Desenvolvimento e avaliação de candidatos vacinais à base de proteínas da superfície celular de Sporothrix schenckii

dc.contributor.advisorCarlos, Iracilda Zeppone [UNESP]
dc.contributor.advisorDuharte, Alexander Batista [UNESP]
dc.contributor.authorPortuondo Fuentes, Deivys Leandro [UNESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2016-08-12T18:48:45Z
dc.date.available2016-08-12T18:48:45Z
dc.date.issued2015-07-03
dc.description.abstractSporotrichosis is a subacute or chronic infection affecting humans and other mammals, caused by the Sporothrix schenckii species complex. The disease has a worldwide distribution, but is considered endemic in Brazil, mainly in the state of Rio de Janeiro, where the cat has become the main transmitting agent. The antifungal treatment is very long and often associated to adverse effects indicating the demand for preventive or more effective and safe therapeutic strategies. One of the more promissory approaches would probably be the prophylactic or therapeutic vaccination. This study evaluated the immunogenicity and toxicity of cell surface protein-based (CSP) vaccine candidates of S. schenckii stricto sensu. The CSPs isolated with dithiotreitol were characterized by electrophoresis, mass spectrometry and FungalRV adhesin predictor. The CSPs were formulated with two adjuvants, aluminum hydroxide (AH) or gel PetA, or used alone, in two concentrations. The obtained formulations (CSP10, CSP100, AH+CSP10, AH+CSP100, PetA+ CSP10 and PetA+ CSP100) were administered to Balb/C mice in two subcutaneous doses at 2 weeks interval. The serum obtained from each group 7 days after the second dose was used to analyze the immunogenicity of each formulation. All the serum obtained from vaccinated groups, except those from CSP10 and AH+CSP10 groups, reacted with a 47 kDa band, previously identified as the glycolytic enolase enzyme and predicted as an adhesin in the FungalRV program. Subsequently, we demonstrated the presence this protein in the cell wall of S. schenckii, suggesting its immunogenic role. The induction of IgG and IgG2a immunoglobulins was significantly higher with AH+CSP100 and PetA+CSP100 formulations with respect to CSP10, CSP100, AH+CSP10, and PetA+CSP10. The significant induction of IgG1 and IgG2a subtypes and IL-12, IFN-γ, IL4 and IL-17 by AH+CSP100, suggests a balance ...en
dc.description.abstractA esporotricose é uma infecção subaguda ou crônica que afeta seres humanos e outros mamíferos, causada pelo complexo de espécies Sporothrix schenckii. A doença tem uma distribuição mundial, mas é endêmica no Brasil, principalmente no estado do Rio de Janeiro, onde o gato tem se tornado o principal agente transmissor. O tratamento antifúngico convencional é demorado e está associado a efeitos adversos, apontando a necessidade de terapias mais eficazes e seguras, sendo a vacinação profilática ou terapêutica provavelmente a alternativa mais promissora. Neste estudo foi avaliada a imunogenicidade e a toxicidade de candidatos vacinais à base de proteínas da superfície celular (PSCs) de S. schenckii stricto sensu. As PSCs isoladas com o agente redutor Ditiotreitol foram caracterizadas por eletroforese, espectrometria de massas e pelo programa preditor de adesinas FungalRV. As PCSs foram formuladas com dois adjuvantes, hidróxido de alumínio (HA) ou Gel PetA, em duas concentrações ou usadas isoladamente. As formulações resultantes (PSC10, PSC100, HA+PSC10, HA+PSC100, PetA+PSC10 e PetA+PSC100) foram administradas em duas doses pela via subcutânea em camundongos Balb/C com intervalo de 2 semanas. O soro obtido de cada grupo sete dias após a segunda dose foi usado para analisar a imunogenicidade de cada formulação. O soro de todos os grupos vacinados, exceto os grupos PSC10 e HA+PSC10, reagiram com uma banda de 47 kDa, previamente identificada como a enzima glicolítica enolase e predita como uma adesina pela base dados FungalRV. Posteriormente foi demonstrada por citometria de fluxo a presença dessa proteína na parede celular de S. schenckii, sugerindo o papel imunogênico da mesma. A indução das imunoglobulinas IgG e IgG2a foi significativamente maior com HA+PSC100 e Pet+PSC100 em relação a PSC10, PSC100, HA+PSC10 e PetA+PSC10. A indução...pt
dc.format.extent117 f. : tabs., figs. + anexo
dc.identifier.aleph000865792
dc.identifier.capes33004030078P6
dc.identifier.citationPORTUONDO FUENTES, Deivys Leandro. Desenvolvimento e avaliação de candidatos vacinais à base de proteínas da superfície celular de Sporothrix schenckii. 2015. 117 f. Tese (doutotado) - Universidade Estdual Paulista Júlio de Mesquita Fiho, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, 2015.
dc.identifier.file000865792.pdf
dc.identifier.lattes1730146818754269
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/142995
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso aberto
dc.sourceAleph
dc.subjectEsporotricosept
dc.subjectVacinaspt
dc.subjectEletroforesept
dc.subjectEspectrometria de massapt
dc.subjectImunologia clínicapt
dc.subjectEpidemiologiapt
dc.subjectFungos - Extração de proteinaspt
dc.subjectSporotrichosispt
dc.titleDesenvolvimento e avaliação de candidatos vacinais à base de proteínas da superfície celular de Sporothrix schenckiipt
dc.typeTese de doutorado
unesp.author.lattes1730146818754269
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Araraquarapt
unesp.graduateProgramCiências Farmacêuticas - FCFARpt
unesp.knowledgeAreaAnálises Clínicaspt
unesp.researchAreaDesenvolvimento e avaliação da imunogenicidade e toxicidade de formulações vacinais, adjuvantes vacinais, toxicidade e imunologia de substâncias químicas e produtos naturaispt

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Carregando...
Imagem de Miniatura
Nome:
000865792.pdf
Tamanho:
3.48 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format