Avaliação da eficácia terapêutica e segurança toxicológica de produtos naturais e suas associações com fluconazol no tratamento de infecções por Candida glabrata e Candida tropicalis

Abstract

A candidíase orofaríngea é uma infecção fúngica provocada por diversas espécies de Candida, principalmente C. albicans. Esses microrganismos são componentes normais da microbiota oral em indivíduos saudáveis. Contudo, em determinadas circunstâncias, podem tornar-se patogênicos. Por muitos anos, a C. albicans foi a principal responsável por essa infecção, mas pesquisas recentes indicam um aumento na prevalência de espécies de Candida não-albicans, como a C. tropicalis e C. glabrata. Este aumento está relacionado ao perfil de resistência intrínseca dessas espécies aos fármacos azóis e outros fatores. Dados da literatura demonstraram que com a pandemia causada pelo coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2), os pacientes infectados que já apresentavam a saúde debilitada, alguns apresentavam também coinfecções orofaríngeas por espécies de Candida não-albicans comprometendo ainda mais o quadro do paciente. O fluconazol (FCZ) é um medicamento amplamente utilizado no tratamento destas infecções fúngicas, no entanto, também pode causar efeitos adversos significativos, especialmente em pacientes com um quadro de saúde comprometido. Sendo assim, dado o aumento da prevalência e a resistência de C. tropicalis e C. glabrata aos medicamentos existentes assim como a toxicidade dos fármacos disponíveis para tratamento, destaca-se a urgência do desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas com alta eficácia terapêutica e baixa toxicidade. Rosmarinus officinalis é uma erva medicinal comum em produtos farmacêuticos e na medicina tradicional e que contém o ácido rosmarínico (AR), um éster polifenólico com diversas atividades farmacológicas. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica e a toxicidade do extrato seco de R. officinalis (ERO), do AR e de suas combinações com FCZ frente à C. glabrata e C. tropicalis. Na avaliação da atividade antifúngica dos compostos pela técnica de microdiluição em caldo, os resultados obtidos indicaram que esses ativos naturais possuem uma atividade antifúngica significativa, especialmente contra cepas resistentes de C. glabrata. As combinações foram submetidas ao ensaio "checkerboard”, e a combinação de FCZ com ERO demonstrou interação mais vantajosa frente as demais combinações testadas. Para a avaliação da toxicidade in vitro, empregou-se células Vero, e foi observada baixa toxicidade desta combinação. Nos ensaios com o modelo in vivo de Tenebrio molitor, foi possível fazer a análise de toxicidade e atividade antifúngica ao monitorar a sobrevivência das larvas e carga fúngica, porém são necessárias mais pesquisas com a combinação escolhida neste estudo. Em uma análise global, a combinação de FCZ com ERO destacou-se como a mais promissora, demonstrando eficácia antifúngica significativa sem induzir citotoxicidade relevante.

Oropharyngeal candidiasis is a fungal infection caused by various Candida species, primarily C. albicans. These microorganisms are normal components of the oral microbiota in healthy individuals. However, under certain circumstances, they can become pathogenic. For many years, C. albicans was the main culprit for this infection, but recent research indicates an increase in the prevalence of non-albicans Candida species, such as C. tropicalis and C. glabrata. This increase is linked to the intrinsic resistance profile of these species to azole drugs and other factors. Literature data has shown that during the severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV 2) pandemic, infected patients with compromised health presented oropharyngeal co infections by non-albicans Candida species, further complicating their condition. Fluconazole (FCZ) is a widely used medication for treating these fungal infections; however, it can cause significant adverse effects, especially in patients with compromised health. Therefore, given the increasing prevalence and resistance of C. tropicalis and C. glabrata to existing medications, as well as the toxicity of available drugs, there is an urgent need for the development of new therapeutic strategies with high efficacy and low toxicity. Rosmarinus officinalis is a common medicinal herb in pharmaceutical products and traditional medicine, containing rosmarinic acid (AR), a polyphenolic ester with various pharmacological activities. The objective of this study was to evaluate the antifungal activity and toxicity of the dry extract of R. officinalis (ERO), AR, and their combinations with FCZ against C. glabrata and C. tropicalis. In the assessment of antifungal activity using the broth microdilution technique, the results indicated significant antifungal activity of these natural agents, especially against resistant strains of C. glabrata. Combinations were subjected to the “checkerboard” assay, and the FCZ-ERO combination showed a more advantageous interaction than other tested combinations. For in vitro toxicity evaluation, Vero cells were employed, and low toxicity of this combination was observed. In assays with the Tenebrio molitor in vivo model, toxicity and antifungal activity were analyzed by monitoring larval survival and fungal burden, but further research with the chosen combination in this study is needed. In an overall analysis, the FCZ-ERO combination emerged as the most promising, demonstrating significant antifungal efficacy without inducing relevant cytotoxicity.