Nanopartículas lipídicas contendo própolis verde como terapia adjuvante à raspagem e alisamento radicular na periodontite em ratas ovariectomizadas tratadas ou não com zoledronato

Abstract

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do uso local de nanopartículas lipídicas contendo própolis verde como terapia adjuvante à raspagem e alisamento radicular (RAR) no tratamento da periodontite experimental (PE) em ratas ovariectomizadas, tratadas ou não com alta dosagem de zoledronato. Setenta ratas (6 meses) Wistar foram utilizadas neste estudo. Dez semanas antes do início dos experimentos as ratas foram submetidas à ovariectomia bilateral. No dia 0 foi instalada uma ligadura de algodão ao redor do primeiro molar inferior para que o acúmulo de biofilme induzisse a PE. A partir deste procedimento seguiram-se os experimentos 1 e 2. No experimento 1, após duas semanas da instalação da ligadura as ratas foram distribuídas nos grupos: NTL (n=10), RAR (n=10), RAR-PVext (n=10) e RAR-PVnpl (n=10). No grupo NTL não foi efetuado nenhum tratamento local. No grupo RAR foi realizada a RAR e irrigação com solução salina fisiológica. Nos grupos RAR-PVext e RAR-PVnpl foi realizada RAR e irrigação com extrato de própolis verde e nanopartículas lipídicas contendo própolis verde, respectivamente. No experimento 2, da 1ª até a 6ª semana foi efetuado o tratamento com zoledronato (100μg/Kg), a cada quatro dias, pela via intraperitoneal. Após duas semanas da permanência da ligadura ela foi removida e as ratas foram distribuídas nos grupos: ZOL-NTL (n=10), ZOL-RAR (n=10) e ZOL-RAR-PVnpl (n=10). No grupo ZOL-NTL não foi efetuado nenhum tratamento local. No grupo ZOL-RAR foi realizada a RAR e irrigação com solução salina fisiológica. No grupo ZOL-RAR-PVnpl foi realizada RAR e irrigação com nanopartículas lipídicas contendo própolis verde. Tanto no experimento 1 quanto no experimento 2 foi efetuada uma única sessão de RAR e quatro sessões de irrigação com as soluções citadas acima, ou seja, imediatamente após a RAR e após 2, 4 e 6 dias deste procedimento. As ratas foram submetidas à eutanásia 28 dias após a remoção da ligadura. No experimento 1 as hemimandíbulas foram processadas para permitir: análise histológica do processo de reparação dos tecidos periodontais, análise histométrica da porcentagem de tecido ósseo na região de furca (PTOF) e análise imunoistoquímica para detecção de TRAP e OCN. No experimento 2 as hemimandíbulas foram processadas para permitir: análise microtomográfica da microarquitetura óssea, análise histológica do processo de reparação dos tecidos periodontais, análise histométrica da porcentagem de tecido ósseo na região de furca (PTOF) e da porcentagem de tecido ósseo não vital na região de furca (PTONV) e análise imunoistoquímica para detecção de TNFα, IL-1β e TRAP. Em RAR-PVnpl a reparação dos tecidos periodontais pós tratamento foi melhor que nos demais grupos, a PTOF e a imunomarcação para OCN foram maiores que nos demais grupos experimentais. ZOL-RAR-PVnpl apresentou uma reparação dos tecidos periodontais pós-tratamento mais satisfatória, menor PTONV e menor imunomarcação para TNFα e IL-1β em relação aos demais grupos. Conclui-se que a irrigação com nanopartículas lipídicas contendo própolis verde se constituiu em uma terapia adjuvante à RAR efetiva e segura no tratamento da periodontite experimental em ratas ovariectomizadas, tratadas ou não com dosagem oncológica de zoledronato.

The aim of the present study was to evaluate the effect of local use of lipid nanoparticles containing green propolis as an adjuvant therapy to scaling and root planing (SRP) in the treatment of experimental periodontitis (EP) in ovariectomized rats, treated or not, with a high dose of zoledronate. Seventy female Wistar rats (6 months) were used in this study. Ten weeks before the start of the experiments, the rats underwent bilateral ovariectomy. On day 0, a cotton ligature was installed around the lower first molar so that biofilm accumulation would induce PE. From this procedure, experiments 1 and 2 followed. In experiment 1, after two weeks of ligature placement, the rats were distributed into the following groups: NLT (n=10), SRP (n=10), SRP-GPext (n =10) and SRP-GPlnp (n=10). In the NLT group, no local treatment was performed. In the SRP group, SRP and irrigation with physiological saline solution were performed. In the SRP-GPext and SRP-GPlnp groups, SRP and irrigation with green propolis extract and lipid nanoparticles containing green propolis were performed, respectively. In experiment 2, from the 1st to the 6th week, treatment with zoledronate (100μg/Kg) was carried out every four days, intraperitoneally. Two weeks after the ligature remained in place, it was removed and the rats were distributed into the groups: ZOL-NLT (n=10), ZOL-SRP (n=10) and ZOL-SRP-GPlnp (n=10). In the ZOL-NLT group, no local treatment was performed. In the ZOL-SRP group, SRP and irrigation with physiological saline were performed. In the ZOL-SRP-GPlnp group, SRP and irrigation with lipid nanoparticles containing green propolis were performed. In both experiments 1 and 2, a single SRP session and four irrigation sessions were carried out with the solutions mentioned above, that is, immediately after SRP and after 2, 4 and 6 days of this procedure. The rats were euthanized 28 days after removing the ligature. In experiment 1, the hemimandibles were processed to allow: histological analysis of the periodontal tissue repair process, histometric analysis of the percentage of bone tissue in the furcation region (PBTF) and immunohistochemical analysis for detection of TRAP and OCN. In experiment 2, the hemimandibles were processed to allow: microtomographic analysis of the bone microarchitecture, histological analysis of the periodontal tissue repair process, histometric analysis of the percentage of bone tissue in the furcation region (PBTF) and the percentage of non-vital bone tissue in the region furcation (PNVBT) and immunohistochemical analysis for detection of TNFα, IL-1β and TRAP. In SRP-GPlnp, periodontal tissue repair after treatment was better than in the other groups, PBTF and immunolabeling for OCN were higher in the other experimental groups. ZOL-SRP-GPlnp showed a more satisfactory post-treatment periodontal tissue repair, lower PNVBT and lower immunolabeling for TNFα and IL-1β compared to the other groups. It is concluded that irrigation with lipid nanoparticles containing green propolis constituted an effective and safe adjuvant therapy to SRP in the treatment of experimental periodontitis in ovariectomized rats, treated or not, with oncological dosage of zoledronate.