Padronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprina

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dc.contributor.authorRodrigues, A.s.
dc.contributor.authorBrito, R.l.l. [UNESP]
dc.contributor.authorPinheiro, R.r.
dc.contributor.authorDias, R.p.
dc.contributor.authorAlves, S.m.
dc.contributor.authorSouza, T.s.
dc.contributor.authorSouza, K.c.
dc.contributor.authorAzevedo, D.a.a.
dc.contributor.authorAndrioli, A.
dc.contributor.authorMagalhães, D.c.t.
dc.contributor.authorTeixeira, M.f.s.
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual do Ceará (UECE)
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.institutionEmpresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA)
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual do Vale do Acaraú (UVA)
dc.contributor.institutionUniversidade Federal da Bahia (UFBA)
dc.contributor.institutionAgência de Defesa Agropecuária do Estado do Ceará
dc.date.accessioned2014-09-30T18:18:25Z
dc.date.available2014-09-30T18:18:25Z
dc.date.issued2014-04-01
dc.description.abstractCaprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE.en
dc.description.abstractA artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE.pt
dc.description.affiliationUniversidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária
dc.description.affiliationUniversidade Estadual Paulista
dc.description.affiliationEmpresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária Embrapa Caprinos e Ovinos
dc.description.affiliationUniversidade Estadual Vale do Acaraú
dc.description.affiliationUniversidade Federal da Bahia Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia
dc.description.affiliationAgência de Defesa Agropecuária do Estado do Ceará
dc.description.affiliationUnespUniversidade Estadual Paulista
dc.format.extent417-424
dc.identifierhttp://dx.doi.org/10.1590/1678-41626303
dc.identifier.citationArquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia. Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinária, v. 66, n. 2, p. 417-424, 2014.
dc.identifier.doi10.1590/1678-41626303
dc.identifier.fileS0102-09352014000200014.pdf
dc.identifier.issn0102-0935
dc.identifier.scieloS0102-09352014000200014
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/109524
dc.identifier.wosWOS:000337146700014
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Escola de Veterinária
dc.relation.ispartofArquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia
dc.relation.ispartofjcr0.286
dc.relation.ispartofsjr0,248
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.sourceSciELO
dc.subjectespecificidadept
dc.subjectinfecçãopt
dc.subjectLVPRpt
dc.subjectsensibilidadept
dc.subjectsorologiapt
dc.subjectinfectionen
dc.subjectsensitivityen
dc.subjectserologyen
dc.subjectspecificityen
dc.subjectSRLVen
dc.titlePadronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprinapt
dc.title.alternativeStandardization of indirect Elisa and Western Blot for diagnosis of Caprine Arthritis-Encephalitisen
dc.typeArtigo

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