Efeito pró-osteogênico da cistatina recombinante de cana-de-açúcar CaneCPI-5 em células pulpares humanas
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Data
2022-06-28
Autores
Orientador
Faria, Gisele 
Coorientador
Pós-graduação
Odontologia - FOAR
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso restrito
Resumo
Resumo (português)
O aumento da atividade de cisteína catepsinas (um grupo de cisteíno proteases) está relacionado ao desenvolvimento de doenças osteolíticas, como a osteoporose e a periodontite apical, por participarem da reabsorção óssea por meio da degradação proteolítica de componentes da matriz orgânica. As cistatinas são inibidores naturais e reversíveis de cisteíno proteases. As fitocistatinas são cistatinas de plantas, sendo que algumas delas já foram produzidas de forma recombinante, como a CaneCPI-5 (derivada da cana-de-açúcar), a qual é foco deste estudo por ter apresentado potencial pró-osteogênico observado em estudo preliminar do nosso grupo de pesquisa. O objetivo deste estudo foi avaliar a citocompatibilidade e o efeito da CaneCPI-5 sobre a proliferação, migração, diferenciação osteo/odontogênica de células-tronco mesenquimais da polpa dental humana (hDPSCs). As hDPSCs expostas à CaneCPI- 5 e não expostas (controle) foram avaliadas quanto à viabilidade por meio do ensaio de alamarBlue, proliferação pelo ensaio de incorporação de bromodeoxiuridina (BrdU), migração por ensaio de transwell, deposição de precipitados inorgânicos pela coloração de vermelho de alizarina e quanto a atividade da enzima fosfatase alcalina tecidual inespecífica (TNAP). Os dados foram avaliados por ANOVA de uma ou duas vias, seguido do pós-teste de Tukey, ou Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn, ou Mann Whitney, com α = 0,05. A CaneCPI-5 foi citocompatível, induziu maior migração, proliferação, formação de nódulos mineralizados e atividade da TNAP em hDPSCs em relação ao controle. Assim, pode-se concluir que a CaneCPI-5 se constitui em molécula com potencial promissor para ser utilizada em terapias que visam o reparo/regeneração pulpar e periapical.
Resumo (inglês)
The increase in cysteine cathepsins activity (a group of cysteine proteases) is related to the development of osteolytic diseases, such as osteoporosis and apical periodontitis, as they participate in bone resorption through the proteolytic degradation of organic matrix components. Cystatins are natural and reversible inhibitors of cysteine proteases. Phytocystatins are plant cystatins, some of them have already been produced recombinantly, such as CaneCPI-5 (derived from sugarcane), which is the focus of this study because it showed pro-osteogenic potential observed in a preliminary study of our research group. The aim of this study is to evaluate the cytocompatibility and effect of CaneCPI-5 on proliferation, migration, osteogenic and odontogenic differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs). hDPSCs exposed to CaneCPI-5 and unexposed (control) were evaluated for viability using the alamarBlue assay, proliferation by bromodeoxyuridine incorporation (BrdU) assay, migration by transwell assay, deposition of inorganic precipitates by alizarin red staining and tissue-nonspecific alkaline phosphatase (TNAP) enzyme activity. Data were evaluated by one-way or two-way ANOVA, followed by Tukey or Kruskal-Wallis post-test and Dunn or Mann Whitney post-test, with α = 0.05. CaneCPI-5 was cytocompatible, induced higher migration, proliferation, formation of mineralized nodules and TNAP activity in hDPSCs compared to control. Thus, it can be concluded that CaneCPI-5 constitutes a molecule with promising potential to be used in therapies that aim the pulp and periapical repair/regeneration.
Descrição
Palavras-chave
Idioma
Português