Caracterização do perfil de internalização celular de nanopartículas magnéticas em queratinócitos

Dentre as vias de administração de fármacos, a via tópica oferece vantagens, como por exemplo evitar o metabolismo de primeira passagem e possibilitar a aplicação direcionada à pele. Contudo, barreiras estruturais, como o estrato córneo, limitam a penetração de fármacos, motivando o desenvolvimento de sistemas nanoestruturados para otimizar a biodisponibilidade e a eficácia terapêutica. Dentre eles, destacam-se as nanopartículas magnéticas (MNPs) revestidas com citrato (Cit-MNPs), capazes de serem guiadas por campos magnéticos externos e utilizadas para entrega de fármacos. Assim, o objetivo deste trabalho foi de realizar o processo de internalização celular de MNPs em queratinóticos humanos in vitro, utilizando as técnicas de Biosusceptometria de Corrente Alternada (BAC), Electron Paramagnetic Resonance (EPR) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM) para monitoramento e caracterização desse processo. Adicionalmente, avaliou-se a viabilidade celular por meio do ensaio de MTT. As CitMNPs foram sintetizadas e caracterizadas, sendo aplicadas em culturas de células HaCat nas concentrações de 5%, 10% e 15%, com tempos de interação de 1h, 6h, 12h e 24h. Amostras contendo partículas que não aderiram à superfície da placa (sobrenadante) e as que aderiram (partículas com células) foram avaliadas no sensor de Cavidade BAC e no EPR, que revelaram aumento progressivo da sinalização magnética ao longo do tempo, especialmente nas concentrações de 10% e 15%. O teste de MTT demonstrou alta viabilidade celular (>90%) após 24h de exposição, embora após 72h tenha sido observada redução da viabilidade, possivelmente associada ao tempo prolongado de contato e à depleção de nutrientes. A análise por TEM confirmou a presença de MNPs no interior celular, incluindo citoplasma e regiões perinucleares, além de partículas aderidas à membrana plasmática. Os resultados obtidos nesse estudo evidenciam que as técnicas BAC e EPR são eficazes para quantificar MNPs em sistemas celulares, enquanto o TEM fornece comprovação morfológica da internalização. As Cit-MNPs mostraram potencial para aplicações tópicas em liberação controlada de fármacos e diagnósticos, embora estudos adicionais sejam necessários para elucidar mecanismos de captação e impacto funcional sobre as células.

Palavras-chave

Biosusceptometria de Corrente Alternada, Queratinócitos, Ressonância Paramagnética Eletrônica, Nanopartículas Magnéticas, Cultura Celular

Idioma

Português

Citação

BRANDÃO, Vitor Melo. Caracterização do perfil de internalização celular de nanopartículas magnéticas em queratinócitos. 2025. Dissertação (Mestrado em Ciências Biomoleculares e Farmacológicas) - Instituto de Biociências, Universidade Estadual Paulista (UNESP), Botucatu, 2025