Avaliação microbiológica, anti-inflamatória e da capacidade de indução de mineralização de flavonoides como agentes para aplicação em odontologia

Página do item simplificado
dc.contributor.advisorRegasini, Luis Octavio [UNESP]
dc.contributor.authorDuque, Cristiane
dc.contributor.institutionUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.date.accessioned2021-10-27T14:26:40Z
dc.date.available2021-10-27T14:26:40Z
dc.date.issued2021-10-01
dc.description.abstractTerapias biológicas atuais visam recuperar as funções fisiológicas do complexo dentinopulpar, preservar os tecidos pulpares/periapicais remanescentes e permitir a formação radicular completa em dentes permanentes jovens com infecções endodônticas. Neste contexto, os flavonoides poderiam ser moléculas interessantes a serem empregadas no tratamento endodôntico devido à sua amplitude terapêutica. Este estudo teve três objetivos principais: (1) avaliar a citotoxicidade e os efeitos antimicrobiano/antibiofilme de flavonoides sobre microrganismos de interesse endodôntico; (2) avaliar a citotoxicidade e o efeito de flavonoides sobre marcadores fenotípicos e genotípicos de dentinogênese em células odontoblastóides e (3) avaliar a citotoxicidade e o efeito de flavonoides sobre a produção de marcadores de estresse oxidativo por macrófagos. A atividade antimicrobiana/antibiofilme dos flavonoides EGCG, taxifolina, miricetina, pinocembrina, crisina, galangina, canferol, quercetina e naringina foram avaliadas pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração bactericida mínima (CBM) e ensaios de biofilme mono-espécies, dual-espécies, multiespécies em microplacas e biofilme em dentina radicular com bactérias de interesse odontológico. Os compostos também foram analisados quanto à sua toxicidade sobre fibroblastos L929, pelo ensaio de MTT. Em cultura de células odontoblastóides MDPC-23, os flavonoides foram avaliados quanto ao efeito citotóxico, sobre a atividade de fosfatase alcalina (ALP), na deposição de matriz mineralizada e expressão gênica de ALP, metaloproteinases -2 e -9 (MMP-2 e MMP-9), proteína da matriz dentinária-1 (DMP-1) e sialofosfoproteína dentinária (DSPP). Os flavonoides também foram triados em cultura de macrófagos RAW.267 quanto a citotoxicidade, por ensaios de resazurina, e submetidos aos ensaios de inibição de óxido nítrico (NO) e espécies reativas de oxigênio (ROS), na presença de lipopolissacarídeo (LPS). Os dados foram analisados estatisticamente (p<0,05). EGCG e taxifolina apresentaram os melhores efeitos inibitórios contra as espécies bacterianas testadas, principalmente E. faecalis e não foram citotóxicos dentro das CIM obtidas. Além disso, ambos reduziram estatisticamente os biofilmes monoespécies de E. faecalis, A. israelii, S. mutans, L. casei e F. nucleatum, dual-espécies entre essas espécies e E. faecalis, multiespécies com todas essas espécies e em dentina radicular com E. faecalis. EGCG, taxifolina e canferol estimularam a atividade de fosfatase alcalina e a deposição de matriz mineralizada. Além disso, taxifolina e EGCG aumentaram a expressão de ALP sem diferença estatística entre eles, enquanto a taxifolina aumentou notavelmente a expressão de DMP-1 e DSPP. Na presença de LPS, os flavonoides testados levaram à redução dos níveis de NO e ROS, em macrófagos, destacando-se EGCG, taxifolina, miricetina e canferol. Conclui-se que EGCG e taxifolina apresentam potencial antimicrobiano, antibiofilme, anti-inflamatório e indutor de mineralização. Esses flavonoides poderiam ser agentes promissores para aplicação em Endodontia, visando promover a desinfecção dos canais radiculares, controlar a inflamação e estimular o reparo dentinário.pt
dc.description.abstractCurrent biological therapies aim to recover the physiological functions of the pulp-dentin complex, preserve the remaining pulp/periapical tissues and allow complete root formation in young permanent teeth with endodontic infections. In this context, flavonoids could be interesting molecules to be used in endodontic treatment due to their therapeutic range. This study had three main objectives: (1) to evaluate the cytotoxicity and antimicrobial/antibiofilm effects of flavonoids on microorganisms of endodontic interest; (2) to evaluate the cytotoxicity and effect of flavonoids on phenotypic and genotypic markers of dentinogenesis in odontoblast-like cells and (3) to evaluate the cytotoxicity and effect of flavonoids on the production of oxidative stress markers by macrophages. The antimicrobial/antibiofilm activity of the flavonoids EGCG, taxifolin, myricetin, pinocembrin, chrysin, galangin, kaempferol, quercetin and naringin were evaluated by determining the minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and monospecies, dual-species and multispecies biofilm assays in microplates and biofilm in root dentin with bacteria of dental interest. The compounds were also analyzed for their toxicity on L929 fibroblasts by the MTT assay. In MDPC-23 odontoblast-like cell cultures, flavonoids were evaluated for their cytotoxicity, effect on alkaline phosphatase (ALP) activity, in the deposition of mineralized matrix and gene expression of ALP, metalloproteinases -2 and -9 (MMP-2 and MMP- 9), dentin matrix protein-1 (DMP-1) and dentin sialophosphoprotein (DSPP). Flavonoids were also screened in RAW.267 macrophage cultures for cytotoxicity, by resazurin assays, and submitted to nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) inhibition assays in the presence of lipopolysaccharide (LPS). Data were analyzed statistically (p<0.05). EGCG and taxifolin showed the best inhibitory effects against the bacterial species tested, mainly E. faecalis and were not cytotoxic within the MICs obtained. Furthermore, both flavonoids statistically reduced the monospecies biofilms of E. faecalis, A. israelii, S. mutans, L. casei and F. nucleatum, dual-species biofilms between these species and E. faecalis, multispecies biofilms with all these species and in root dentin with E. faecalis. EGCG, taxifolin and kaempferol stimulated alkaline phosphatase activity and deposition of mineralized matrix. Furthermore, taxifolin and EGCG increased ALP expression without statistical difference between them, while taxifolin increased DMP-1 and DSPP expression. In the presence of LPS, the flavonoids tested reduced the levels of NO and ROS in macrophages, especially EGCG, taxifolin, myricetin and kaempferol. It is concluded that EGCG and taxifolin have antimicrobial, antibiofilm, anti-inflammatory and potential to induce dentin mineralization. These flavonoids may be promising agents for application in Endodontics, aiming to promote the disinfection of root canals, control inflammation and stimulate dentin tissue repair.en
dc.identifier.capes33004153074P9
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11449/214906
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.rights.accessRightsAcesso restrito
dc.subjectFlavonoidespt
dc.subjectAção antimicrobianapt
dc.subjectBiofilmespt
dc.subjectCitotoxicidadept
dc.subjectDentinogênesept
dc.subjectAtividade anti-inflamatóriapt
dc.subjectFlavonoidsen
dc.subjectAntimicrobial actionen
dc.subjectBiofilmsen
dc.subjectCytotoxicityen
dc.subjectDentinogenesisen
dc.subjectAnti-inflammatory activityen
dc.titleAvaliação microbiológica, anti-inflamatória e da capacidade de indução de mineralização de flavonoides como agentes para aplicação em odontologiapt
dc.title.alternativeMicrobiological and anti-inflammatory evaluation and capacity of mineralization induction of flavonoids as agents for application in dentistryen
dc.typeTese de doutorado
unesp.campusUniversidade Estadual Paulista (Unesp), Instituto de Biociências Letras e Ciências Exatas, São José do Rio Pretopt
unesp.embargo24 meses após a data da defesapt
unesp.examinationboard.typeBanca públicapt
unesp.graduateProgramMicrobiologia - IBILCEpt
unesp.knowledgeAreaMicrobiologiapt
unesp.researchAreaBioprodutos: produção e aplicação em microrganismospt

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 2 de 2
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
duque_c_dr_sjrp_int.pdf
Tamanho:
6.92 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Baixar
Imagem de Miniatura
Nome:
duque_c_dr_sjrp_par.pdf
Tamanho:
731.22 KB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Baixar
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
license.txt
Tamanho:
3.04 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descrição:

Coleções

Teses - Microbiologia - IBILCE