Efeito do inibidor da recaptação de serotonina e noradrenalina (venlafaxina) na histofisiologia de glândulas submandibulares de ratos adultos

Abstract

A saliva, produzida pelas glândulas salivares (GSs), é uma secreção composta por vários componentes essenciais para a manutenção estrutural e funcional da cavidade oral. No parênquima glandular, os ácinos serosos e os ductos (incluindo o túbulo convoluto granular, nos roedores) atuam, em conjunto, na produção e liberação dos componentes salivares. No tecido conjuntivo das GSs, há a presença dos mastócitos, que secretam vários produtos, incluindo a serotonina, cuja função nessas glândulas ainda não é totalmente esclarecida. O consumo de antidepressivos vem aumentando desde o início da pandemia de COVID-19, e a xerostomia (boca seca) vem sendo um dos sintomas orais mais comuns. A venlafaxina, um antidepressivo da classe dos inibidores de recaptação de serotonina e noradrenalina, aumenta a concentração destes neurotransmissores no cérebro, amenizando o efeito depressivo. Entretanto, existem poucos estudos sobre o impacto deste fármaco na histofisiologia das glândulas salivares. Neste estudo, foi proposto avaliar o efeito da venlafaxina na integridade estrutural e funcional das glândulas submandibulares (GSMs), com ênfase no número de mastócitos e na imunoexpressão de V-ATPase, actina e EGF. Dez ratos adultos foram divididos em dois grupos (n=5): Grupo Venlafaxina (GVF-35) e Grupo Controle (GC). Os animais do GVF-35 receberam 30mg/Kg p.c. de cloridrato de venlafaxina por gavagem durante 35 dias, e os animais do GC receberam volume correspondente de água destilada. As GSMs foram coletadas, fixadas e processadas para inclusão em parafina. Os cortes corados com H.E e P.A.S, foram utilizados para análises morfométricas para obtenção do diâmetro dos túbulos convolutos granulares (TCG) e área nuclear dos ácinos. Foi avaliada também a ocorrência de morte celular no tecido glandular pelo método de TUNEL. Nos cortes corados com azul de toluidina a 1%, foi quantificado o número de mastócitos em área de tecido conjuntivo padronizada. Os resultados foram submetidos a análise estatística pelo Test-t de Student (p≤0,05). Nos animais do GVF-35, foi possível observar uma redução no diâmetro dos TCG e na densidade de núcleos acinares. Tanto nas células acinares quanto tubulares, foi notada a presença de vários núcleos irregulares e picnóticos, bem como aumento de células TUNEL-positivas, confirmando que a redução dos TCG foi causada por morte celular. Os grânulos de secreção dos TCGs nos animais do GVF-35 estavam mais condensados e compactados em comparação ao GC, formando massas PAS-positivas, de forma semelhante à reação de imunofluorescência para EGF, o qual aumentou signficantemente. Além disso, a imunoexpressão de V-ATPase nos ductos estriados reduziu e sua distribuição no citoplasma celular (normalmente apical) foi alterada pelo tratamento. Houve também um aumento significante no número de mastócitos que parece corroborar a ação inibidora do fármaco na recaptação de serotonina. Portanto, a venlafaxina causa alterações estruturais e funcionais na estrutura glandular, e algumas destas alterações confirmam o efeito de xerostomia causado por este antidepressivo.

The salivary secretion, produced by the salivary glands (SG), is composed of several components essential for the structural and functional maintenance of the oral cavity. In the glandular parenchyma, the serous acini and ducts (including the granular convoluted tubule, in rodents) act together in the production and release of salivary components. In the connective tissue of the SG, there is the presence of mast cells, which secrete several products, including serotonin, whose function in these glands is not yet fully understood. The consumption of antidepressants has been increasing since the beginning of the COVID-19 pandemic, and xerostomia (dry mouth) has been one of the most common oral symptoms. Venlafaxine, an antidepressant from the serotonin and norepinephrine reuptake inhibitor class, increases the concentration of these neurotransmitters in the brain, alleviating the depressive effect. However, there are few studies on the impact of this drug on the histophysiology of the salivary glands. In this study, it will be proposed to evaluate the effect of venlafaxine on the structural and functional integrity of the submandibular glands (SMG), with emphasis on the number of mast cells and the immunoexpression of V-ATPase, actin and EGF. Ten adult rats were divided into two groups (n=5): Venlafaxine Group (GVF-35) and Control Group (CG). GVF-35 animals received 30mg/kg p.c. of venlafaxine hydrochloride by gavage for 35 days, and the CG animals received a corresponding volume of distilled water. SMG were collected, fixed, and processed for paraffin embedding. The sections stained with H.E and P.A.S were used for morphometric analyzes to obtain the diameter of the granular convoluted tubules (GCT) and nuclear area of the acini. The occurrence of cell death in glandular tissue was also evaluated using the TUNEL method. In sections stained with 1% toluidine blue, the number of mast cells was quantified in a standardized connective tissue area. The results were subjected to statistical analysis using Student's t-test (p≤0.05). In GVF-35 animals, it was possible to observe a reduction in the diameter of the GCT and in the density of acinar nuclei. In both acinar and tubular cells, the presence of several irregular and pyknotic nuclei was noted, as well as an increase in TUNEL-positive cells, confirming that the reduction in GCTs was caused by cell death. The secretion granules of the GCTs in the GVF-35 animals were more condensed and compacted compared to the GC, forming PAS-positive masses, in a similar way to the immunofluorescence reaction for EGF, which increased significantly. Furthermore, the immunoexpression of V-ATPase in the striated ducts was reduced and its distribution in the cell cytoplasm (normally apical) was altered by the treatment. There was also a significant increase in the number of mast cells, which seems to corroborate the drug's inhibitory action on serotonin reuptake. Therefore, venlafaxine causes structural and functional changes in the glandular structure, and some of these changes confirm the xerostomia effect caused by this antidepressant.