Bioatividade dos Ácidos Retinóico e Ascórbico para Regeneração Endodôntica em Dentes com Rizogênese Incompleta e Despolpados
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Data
2023-11-30
Autores
Orientador
Josimeri Hebling 
Coorientador
Pós-graduação
Curso de graduação
Araraquara - FOAR - Odontologia
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Trabalho de conclusão de curso
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
Dentes jovens, especialmente aqueles com rizogênese incompleta, apresentam uma notável capacidade regenerativa devido à presença de uma via direta de suprimento sanguíneo e uma fonte abundante de células progenitoras na papila apical. Por essa razão, têm sido explorados procedimentos endodônticos regenerativos com o intuito de preservar e estimular essas células, visando o desenvolvimento de um novo
complexo dentina-polpa. Nesse contexto, busca-se desenvolver uma estratégia que, após a desinfecção do canal radicular, permita a continuidade do processo de formação radicular com fechamento apical, restaurando a homeostase, inervação e revascularização para promover a regeneração do tecido perdido. Além disso, a estabilidade e resistência mecânica do elemento dental estão intrinsecamente ligadas
ao comprimento e espessura das paredes dentinárias do conduto radicular. Para atingir esse objetivo, a utilização de moléculas bioativas tem sido sugerida como uma abordagem para estimular os processos regenerativos, mostrando resultados promissores. Diante desse contexto, torna-se relevante investigar moléculas sintéticas bioativas que possam estimular a migração, diferenciação e proliferação de células
progenitoras da papila apical, promovendo eventos compatíveis com a regeneração endodôntica. Portanto, este estudo investigou os efeitos bioativos do ácido retinoico (AR) e do ácido ascórbico (AA) sobre células da papila apical humana (hAPCs). hAPCs foram obtidas de terceiros molares humanos hígidos (N=4) e caracterizadas por citometria de fluxo. Os seguintes grupos experimentais foram estabelecidos:
controle negativo – CN (α-MEM), controle veículo – CV (α-MEM + 0,17% DMSO), AR 0,1, 1 e 10 µM, AA 3, 30 e 300 µM (n=8). Foram conduzidos ensaios de viabilidade na presença ou ausência de soro fetal bovino (alamarBlue, 1, 3 e 7d), formação de matriz mineralizada (Alizarin Red, 14d), e regulação da expressão de genes relacionados com regeneração pulpar (RT-qPCR, 1d). Os dados foram submetidos a ANOVAs e testes complementares considerando o nível de significância de 5%. A maioria das hAPCs da cultura primária expressou marcadores para células mesenquimais (≥62,3%). AA 300 µM aumentou a viabilidade enquanto AR reduziu de forma dosedependente. AR 0,1 µM, AA 30 e 300 µM aumentaram a formação de matriz mineralizada e síntese de colágeno total, e AR 10 µM diminuiu. AR 0,1 µM e AA 300
µM regularam positivamente a expressão de genes quimiotáticos, angiogênicos e colágenos I e III. Foi concluído que AR 0,1 µM e AA 300 µM bioestimularam hAPCs e
apresentam potencial para aplicação em procedimentos de regeneração pulpar.
Resumo (inglês)
Young teeth, especially those with incomplete rhizogenesis, present a remarkable regenerative capacity due to the presence of a direct supply route blood and an abundant source of progenitor cells in the apical papilla. For this reason, regenerative endodontic procedures have been explored with the aim of to preserve and stimulate these cells, aiming at the development of a new dentin-pulp complex. In this context, we seek to develop a strategy that, After disinfecting the root canal, allow the root canal process to continue. root formation with apical closure, restoring homeostasis, innervation and revascularization to promote regeneration of lost tissue. In addition stability and mechanical resistance of the dental element are intrinsically linked to the length and thickness of the dentin walls of the root canal. For achieve this objective, the use of bioactive molecules has been suggested as a approach to stimulate regenerative processes, showing results promising. Given this context, it becomes relevant to investigate synthetic molecules bioactives that can stimulate the migration, differentiation and proliferation of cells progenitors of the apical papilla, promoting events compatible with regeneration endodontics. Therefore, this study investigated the bioactive effects of retinoic acid (AR) and ascorbic acid (AA) on human apical papilla cells (hAPCs). hAPCs were obtained from sound human third molars (N=4) and characterized by flow cytometry. The following experimental groups were established: negative control – CN (α-MEM), vehicle control – CV (α-MEM + 0.17% DMSO), AR 0.1, 1 and 10 µM, AA 3, 30 and 300 µM (n=8). Viability tests were conducted in the
presence or absence of fetal bovine serum (alamarBlue, 1, 3 and 7d), matrix formation mineralized (Alizarin Red, 14d), and regulation of expression of related genes with pulp regeneration (RT-qPCR, 1d). The data was subjected to ANOVAs and complementary tests considering a significance level of 5%. Most of hAPCs from primary culture expressed markers for mesenchymal cells (≥62.3%). AA 300 µM increased viability while AR reduced it in a dose-dependent manner. AR 0.1 µM, AA 30 and 300 µM increased matrix formation mineralized and total collagen synthesis, and AR 10 µM decreased. AR 0.1 µM and AA 300
µM positively regulated the expression of chemotactic, angiogenic and collagens I and III. It was concluded that 0.1 µM AR and 300 µM AA biostimulated hAPCs and present potential for application in pulp regeneration procedures.
Descrição
Idioma
Português
Como citar
Lima GS. Bioatividade dos ácidos retinoico e ascórbico para regeneração endodôntica em dentes despolpados com rizogênese incompleta [Trabalho de Conclusão de Curso – Graduação em Odontologia]. Araraquara: Faculdade de Odontologia da UNESP; 2023.
