Produtos comerciais e extrato à base de algas no controle do crescimento micelial e da esporulação do fungo Colletotrichum abcissum
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Data
2023-06-03
Autores
Orientador
Gasparoto, Maria Cândida de Godoy
Machado, Levi Pompermayer
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Engenharia Agronômica - CERE
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
O fungo Colletotrichum abscissum é o agente causal da podridão floral dos citros. Não
há relatos de controle alternativo desta doença em campo, porém estudos mostram possível
eficiência de extratos à base de algas marinhas como alternativa ao controle de alguns
fitopatógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações do
extrato aquoso da macroalga Kappaphycus alvarezii e de dois produtos comerciais à base de
algas no crescimento micelial e esporulação in vitro do fungo C. abscissum. Nos experimentos
(realizados duas vezes para cada isolado fúngico) foram utilizados sete tratamentos com cinco
repetições cada, sendo eles: controle negativo (testemunha sem extrato ou fungicida); controle
positivo com o fungicida tebuconazol (10 µg.mL-1
); três concentrações do extrato aquoso da
macroalga K. alvarezii (100, 1000 e 10.000 µg.mL-1
) e dois produtos comerciais à base de algas
(100 µg.mL-1
). Os experimentos foram instalados em placas com seis poços, contendo 2 mL de
meio de cultura BDA (Batata-Dextrose-Ágar) com os diferentes tratamentos já solubilizados ao
meio. Após a solidificação do meio, disco de micélio (3mm) do fungo C. abscissum com 7 dias
de crescimento (em BOD a 23ºC sob 12h de fotoperíodo) foi depositado no centro de cada poço.
As placas foram mantidas em BOD (23ºC, escuro). Diariamente, imagens foram obtidas do
crescimento fúngico em cada poço. Considerou-se como último dia de avaliação, aquele em
que 50%+1 dos micélios da testemunha se desenvolvessem até a borda dos poços. A área do
crescimento fúngico em relação ao poço foi analisada por meio do software Quant. Ao final do
experimento de crescimento, foi realizada a avaliação da esporulação, adicionando-se 3 mL de
água destilada esterilizada em cada poço. A suspensão de esporos obtida foi transferida para
câmara de Neubauer (três alíquotas individuais de 100µL por repetição) para contagem dos
esporos. A inibição do crescimento micelial e da esporulação (% em relação à testemunha)
versus a concentração dos extratos (log10) foram submetidos à análise de regressão (p=0,05) e,
em caso significativo, foi possível estimar a concentração efetiva capaz de inibir 50% do
desenvolvimento fúngico (CE50). Nestes casos, no presente trabalho, foram desconsiderados os
valores estimados pois estavam fora das concentrações avaliadas. Em relação aos produtos
comerciais, não houve diferença estatística em relação à testemunha (sem produtos comerciais),
tanto para o crescimento micelial quanto para a esporulação. Estudos complementares serão
realizados com outros extratos da macroalga e, adicionalmente, serão avaliados os efeitos em
outras fases do desenvolvimento fúngico (ex: em sua germinação).
Resumo (inglês)
The fungus Colletotrichum abscissum is the causative agent of floral rot in citrus fruits.
There are no reports of alternative control of this disease in the field, but studies show possible
efficiency of seaweed extracts as an alternative to control of some phytopathogens. The aim of
this study was to evaluate the effect of different concentrations of the aqueous extract of the
macroalga Kappaphycus alvarezii and two commercial algal products on mycelial growth and
in vitro sporulation of the fungus C. abscissum. In the experiments (carried out two times for
each isolated fungal) seven treatments were used with five repetitions each, being they: negative
control (it testifies without extract or fungicide);, positive control with the fungicide
tebuconazol (10 µg.mL-1
);, three concentrations of the aqueous extract of the seaweed K.
alvarezii (100, 1000 and 10.000 µg.mL-1
) and two commercial products to the seaweeds base
(100 µg.mL-1
). The experiments were installed on plates with six wells, containing 2 mL of
BDA culture medium (Potato-Dextrose-Agar) with the different treatments already solubilized
in the medium. After solidification of the medium, mycelium disk (3 mm) of the fungus C.
abscissum with 7 days of growth (in BOD the 23ºC under 12 h of photoperiod) was deposited
in the center of each well. The cards were kept in BOD (23ºC, dark). Daily, images were
obtained of fungal growth in each well. It was considered as the last day of evaluation, when
50% + 1 of the witness's mycelia developed to the edge of the wells. The area of fungal growth
relative to the well was analyzed through Quant software. At the end of the growth experiment,
the sporulation evaluation was performed, adding 3 mL of sterile distilled water in
eachwell.The spore suspension obtained was transferred to the Neubauer chamber (three indiv
idual aliquots of 100 μL per repetition) for spore counting. The inhibition of mycelial growth
and sporulation (% relative to the control) versus the concentration of the extracts (log10) were
submitted to regression analysis (p=0.05) and, if significant, it was possible to estimate the
effective concentration capable of inhibiting 50% of fungal development (EC50). In these cases,
in the present study, the estimated values were disregarded because they were outside the
concentrations evaluated. In relation to commercial products, there was no statistical difference
in relation to the control (no commercial products), both for mycelial growth and sporulation.
Further studies will be carried out with other extracts of the macroalgae and, additionally, the
effects on other phases of fungal development (ex. germination) will be evaluated.
Descrição
Idioma
Português