Caracterização do perfil de internalização celular de nanopartículas magnéticas em queratinócitos

Abstract

Dentre as vias de administração de fármacos, a via tópica oferece vantagens, como por exemplo evitar o metabolismo de primeira passagem e possibilitar a aplicação direcionada à pele. Contudo, barreiras estruturais, como o estrato córneo, limitam a penetração de fármacos, motivando o desenvolvimento de sistemas nanoestruturados para otimizar a biodisponibilidade e a eficácia terapêutica. Dentre eles, destacam-se as nanopartículas magnéticas (MNPs) revestidas com citrato (Cit-MNPs), capazes de serem guiadas por campos magnéticos externos e utilizadas para entrega de fármacos. Assim, o objetivo deste trabalho foi de realizar o processo de internalização celular de MNPs em queratinóticos humanos in vitro, utilizando as técnicas de Biosusceptometria de Corrente Alternada (BAC), Electron Paramagnetic Resonance (EPR) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM) para monitoramento e caracterização desse processo. Adicionalmente, avaliou-se a viabilidade celular por meio do ensaio de MTT. As CitMNPs foram sintetizadas e caracterizadas, sendo aplicadas em culturas de células HaCat nas concentrações de 5%, 10% e 15%, com tempos de interação de 1h, 6h, 12h e 24h. Amostras contendo partículas que não aderiram à superfície da placa (sobrenadante) e as que aderiram (partículas com células) foram avaliadas no sensor de Cavidade BAC e no EPR, que revelaram aumento progressivo da sinalização magnética ao longo do tempo, especialmente nas concentrações de 10% e 15%. O teste de MTT demonstrou alta viabilidade celular (>90%) após 24h de exposição, embora após 72h tenha sido observada redução da viabilidade, possivelmente associada ao tempo prolongado de contato e à depleção de nutrientes. A análise por TEM confirmou a presença de MNPs no interior celular, incluindo citoplasma e regiões perinucleares, além de partículas aderidas à membrana plasmática. Os resultados obtidos nesse estudo evidenciam que as técnicas BAC e EPR são eficazes para quantificar MNPs em sistemas celulares, enquanto o TEM fornece comprovação morfológica da internalização. As Cit-MNPs mostraram potencial para aplicações tópicas em liberação controlada de fármacos e diagnósticos, embora estudos adicionais sejam necessários para elucidar mecanismos de captação e impacto funcional sobre as células.