbado da PE. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a ação imunomoduladora da vitamina D (VD) sobre os inflamassomas NLRP1 e NLRP3 em explantes placentários de gestantes portadoras de PE e de NT e Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC), bem como a apoptose nessas células. Foram avaliadas 30 gestantes assim distribuídas: 10 portadoras de PE precoce (idade gestacional < 34 semanas), 10 portadoras de PE tardia (idade gestacional ≥ 34 semanas) e 10 NT. Após a realização do parto cesáreo, fragmentos de aproximadamente 10 mg foram imediatamente retirados da região central da placenta, de modo que constituíssem amostras do citotrofoblasto viloso e da região do sinciociotrofoblasto em contato com a face materna. Os explantes e as HUVEC foram cultivados na presença ou ausência de peróxido de hidrogênio (H2O2), urato monossódico (MSU), fator de necrose tumoral (TNF-α) e tratados com VD. Após 4 e 18 horas de cultivo os explantes e as células endoteliais foram submetidos à avaliação da expressão gênica e proteica de NLRP1, NLRP3, caspase-1, IL-1β, IL-18, TNF-α, HMGB1, tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (TRAIL) e vitamin D receptor (VDR) por qPCR, ELISA e Western Blot. A apoptose nas células também foi avaliada por citometria de fluxo. De maneira geral, os resultados mostraram que o tratamento in vitro com VD é capaz de modular a inflamação placentária em gestantes com PE e diminuir o estresse oxidativo, induzido pelos tratamentos com MSU e H2O2 em explantes placentários e HUVEC, bem como aumentar a viabilidade e diminuir a apoptose nessas células estimuladas com TNF-α. A utilização de agentes com propriedades anti-inflamatórias e antioxidants, como a VD é um campo de pesquisa que deve ser mais explorado em futuras investigações para entender o mecanismo pelo qual a VD atua na imunomodulação da resposta inflamatória na PE.
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Palavras-chave
Idioma
Português