Adição da gelatina ao meio diluente de refrigeração de sêmen equino

Abstract

A refrigeração de sêmen é uma biotecnologia que dá suporte para a reprodução equina. Nessa técnica o sêmen acrescido de meio diluente, no estado líquido, é submetido a diminuição da temperatura para 5 e 15°C, proporcionando redução do metabolismo espermático e aumento da sua vida útil. No entanto, há um decréscimo da viabilidade espermática após 24 horas de refrigeração, sendo um dos motivos a seimentação dos espermatozoides para o fundo do recipiente com consequente oscilação do pH e ,embora o metabolismo continue em menores proporções, há produção de substâncias prejudiciais ao sêmen. Uma alternativa a esse problema seria a utilização de meio diluente mais viscoso ou até sólido dificultando a sedimentação espermática. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi avaliar a cinética e integridade da membrana plasmática, em sêmen equino refrigerado em meio diluente com adição de gelatina. A pesquisa foi dividida em duas etapas, no experimento I utilizou-se 6 garanhões, cada ejaculado colhido foi dividido em nove grupos: BS[]0%, BS[]1%, BS[]2%, BSS[]0%, BSS[]1%, BSS[]2%, BSG[]0%, BSG[]1%, BSG[]2%, onde as letras representam os meios BotuSÊMEN®-BS, BotuSÊMEN® SPECIAL-BSS, BotuSÊMEN® GOLD-BSG, e ‘’[]’’ referem-se a porcentagem da concentração de gelatina (0, 1 e 2%), e refrigerados a 5 e 15°C. No experimento II utilizou-se 20 garanhões, e cada ejaculado foi dividido em dois grupos BSG[]0% ou BSG[]2%, e refrigerado a 5°C. Os grupos foram refrigerados e avaliados nos momentos 24, 48 e 72 horas. A adição de gelatina, foi eficaz em mudar o estado físico, de líquido para sólido, sendo totalmente revertido, após aquecimento a 37°C até 10 minutos. É possível concluir que a adição de gelatina, nas concentrações de 1 e 2%, ao meio diluente de refrigeração equino não prejudicou a MT, MP e RAP, mas diminuiu as velocidades VAP, VSL e VCL. A gelatina na concentração de 2% não prejudicou a integridade de membrana acrossomal nem aumentou a peroxidação lipídica. Sendo necessário mais estudos na área com avaliação de novos parâmetros espermáticos e fertilidade.

Semen cooling is a biotechnology that supports equine reproduction. In this technique, the semen plus diluent medium, in the liquid stage, is subjected to a decrease in temperature to 5 or 15°C, providing a reduction in sperm metabolism and an increase in its useful life. However, there is a decrease in sperm viability after 24 hours of refrigeration, one of the reasons being the sedimentation of spermatozoa to the bottom of the container with consequent pH ocillation and, although metabolism continues in smaller proportions, there is production of substances harmful to semen. An alternative to this problem would be the use of a more viscous or even solid diluent medium, making sperm sedimentation difficult. In this sense, the objective of the present work was to evaluate the kinetics and integrity of the plasma membrane in equine semen refrigerated in diluent medium with the addition of gelatin. The research was divided into two stages, in experiment I 6 stallions were used, each ejaculate collected was divided into nine groups: BS[]0%, BS[]1%, BS[]2%, BSS[]0%, BSS[]1%, BSS[]2%, BSG[]0%, BSG[]1%, BSG[]2%, where the letters represent BotuSÊMEN®-BS, BotuSÊMEN® SPECIALBSS, BotuSÊMEN® GOLD -BSG, and ''[]'' refer to the percentage of gelatin concentration (0, 1 or 2%), and refrigerated at 5 or 15°C. In experiment II, 20 stallions were used, and each ejaculate was divided into two groups BSG[]0% or BSG[]2%, and refrigerated at 5°C. The groups were refrigerated and evaluated at 24, 48 and 72 hours. The addition of gelatin was effective in changing the physical state from liquid to solid, being completely reversed after heating at 37°C for up to 10 minutes. It is possible to conclude that the addition of gelatin, at concentrations of 1 or 2%, to the diluent medium of equine cooling did not harm MT, MP and RAP, but decreased VAP, VSL and VCL velocities. Gelatin at a concentration of 2% did not impair the integrity of the acrosomal membrane or increase lipid peroxidation. More studies are needed in the area with evaluation of new sperm parameters and fertility.