Organização e localização de DNAs satélites nos cromossomos de Proceratophrys boiei (Anura, Odontophrynidae)

Abstract

A heterocromatina de organismos eucariotos é normalmente composta por sequências de DNAs repetitivos. Um tipo especial destes é o DNA satélite, que constitui uma fração não codificadora do genoma, consistindo em longas matrizes de sequências repetidas em tandem, localizadas preferencialmente na heterocromatina das regiões cromossômicas pericentroméricas e subteloméricas. O presente trabalho teve como objetivo estudar a organização genômica e a localização cromossômica de sequências de satDNAs presentes no genoma da espécie de sapo Proceratophrys boiei (Wied-Neuwied, 1825), que se mostra bastante interessante do ponto de vista genético e citogenético, uma vez que em estudos anteriores foi identificado um heteromorfismo cromossômico ligado à diferenciação de cromossomos sexuais em fêmeas de uma população da espécie. Para isso, foi realizada previamente uma extensiva análise no genoma tanto de macho quanto de fêmea sequenciado da espécie, utilizando ferramentas de bioinformática, da qual foi isolado um grande número de possíveis satDNAs. Para este trabalho foram escolhidos dois satDNAs da fêmea de P. boiei e dois do macho, sendo eles nomeados como: PboSat40-165, PboSat51-39, PboSat57-97 e PboSat58-155, estes passaram por análises de PCR e hibridação fluorescente in situ cromossômica (FISH) a fim da validação e mapeamento dessas. Apenas os satélites PboSat40-165 e PboSat57-97 mostraram marcações visíveis na técnica de FISH em preparações tanto de macho quanto de fêmea da espécie. O satélite PboSat40-165 foi localizado na região subtelomérica do par cromossômico 5 e o PboSat57-97 foi localizado nas regiões centroméricas e pericentroméricas de todos os cromossomos. Assim, ambos ocupam áreas heterocromáticas, como descrito anteriormente para estas sequências por outros autores. O isolamento de sequências repetitivas, sobretudo de satDNAs, constitui uma ferramenta importante para obter dados que contribuirão estudos evolutivos em anuros, podendo revelar novidades à cerca da organização genômica e cromossômica nesses organismos, uma vez que ainda são poucos os trabalhos envolvendo este tipo de estudo em anuros.