Estudo do papel da proteína Galectina-1 em modelo experimental de dermatite atópica induzida por ovalbumina em camundongos

Abstract

Introdução: A dermatite atópica (DA) é provocada tanto pelo desequilíbrio das respostas imunes quanto pela quebra da barreira epitelial. Embora a galectina-1 (Gal-1), proteína ligante de β-galactosídeos, possua efeitos imunomoduladores em várias doenças inflamatórias, as estratégias terapêuticas baseadas em suas propriedades anti-inflamatórias não são conhecidas na DA. Desse modo, avaliamos o efeito do tratamento farmacológico com a proteína recombinante Gal-1 (rGal-1) na imunomodulação da DA em modelo experimental murino. Métodos: Camundongos Balb/c machos foram imunizados por via subcutânea, com ovalbumina (OVA; 5 μg) nos dias 0 e 7. Após a imunização, os animais foram desafiados com 250 μg de OVA diluída em 50 μL de óleo Johnson’s Baby ® nos dias 11, 14 a 18 e 21 a 24. Parte dos camundongos sensibilizados foram tratados intraperitonealmente com a proteína rGal-1 (0,3 ou 3 µg/animal) ou dexametasona (1 mg/kg) diluídos em 0,1 mL de salina estéril, na última semana do protocolo experimental, dias 21 a 24 (uma vez ao dia). Após 24 horas do último período de exposição à OVA, ou apenas óleo (Sham), os animais foram anestesiados para coleta de sangue e, posteriormente, realizada a eutanásia por deslocamento cervical para coleta da pele e baço. As análises posteriores foram realizadas por meio de: análises histológicas e quantitativa de mastócitos e eosinófilos na pele, dosagens de IgE anti-ovalbumina e citocinas no sangue e lisado de pele, imuno-histoquímica e western blotting para detectar a expressão da Gal-1 e quinases da via MAPK na pele e baço. Resultados: O tratamento com rGal-1 diminui os sinais clínicos de dermatite nos camundongos BALB/c e diminui os níveis locais de eotaxina e IFN-gama. O tratamento também suprimiu a infiltração de eosinófilos e mastócitos, que foi corroborado pela redução da expressão da protease 6 dos mastócitos (mMCP6) e peroxidase dos eosinófilos (EPX). Estes efeitos locais estão associados com a ativação da quinase regulada por sinal extracelular (ERK) e regulação negativa da Gal-1 endógena. A inibição da progressão da doença induzida por Gal-1 também foi relacionada com reduzidos níveis plasmáticos de IL-17, assim como o aumento de expressão de ERK fosforiladas em células esplênicas. Conclusão: Os nossos resultados demonstram que rGal-1 é um tratamento eficaz na inflamação alérgica de pele na DA e pode ter impacto sobre o desenvolvimento de novas estratégias em doenças inflamatórias da pele.