Instabilidade cromossômica em embriões equinos provenientes de injeção intracitoplasmática de espermatozoide (icsi)

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorPapa, Frederico Ozanam [UNESP]
dc.contributor.advisorRuijter-Villani, Marta de
dc.contributor.advisorStout, Tom
dc.contributor.authorScheeren, Verônica Flores da Cunha
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2022-10-07T12:12:30Z
dc.date.available2022-10-07T12:12:30Z
dc.date.issued2022-09-21
dc.description.abstractA injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) é um método estabelecido e amplamente utilizado para alcançar a fertilização de oócitos em tecnologias de reprodução assistida equina. A ICSI reúne diversas aplicações, como para éguas doadoras idosas, éguas que precisam ser sacrificadas ou que morrem repentinamente, animais com distúrbios do trato reprodutivo, sêmen de má qualidade, palhetas raras e/ou caras de sêmen congelado. No entanto, nem todos os oócitos fertilizados por ICSI sofrem clivagem e se desenvolvem em embriões viáveis. A primeira divisão mitótica no zigoto é bastante singular em comparação com a divisão mitótica em células somáticas. O oócito perde seus centríolos durante a oogênese e na fertilização, o espermatozoide reintroduz dois centríolos no oócito. Os mecanismos que impulsionam essas divisões pós-zigóticas propensas a erros ainda são pouco compreendidos. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência e o tipo de defeitos de segregação cromossômica durante as primeiras divisões mitóticas de embriões de ICSI equinos. A imunofluorescência sistemática e a microscopia confocal foram realizadas em zigotos equinos fixados (n = 177 oócitos injetados) 24 horas após ICSI. Quarenta e nove zigotos estavam em mitose, 13 em fase pronuclear (26,5%), 11 em prófase ou pró-metáfase (22,4%), 14 em metáfase (28,5%) e 11 em anáfase ou telófase (22,4%). Os erros mais comuns observados nos zigotos em mitose foram centrossomos fragmentados e centrossomos mal posicionados. Concluímos que o centrossomo não é crucial para a montagem do fuso. Além disso, observamos uma alta incidência de fragmentação de material pericentrossomal. Isso poderia explicar por que os embriões de ICSI equinos ainda apresentam baixa eficiência quando comparados a outras espécies animais.pt
dc.description.abstractIntracytoplasmic sperm injection (ICSI) is an established and widely used method to achieve oocyte fertilization in equine assisted reproductive technologies. ICSI brings together several applications, such as for elderly donor mares, mares that need to be euthanized or that die suddenly, animals with reproductive tract disorders, poor quality semen due to, rare straws and/or frozen semen faces. However, not all ICSI-fertilized oocytes undergo cleavage and develop into viable embryos. The first mitotic division in the zygote is quite unique compared with mitotic division in somatic cells. The oocyte loses its centrioles during oogenesis and at fertilization, the sperm cell re-introduces two centrioles into the oocyte. The mechanisms driving these error-prone post-zygotic divisions are still poorly understood. The objective of this study was to analyze the frequency and type of chromosome segregation defects during the early mitotic divisions of equine ICSI embryos. Systematic immunofluorescence and confocal microscopic was performed in fixed equine zygotes (n= 177 injected oocytes) 24hours after ICSI. Forty nine zygotes were undergoing mitosis: 13 at pronuclear stage (26,5%), 11 at prophase or pro-metaphase (22,4%), 14 at metaphase (28,5%) and 11 at anaphase or telophase (22,4%). The most common errors observed in the zygotes undergoing mitosis were fragmented centrosomes and mispositioned centrosomes. We conclude that the centrosome is not crucial for spindle assembly. Also, we observed a high incidence of pericentrosomal material fragmentation. This could explain why equine ICSI embryos still have low efficiency in when compared to others animal species.en
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
dc.description.sponsorshipIdCAPES: 88882.433332/2019-01
dc.description.sponsorshipIdCAPES: 88887.467895/2019-00
dc.identifier.capes33004064086P1
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/236862
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.subjectZigotopt
dc.subjectCentrossomopt
dc.subjectOócitopt
dc.subjectAneuploidiapt
dc.subjectEquinopt
dc.subjectZygoteen
dc.subjectCentrosomeen
dc.subjectOocyteen
dc.subjectAneuploidyen
dc.subjectHorseen
dc.titleInstabilidade cromossômica em embriões equinos provenientes de injeção intracitoplasmática de espermatozoide (icsi)pt
dc.title.alternativeChromosomal instability in equine ICSI embryosen
dc.typeTese de doutorado
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Botucatupt
unesp.embargoOnlinept
unesp.examinationboard.typeBanca públicapt
unesp.graduateProgramBiotecnologia Animal - FMVZpt
unesp.knowledgeAreaReprodução animalpt
unesp.researchAreaBiotecnologias da reproduçãopt

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Imagem de Miniatura
Nome:
scheeren_vfc_dr_bot.pdf
Tamanho:
1.56 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Baixar
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
license.txt
Tamanho:
3.02 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descrição:

Coleções

Teses - Biotecnologia Animal - FMVZ