Publicação: Uso de ultrassom associado à terapia fotodinâmica antimicrobiana na remoção de lesão cariosa artificial em dentina
Carregando...
Data
Autores
Orientador
Rastelli, Alessandra Nara de Souza 
Coorientador
Pós-graduação
Ciências Odontológicas - FOAR
Curso de graduação
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
Tipo
Dissertação de mestrado
Direito de acesso
Acesso aberto
Resumo
Resumo (português)
Visando uma abordagem mais conservadora durante a remoção da cárie dentária, torna-se importante a avaliação de novos dispositivos que minimizem o desgaste da estrutura dentinária e terapias complementares que promovam a descontaminação da dentina remanescente. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar in vitro a eficiência do uso do ultrassom descariador após a remoção da camada de dentina infectada e a ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) mediada por curcumina na descontaminação da camada de dentina afetada. Previamente aos experimentos, foi determinado o melhor solvente para solubilizar a curcumina, o tempo pré-irradiação mais adequado e a concentração inibitória e bactericida mínima (CIM e CBM) da curcumina. Após, foram obtidos espécimes de dentina bovina (n=187), medindo 4x4x2 mm e realizou-se análise de microdureza Knoop superficial para padronização dos espécimes (29,4 ±3 KHN). Foram induzidas lesões artificiais de cárie na dentina com cepa de Streptococcus mutans (modelo biológico) de acordo com o protocolo estabelecido após análise por luz polarizada. A camada de dentina infectada foi removida por 1 min, com as técnicas: fresa esférica em baixa rotação, escavador de dentina (cureta) e ultrassom descariador. Para avaliação da taxa de remoção (n=10), os espécimes foram pesados em 3 momentos: T1 (previamente à indução), T2 (após indução) e T3 (após a remoção). Em seguida, realizou-se análise de microdureza Knoop longitudinal (n=10). Para análise quantitativa de células viáveis (UFC/mL), os espécimes (n=9) foram irradiados uniformemente com sistema de iluminação a LED (Biotable, MMOptics) em comprimento de onda de 460 nm com dose/densidade de energia de 15 J/cm2 após a remoção da dentina cariada. Adicionalmente, avaliou-se a viabilidade celular por meio da microscopia confocal (n=2). Aplicou-se teste de Shapiro-Wilk (para normalidade) e ANOVA a 1 e a 2 fatores com nível de significância de 5%. A CIM e a CBM da curcumina foi de 67,5 µM incorporada ao solvente Dimetilsulfóxido (DMSO). O tempo pré-irradiação foi de 5 min. De acordo com a análise de luz polarizada, o protocolo utilizado para a indução da lesão cariosa foi de 7 dias. De acordo com a taxa de remoção, não houve diferença estatisticamente significante entre os tempos T1 e T2 (baseline). Já em relação aos tempos T2 e T3, houve diferença estatística significante (p≤0,029). Grupos tratados com ultrassom, promoveram menor taxa de remoção. Na microdureza longitudinal, considerando as técnicas de remoção, nas mesmas profundidades, quase em todos os grupos observou-se diferença estatística significante (p≤0,05). Considerando as diferentes profundidades em um mesmo grupo, houve diferença significativa em todas as profundidades (p≤0,05). Os grupos tratados com TFDA após a remoção da camada de dentina infectada, demonstraram diferença estatística significante quando comparado aos grupos não tratados (p≤0,01). De acordo com os resultados de UFC/mL e viabilidade do biofilme de Streptococcus mutans observou-se redução após aplicação da TFDA. De forma geral, pôde-se concluir que o ultrassom descariador é eficiente para a remoção da camada de dentina infectada e a TFDA pode ser utilizada como terapia complementar com a finalidade de reduzir as bactérias presentes na camada de dentina afetada.
Resumo (português)
Aiming for a more conservative approach during caries lesion removal, it is important to study new devices that minimize wear of the dentin structure and complementary therapies that promote the decontamination of the remaining dentin. Thus, the aim of this study was to evaluate in vitro the efficiency of the infected dentin layer removal with low power ultrasound device and after removal, the effect of curcumin-mediated antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) in the affected dentin layer. Prior to the experiments, the best solvent for solubilizing curcumin, the most appropriate preirradiation time and the minimal inhibitory and bactericidal concentration MIC and MBC of curcumin were determined. Afterwards, bovine dentin specimens (n=187) were obtained, measuring 4x4x2 mm and superficial Knoop microhardness analysis was performed to standardize the specimens (29.4 ± 3 KHN). Artificial caries lesions were induced in the dentin with Streptococcus mutans strain (biological model) according to the protocol established after polarized light analysis. The carious dentin was removed for 1 min using the following methods: low-speed rotation spherical bur, dentin excavator and ultrasound device. To evaluate the removal rate (n=10), the specimens were weighed in 3 times: T1 (previously induction), T2 (after induction) and T3 (after removal). Afterwards, a longitudinal microhardness analysis was performed (n=10). For quantitative analysis of viable cells (CFU/mL), the specimens (n=9) were uniformly irradiated with an LED lighting system (Biotable, MMO) at a wavelength of 440 nm with a dose/energy density of 15 J/cm2 after removal of affected dentin. Cell viability was assessed using confocal microscopy (n=2). Shapiro-Wilk test (for normality) and ANOVA with 1 and 2 factors were applied with a 5% significance level. The MIC and MBC of curcumin were 67.5 µM incorporated into the Dimethylsulfoxide (DMSO) solvent and the pre-irradiation time was 5 min. According to the polarized light analysis, the protocol used to induce the carious lesion was 7 days. According to the removal rate, there was no statistical difference between T1 and T2 (baseline). Regarding the T2 and T3 time, there was a statistically significant difference (p≤0.029). Groups treated with ultrasound, showed a lower removal rate. In the longitudinal microhardness, considering the removal methods, at the same depths, in almost all groups there was a statistically significant difference (p≤0.05). Considering different depths in the same group, there was a significant difference in all depths (p≤0.05). The groups treated with aPDI after removing the infected dentin layer, there was a statistically significant difference when compared to the groups that were not treated with aPDI (p≤0.01) according to the results of the CFU/mL analysis and the viability of Streptococcus mutans was reduced after the application of the aPDI. In general, it can be concluded that the ultrasound device is efficient for the conservative removal of infected dentin layer and aPDI can be used as complementary therapy in order to reduce the bacteria present in the dentin layer it affected.
Descrição
Palavras-chave
Terapia por ultrassom, Fotoquimioterapia, Cárie dentária, Streptococcus mutans, Ultrasonic therapy, Photochemotherapy, Dental caries
Idioma
Português
