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Publicação:
Avaliação da estrutura e atividade biológica do mastoparano Polybia-MPII marcado com fluoróforo e visualização de sua ação em mastócitos através da microscopia de fluorescência

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Data

Orientador

Palma, Mario Sergio
Souza, Bibiana Monson de

Coorientador

Pós-graduação

Curso de graduação

Ciências Biológicas - IBRC

Título da Revista

ISSN da Revista

Título de Volume

Editor

Universidade Estadual Paulista (Unesp)

Tipo

Trabalho de conclusão de curso

Direito de acesso

Acesso abertoAcesso Aberto

Resumo

Os venenos de vespas têm importantes ações farmacológicas e imunológicas durante os envenenamentos (HABERMANN, 1972). A liberação de histamina a partir da desgranulação dos mastócitos pode causar ativação de vários processos inflamatórios. As toxinas peptídicas destes venenos podem ainda causar lise de diferentes tipos celulares, quimiotaxia de macrófagos e leucócitos. Dentre os peptídeos mais comuns aos venenos de vespas sociais estão os mastoparanos, conhecidos por interagirem com membranas celulares, causando diferentes ações farmacológicas como, por exemplo, o Polybia-MPII isolado do veneno de Polybia paulista (DE SOUZA, 2005). Desta forma, a proposta deste trabalho foi de identificar possíveis locais de atuação deste peptídeo no interior dos mastócitos, através de fluorescência. A preparação do peptídeo para acoplamento de um grupo fluoróforo exigiu a cisteinilação do mesmo, e a caracterização do peptídeo modificado. Para obtenção dos peptídeos foi utilizada a técnica de síntese automática de peptídeos em fase sólida, com posterior purificação em cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC), e análise em espectrometria de massas para verificação da pureza, para assim serem realizados os ensaios de antibiose e desgranulação de mastócito. Além disso, foram realizadas análises de dicroísmo circular para verificar as alterações estruturais causados pela modificação na estrutura do Polybia-MPII, e experimento de microscopia de fluorescência, utilizando-se o peptídeo marcado com fluoróforo, em mastócitos do peritônio de camundongos Wistar fêmea. As formas sintéticas dos peptídeos Polybia-MPII e cisteinil-Polybia-MPII (C-Polybia-MPII) foram purificados sob condições isocráticas, utilizando-se acetonitrila 45% (v/v) e 42 % (v/v), respectivamente, como fase móvel. Posteriormente, as massas moleculares de ambos os peptídeos e o grau...

Descrição

Palavras-chave

Vespa, Vespa - Veneno, Mastócitos, Microscopia de fluorescencia, Peptídeos, Peptídeos - Síntese, Dicroismo circular

Idioma

Português

Como citar

SATO, Kenny Umino. Avaliação da estrutura e atividade biológica do mastoparano Polybia-MPII marcado com fluoróforo e visualização de sua ação em mastócitos através da microscopia de fluorescência. 2017. 39 f. Trabalho de conclusão de curso (bacharelado e licenciatura - Ciências Biológicas) - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Instituto de Biociências (Campus de Rio Claro), 2017.

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