Desenvolvimento de método quimiluminescente para determinação da capacidade oxidante de óleos ozonizados

Abstract

A ozonioterapia é um procedimento médico, veterinário e odontológico bem difundido. As técnicas utilizadas são diversas e incluem a administração direta e controlada do gás ozônio e a utilização de materiais/substâncias previamente ozonizadas, como é o caso dos óleos ozonizados. Diversos tipos de óleos podem ser ozonizados para aplicação tópica. A ozonização altera a estrutura dos ácidos graxos que compõem os óleos, gerando compostos oxidantes (como peróxidos e ozonídeos), que são os agentes no processo de cicatrização. Neste trabalho foi desenvolvido um método para caracterização da capacidade oxidante de óleos ozonizados utilizando-se de quimiluminescência. Para isso, óleo de gergelim foi submetido à ozonização em diferentes tempos e caracterizados pelos seus índices de peróxidos, alterações nos espectros de infravermelho e por seu comportamento térmico. Os índices de peróxido obtidos após ozonização foram (controle: 12 ± 2 mmol kg-1, 10 min: 177 ± 5 mmol kg-1, 30 min: 301 ± 5 mmol kg-1, 60 min: 439 ± 11 mmol kg-1, 120 min: 628 ± 10 mmol kg-1). As análises por infravermelho mostraram o desaparecimento progressivo da banda de estiramento C=C e aumento da banda de estiramento OH, consistente com o processo de ozonólise. Análises por DSC foram capazes de detectar a decomposição exotérmica exclusiva dos óleos ozonizados. Os métodos quimiluminescentes foram baseados na utilização de luminol como sonda e peroxidase de raiz forte (HRP) como catalisador. Em outra abordagem, a peroxidase foi substituída por taurina cloramina. Os métodos foram otimizados em relação aos solventes, tampões, pH, concentração de luminol, HRP e taurina cloramina. Foi observada uma correlação entre a emissão de quimiluminescência e a concentração dos óleos ozonizados. No entanto, o aumento excessivo do tempo de ozonólise provocou diminuição da emissão de quimiluminescência. Em conclusão, o método desenvolvido apresentou potencial como método alternativo para estudo do poder oxidante de óleos ozonizados.

Ozonotherapy is a widespread medical, veterinary and dental procedure. The techniques used are diverse and include the direct and controlled administration of ozone gas and the use of preciously ozonated materials, such as ozonized oils. Several types of oils can be ozonized for topic applicat ion. Ozonization alters the structure of the fatty acids, generating oxidizing compounds (such as peroxides and ozonides), which are the agents in the wound healing. In this work, a technique for characterizing the oxidizing capacity of ozonized oils using chemiluminescence was developed. For this, sesame oil was subjected to Ozonization at different times and characterized by its peroxide index, changes in infrared spectra and its thermal behavior. The peroxide index obtained after Ozonization were (contro l: 12 ± 2 kg 1 , 1 , 10 min: 177 ± 5 mmol kg 120 min: 628 ± 101 , 30 min: 301 ± 5 mmol kg mmol kg1 ). mmol 1 , 60 min: 439 ± 11 mmol kgInfrared analysis showed the progressive disappearance of the C=C stretch band and increase in the OH stretch band, consist ent with the ozonolysis process. DSC analysis were able to detect an exothermic decomposition unique to ozonized oils. The chemiluminescent methods were based on the use of luminol as a probe and horseradish peroxidase (HRP) as a catalyst. In another appro ach, peroxidase was replaced by chloramine taurine. The methods were optimized in relation to solvents, buffers, pH, luminol concentration, HRP and chloramine taurine. A correlation was obtained between chemiluminescence emission and concentration of ozoni zed oils. However, the excessive increase in ozonolysis time caused a decrease in chemiluminescence emission. In conclusion, this technique presented potential as an alternative method for studying the oxidizing power of ozonized oils